Allogent multivirus - rettet cytotoksiske T-lymfocytter (CTL)

Virusinfeksjoner kontrolleres normalt av T-celleimmunitet og er derfor en viktig årsak til sykelighet og dødelighet i perioden med immunrestitusjon etter hematopoetisk stamcelletransplantasjon (HSCT).1 Risiko for infeksjon påvirkes av graden av vevsmismatch mellom donor og mottaker og donorens immunstatus, inkludert graden og lengden av immunsuppresjon etter transplantasjon. Reaktivering av latente virus som cytomegalovirus (CMV) og Epstein-Barr-virus (EBV) er vanlig og forårsaker ofte symptomatisk sykdom. Luftveisvirus som adenovirus forårsaker også ofte infeksjon. Antivirale farmakologiske midler er bare effektive mot noen av disse virusene; bruken av dem er kostbar, og assosiert med betydelig toksisitet og utveksten av medikamentresistente mutanter. Ettersom forsinkelse i utvinning av virusspesifikk cellulær immunrespons tydelig er assosiert med viral reaktivering og sykdom hos disse pasientene, er cellulær immunterapi for å gjenopprette virusspesifikk immunitet et attraktivt alternativ som allerede har blitt brukt med hell for å målrette mot noen av disse virusene.

Multivirusspesifikke T-celler

For å utvide spesifisiteten til enkelt CTL-linjer til å inkludere de tre vanligste virale patogenene til stamcellemottakere, reaktiverte etterforskere CMV- og adenovirusspesifikke T-celler ved å bruke mononukleære celler transdusert med en rekombinant adenoviral vektor som koder for CMV-antigenet pp65 (Ad5f35CMVpp65). Påfølgende stimuleringer med EBV-LCL transdusert med samme vektor reaktiverte både EBV-spesifikke T-celler og opprettholdt utvidelsen av det aktiverte adenoviruset og CMV-spesifikke T-celler. Denne metoden produserte pålitelig CTL-er med cytotoksisk funksjon spesifikk for alle tre virusene, som etterforskere infunderte i 14 stamcellemottakere i en fase I-profylaksestudie. De observerte gjenoppretting av immunitet mot CMV og EBV hos alle pasienter, men en økning i adenovirusspesifikke T-celler ble bare sett hos pasienter som hadde tegn på adenovirusinfeksjon før infusjon. En oppfølgingsstudie der frekvensen av adenovirusspesifikke T-celler ble økt i de infunderte CTL-ene ga lignende resultater, og fremhevet dermed viktigheten av endogent antigen for å fremme utvidelsen av infunderte T-celler in vivo. Likevel var alle pasienter i begge kliniske studier med pre-infusjon CMV-, adenovirus- eller EBV-infeksjon eller reaktivering i stand til å fjerne infeksjonen, inkludert en pasient med alvorlig adenoviral pneumoni som trengte ventilasjonsstøtte. CTL-er som gjenkjenner flere antigener kan derfor gi klinisk relevante effekter mot alle tre virusene.

CTL-er for HSCT-pasienter med virusnaive donorer

Alle donorspesifikke T-cellestrategier som er diskutert så langt har brukt produkter avledet fra givere som er seropositive for viruset av interesse. Med den økende bruken av navlestrengsblod (CB)-transplantater er det et betydelig antall pasienter som er mottakere av virusnaive donortransplantater. CMV-reaktivering skjer vanligvis fra endogent virus og seropositive mottakere med seronegative donorer er fortsatt den høyeste risikogruppen for å utvikle CMV. Utviklingen av multivirusspesifikke T-celler fra mottakere av naivestrengsblodtransplantasjoner krever priming av naive T-celler i stedet for den enkle utvidelsen av allerede eksisterende minne-T-celler fra seropositive givere. Ved å bruke en protokoll som stimulerer CB-avledede T-celler med autologe CB-avledede dendrittiske celler og EBV-LCL transdusert med Ad5f35CMVpp65-vektoren i nærvær av IL-7, 12 og 15, kan multivirusspesifikke T-celler primes in vitro fra de 20 % brøkdel av en navlestrengsblodenhet. Så langt har åtte pasienter fått CTL som profylakse eller behandling etter CBT uten toksisitet. Ingen infusjonsrelaterte toksisiteter/GvHD er observert, og til tross for at de bare mottok 80 % av CB-enheten, transplanterte alle pasienter nøytrofiler innen 30 dager. Tidlig bevis på effekt har også blitt vist med clearance av EBV, CMV og adenovirus hos to pasienter og redusert EBV viral belastning hos en tredje, mens de andre 5 pasientene forblir virusfrie. Derfor antyder disse resultatene at overføring av naive T-celle (CB)-avledede virusspesifikke T-celler til pasienter etter CBT kan være trygg og lette langsiktig rekonstituering av virusspesifikke T-celler in vivo.