Multivirus alogénico: linfocitos T citotóxicos dirigidos (CTL)

Las infecciones virales normalmente están controladas por la inmunidad de las células T y, por lo tanto, son una causa importante de morbilidad y mortalidad durante el período de recuperación inmunitaria después del trasplante de células madre hematopoyéticas (HSCT, por sus siglas en inglés). receptor y el estado inmunitario del donante, incluidos el grado y la duración de la inmunosupresión después del trasplante. La reactivación de virus latentes como el citomegalovirus (CMV) y el virus de Epstein-Barr (EBV) son comunes y, a menudo, causan una enfermedad sintomática. Los virus respiratorios como el adenovirus también causan infecciones con frecuencia. Los agentes farmacológicos antivirales solo son efectivos contra algunos de estos virus; su uso es costoso y está asociado con toxicidades significativas y la aparición de mutantes resistentes a los fármacos. Dado que el retraso en la recuperación de la respuesta inmunitaria celular específica de virus está claramente asociado con la reactivación viral y la enfermedad en estos pacientes, la inmunoterapia celular para restaurar la inmunidad específica de virus es una opción atractiva que ya se ha utilizado con éxito para atacar algunos de estos virus.

Células T específicas de multivirus

Para ampliar la especificidad de líneas únicas de CTL para incluir los tres patógenos virales más comunes de los receptores de células madre, los investigadores reactivaron células T específicas de CMV y adenovirus utilizando células mononucleares transducidas con un vector adenoviral recombinante que codifica el antígeno pp65 de CMV (Ad5f35CMVpp65). Las estimulaciones posteriores con EBV-LCL transducidas con el mismo vector reactivaron las células T específicas de EBV y mantuvieron la expansión del adenovirus activado y las células T específicas de CMV. Este método produjo de forma fiable CTL con función citotóxica específica para los tres virus, que los investigadores infundieron en 14 receptores de células madre en un estudio de profilaxis de Fase I. Observaron recuperación de la inmunidad a CMV y EBV en todos los pacientes, pero solo se observó un aumento en las células T específicas de adenovirus en pacientes que tenían evidencia de infección por adenovirus antes de la infusión. Un estudio de seguimiento en el que se incrementó la frecuencia de células T específicas de adenovirus en los CTL infundidos produjo resultados similares, destacando así la importancia del antígeno endógeno para promover la expansión de las células T infundidas in vivo. Sin embargo, todos los pacientes en ambos ensayos clínicos con infección o reactivación por CMV, adenovirus o EBV antes de la infusión pudieron eliminar la infección, incluido un paciente con neumonía adenoviral grave que requirió soporte ventilatorio. Por lo tanto, los CTL que reconocen múltiples antígenos pueden producir efectos clínicamente relevantes contra los tres virus.

CTL para pacientes con HSCT con donantes sin tratamiento previo con virus

Todas las estrategias de células T específicas del donante discutidas hasta ahora han utilizado productos derivados de donantes que son seropositivos para el virus de interés. Con el uso cada vez mayor de injertos de sangre de cordón umbilical (CB), hay un número apreciable de pacientes que son receptores de injertos de donantes sin virus. La reactivación de CMV generalmente ocurre a partir de virus endógenos y los receptores seropositivos con donantes seronegativos siguen siendo el grupo de mayor riesgo para desarrollar CMV. El desarrollo de células T específicas de multivirus a partir de receptores de injertos de sangre de cordón umbilical requiere la preparación de células T vírgenes en lugar de la simple expansión de células T de memoria preexistentes de donantes seropositivos. Usando un protocolo que estimula las células T derivadas de CB con células dendríticas derivadas de CB autólogas y EBV-LCL transducidas con el vector Ad5f35CMVpp65 en presencia de IL-7, 12 y 15, las células T específicas de multivirus se pueden cebar in vitro a partir de los 20 % fracción de una unidad de sangre de cordón. Hasta el momento, ocho pacientes han recibido CTL como profilaxis o tratamiento después de la TCC sin toxicidad. No se observaron toxicidades relacionadas con la infusión/EICH y, a pesar de recibir solo el 80 % de la unidad CB, todos los pacientes recibieron neutrófilos en un plazo de 30 días. También se ha demostrado la evidencia temprana de eficacia con la eliminación de EBV, CMV y adenovirus en dos pacientes y la disminución de la carga viral de EBV en un tercero, mientras que los otros 5 pacientes permanecieron libres de virus. Por lo tanto, estos resultados sugieren que la transferencia de células T específicas de virus derivadas de células T ingenuas (CB) a pacientes después de la TCC puede ser segura y facilitar la reconstitución a largo plazo de células T específicas de virus in vivo.