Allogeeninen multivirus - ohjatut sytotoksiset T-lymfosyytit (CTL)

Virusinfektioita hallitsee normaalisti T-soluimmuniteetti, ja siksi ne ovat tärkeä sairastuvuuden ja kuolleisuuden syy hematopoieettisten kantasolujen siirron (HSCT) jälkeisen immuunijärjestelmän palautumisen aikana.1 Infektioriskiin vaikuttaa kudosten epäsuhta luovuttajan ja luovuttajan välillä. vastaanottajan ja luovuttajan immuunitilanteen, mukaan lukien immunosuppression aste ja pituus transplantaation jälkeen. Piilevien virusten, kuten sytomegaloviruksen (CMV) ja Epstein-Barr-viruksen (EBV), uudelleenaktivoituminen on yleistä ja aiheuttaa usein oireenmukaista sairautta. Hengityselinten virukset, kuten adenovirus, aiheuttavat myös usein infektioita. Antiviraaliset farmakologiset aineet ovat tehokkaita vain joitain näistä viruksista; niiden käyttö on kallista, ja se liittyy merkittäviin toksisuuksiin ja lääkeresistenttien mutanttien kasvuun. Koska virusspesifisen soluimmuunivasteen palautumisen viivästyminen liittyy selvästi näiden potilaiden viruksen uudelleenaktivoitumiseen ja sairauksiin, soluimmunoterapia virusspesifisen immuniteetin palauttamiseksi on houkutteleva vaihtoehto, jota on jo onnistuneesti käytetty joidenkin näistä viruksista kohdistamiseen.

Multivirusspesifiset T-solut

Laajentaakseen yksittäisten CTL-linjojen spesifisyyttä sisältämään kolme yleisintä kantasolujen vastaanottajien viruspatogeeniä, tutkijat aktivoivat uudelleen CMV- ja adenovirusspesifisiä T-soluja käyttämällä mononukleaarisia soluja, jotka oli transdusoitu CMV-antigeeniä pp65 (Ad5f35CMVpp65) koodaavalla rekombinantilla adenovirusvektorilla. Myöhemmät stimulaatiot samalla vektorilla transdusoidulla EBV-LCL:llä sekä uudelleenaktivoivat EBV-spesifiset T-solut että ylläpisivät aktivoituneiden adenoviruksen ja CMV-spesifisten T-solujen laajentumista. Tämä menetelmä tuotti luotettavasti kaikille kolmelle virukselle spesifisiä sytotoksisia funktioita sisältäviä CTL-soluja, joita tutkijat infusoivat 14:lle kantasolun vastaanottajalle faasin I ennaltaehkäisytutkimuksessa. He havaitsivat immuniteetin palautumisen CMV- ja EBV-virusta vastaan ​​kaikilla potilailla, mutta adenovirusspesifisten T-solujen lisääntyminen havaittiin vain potilailla, joilla oli todisteita adenovirusinfektiosta ennen infuusiota. Seurantatutkimus, jossa adenovirusspesifisten T-solujen esiintymistiheyttä lisättiin infusoiduissa CTL-soluissa, saatiin samanlaisia ​​tuloksia, mikä korosti endogeenisen antigeenin tärkeyttä infusoitujen T-solujen laajentumisen edistämisessä in vivo. Siitä huolimatta kaikki potilaat molemmissa kliinisissä tutkimuksissa, joilla oli ennen infuusiota CMV-, adenovirus- tai EBV-infektio tai reaktivaatio, pystyivät poistamaan infektion, mukaan lukien yksi potilas, jolla oli vaikea adenoviruskeuhkokuume, joka vaati ventilaatiotukea. Useita antigeenejä tunnistavat CTL:t voivat siksi tuottaa kliinisesti merkittäviä vaikutuksia kaikkia kolmea virusta vastaan.

CTL-solut HSCT-potilaille, joilla ei ole viruksen saaneita luovuttajia

Kaikissa tähän mennessä käsitellyissä luovuttajaspesifisissä T-solustrategioissa on käytetty tuotteita, jotka on saatu luovuttajilta, jotka ovat seropositiivisia kiinnostuksen kohteena olevan viruksen suhteen. Napanuoraverisiirteiden (CB) käytön lisääntyessä on huomattava määrä potilaita, jotka ovat saaneet viruksen aiemmin käyttämättömiä luovuttajasiirteitä. CMV-uudelleenaktivoituminen tapahtuu yleensä endogeenisestä viruksesta, ja seropositiiviset vastaanottajat, joilla on seronegatiiviset luovuttajat, ovat edelleen suurin riskiryhmä CMV:n kehittymiselle. Monivirusspesifisten T-solujen kehittäminen napanuoraverisiirteiden vastaanottajista edellyttää naiivien T-solujen esikäsittelyä sen sijaan, että seropositiivisista luovuttajista saataisiin pelkkä olemassa olevien muisti-T-solujen laajentaminen. Käyttämällä protokollaa, joka stimuloi CB-peräisiä T-soluja autologisilla CB-peräisillä dendriittisoluilla ja EBV-LCL:llä, joka on transdusoitu Ad5f35CMVpp65-vektorilla IL-7:n, 12:n ja 15:n läsnä ollessa, monivirusspesifiset T-solut voidaan pohjustaa in vitro 20:stä. % napanuoraveren yksiköstä. Tähän mennessä kahdeksan potilasta on saanut CTL:ää ennaltaehkäisynä tai hoitona CBT:n jälkeen ilman toksisuutta. Mitään infuusioon liittyvää toksisuutta/GvHD:tä ei ole havaittu, ja huolimatta siitä, että he saivat vain 80 % CB-yksiköstä, kaikki potilaat siirsivät neutrofiilejä 30 päivän kuluessa. Varhaiset todisteet tehosta on myös osoitettu EBV:n, CMV:n ja adenoviruksen puhdistuman kahdella potilaalla ja EBV-viruskuorman vähenemisellä kolmanneksella, ja muut 5 potilasta ovat pysyneet viruksista vapaana. Siksi nämä tulokset viittaavat siihen, että naiivien T-soluista (CB) peräisin olevien virusspesifisten T-solujen siirto potilaille CBT:n jälkeen voi olla turvallista ja helpottaa virusspesifisten T-solujen pitkäaikaista uudelleenmuodostumista in vivo.