Multivírus alogênico - Linfócitos T citotóxicos direcionados (CTL)

As infecções virais são normalmente controladas pela imunidade das células T e, portanto, são uma causa importante de morbidade e mortalidade durante o período de recuperação imunológica após o transplante de células-tronco hematopoiéticas (HSCT).1 O risco de infecção é afetado pelo grau de incompatibilidade tecidual entre doador e receptor e o estado imunológico do doador, incluindo o grau e a duração da imunossupressão após o transplante. A reativação de vírus latentes, como citomegalovírus (CMV) e vírus Epstein-Barr (EBV), é comum e geralmente causa doença sintomática. Os vírus respiratórios, como o adenovírus, também freqüentemente causam infecção. Os agentes farmacológicos antivirais são eficazes apenas contra alguns desses vírus; seu uso é caro e está associado a toxicidades significativas e ao crescimento de mutantes resistentes a drogas. Como o atraso na recuperação da resposta imune celular específica do vírus está claramente associado à reativação viral e à doença nesses pacientes, a imunoterapia celular para restaurar a imunidade específica do vírus é uma opção atraente que já foi usada com sucesso para atingir alguns desses vírus.

Células T específicas para multivírus

Para ampliar a especificidade de linhas de CTL únicas para incluir os três patógenos virais mais comuns de receptores de células-tronco, os investigadores reativaram CMV e células T específicas de adenovírus usando células mononucleares transduzidas com um vetor adenoviral recombinante que codifica o antígeno CMV pp65 (Ad5f35CMVpp65). As estimulações subsequentes com EBV-LCL transduzidas com o mesmo vetor reativaram as células T específicas do EBV e mantiveram a expansão do adenovírus ativado e das células T específicas do CMV. Este método produziu de forma confiável CTLs com função citotóxica específica para todos os três vírus, que os investigadores infundiram em 14 receptores de células-tronco em um estudo de profilaxia de Fase I. Eles observaram a recuperação da imunidade ao CMV e EBV em todos os pacientes, mas um aumento nas células T específicas do adenovírus foi observado apenas em pacientes que apresentavam evidência de infecção por adenovírus antes da infusão. Um estudo de acompanhamento no qual a frequência de células T específicas de adenovírus foi aumentada nos CTLs infundidos produziu resultados semelhantes, destacando assim a importância do antígeno endógeno para promover a expansão de células T infundidas in vivo. No entanto, todos os pacientes em ambos os ensaios clínicos com infecção pré-infusão por CMV, adenovírus ou EBV ou reativação foram capazes de eliminar a infecção, incluindo um paciente com pneumonia adenoviral grave que requer suporte ventilatório. Os CTLs que reconhecem múltiplos antígenos podem, portanto, produzir efeitos clinicamente relevantes contra todos os três vírus.

CTLs para pacientes HSCT com doadores virgens de vírus

Todas as estratégias de células T específicas do doador discutidas até agora utilizaram produtos derivados de doadores que são soropositivos para o vírus de interesse. Com o uso crescente de enxertos de sangue do cordão umbilical (CB), há um número apreciável de pacientes que são receptores de enxertos de doadores virgens de vírus. A reativação do CMV geralmente ocorre a partir do vírus endógeno e os receptores soropositivos com doadores soronegativos continuam sendo o grupo de maior risco para o desenvolvimento do CMV. O desenvolvimento de células T específicas para multivírus de receptores de enxertos de sangue do cordão umbilical requer o priming de células T virgens em vez da simples expansão de células T de memória pré-existentes de doadores soropositivos. Usando um protocolo estimulando células T derivadas de CB com células dendríticas derivadas de CB autólogas e EBV-LCL transduzido com o vetor Ad5f35CMVpp65 na presença de IL-7, 12 e 15, as células T específicas de multivírus podem ser iniciadas in vitro a partir do 20 % fração de uma unidade de sangue do cordão umbilical. Até agora, oito pacientes receberam CTL como profilaxia ou tratamento após TCC sem toxicidade. Não foram observadas toxicidades/GvHD relacionadas à infusão e, apesar de receber apenas 80% da unidade CB, todos os pacientes enxertaram neutrófilos em 30 dias. Evidências iniciais de eficácia também foram demonstradas com eliminação de EBV, CMV e adenovírus em dois pacientes e diminuição da carga viral de EBV em um terço, com os outros 5 pacientes permanecendo livres de vírus. Portanto, esses resultados sugerem que a transferência de células T específicas de vírus derivadas de células T virgens (CB) para pacientes após TCC pode ser segura e facilitar a reconstituição a longo prazo de células T específicas de vírus in vivo.