Allogenes Multivirus - gerichtete zytotoxische T-Lymphozyten (CTL)

Virusinfektionen werden normalerweise durch die T-Zell-Immunität kontrolliert und sind daher eine wichtige Ursache für Morbidität und Mortalität während der Zeit der Immunerholung nach einer hämatopoetischen Stammzelltransplantation (HSCT).1 Das Infektionsrisiko wird durch den Grad der Gewebeungleichheit zwischen Spender und Spender beeinflusst Empfänger und den Immunstatus des Spenders, einschließlich Grad und Dauer der Immunsuppression nach der Transplantation. Die Reaktivierung latenter Viren wie Cytomegalovirus (CMV) und Epstein-Barr-Virus (EBV) sind häufig und verursachen häufig symptomatische Erkrankungen. Atemwegsviren wie das Adenovirus verursachen ebenfalls häufig eine Infektion. Antivirale pharmakologische Mittel sind nur gegen einige dieser Viren wirksam; ihre Verwendung ist kostspielig und mit erheblichen Toxizitäten und dem Auswachsen von arzneimittelresistenten Mutanten verbunden. Da die Verzögerung der Wiederherstellung der virusspezifischen zellulären Immunantwort bei diesen Patienten eindeutig mit einer viralen Reaktivierung und Erkrankung verbunden ist, ist die zelluläre Immuntherapie zur Wiederherstellung der virusspezifischen Immunität eine attraktive Option, die bereits erfolgreich zur Bekämpfung einiger dieser Viren eingesetzt wurde.

Multivirus-spezifische T-Zellen

Um die Spezifität einzelner CTL-Linien auf die drei häufigsten viralen Pathogene von Stammzellempfängern zu erweitern, reaktivierten die Forscher CMV- und Adenovirus-spezifische T-Zellen, indem sie mononukleäre Zellen verwendeten, die mit einem rekombinanten adenoviralen Vektor transduziert wurden, der das CMV-Antigen pp65 (Ad5f35CMVpp65) codiert. Nachfolgende Stimulationen mit EBV-LCL, transduziert mit demselben Vektor, reaktivierten sowohl EBV-spezifische T-Zellen als auch hielten die Expansion des aktivierten Adenovirus und der CMV-spezifischen T-Zellen aufrecht. Diese Methode produzierte zuverlässig CTLs mit zytotoxischer Funktion, die für alle drei Viren spezifisch sind, die Forscher in einer Phase-I-Prophylaxestudie in 14 Stammzellempfänger infundierten. Sie beobachteten bei allen Patienten eine Wiederherstellung der Immunität gegen CMV und EBV, aber ein Anstieg der Adenovirus-spezifischen T-Zellen wurde nur bei Patienten beobachtet, bei denen vor der Infusion Anzeichen einer Adenovirus-Infektion vorlagen. Eine Nachfolgestudie, in der die Häufigkeit Adenovirus-spezifischer T-Zellen in den infundierten CTLs erhöht wurde, lieferte ähnliche Ergebnisse und unterstreicht damit die Bedeutung des endogenen Antigens zur Förderung der Expansion von infundierten T-Zellen in vivo. Dennoch konnten alle Patienten in beiden klinischen Studien mit CMV-, Adenovirus- oder EBV-Infektion oder -Reaktivierung vor der Infusion die Infektion beseitigen, einschließlich eines Patienten mit schwerer adenoviraler Pneumonie, der eine Beatmungsunterstützung benötigte. CTLs, die mehrere Antigene erkennen, können daher klinisch relevante Wirkungen gegen alle drei Viren hervorrufen.

CTLs für HSCT-Patienten mit virusnaiven Spendern

Alle bisher diskutierten spenderspezifischen T-Zell-Strategien haben Produkte verwendet, die von Spendern stammen, die für das interessierende Virus seropositiv sind. Mit der zunehmenden Verwendung von Transplantaten aus Nabelschnurblut (CB) gibt es eine beträchtliche Anzahl von Patienten, die Empfänger von virusnaiven Spendertransplantaten sind. Die CMV-Reaktivierung erfolgt normalerweise durch endogene Viren, und seropositive Empfänger mit seronegativen Spendern bleiben die Gruppe mit dem höchsten Risiko für die Entwicklung von CMV. Die Entwicklung multivirusspezifischer T-Zellen von Empfängern von Nabelschnurbluttransplantaten erfordert eher das Priming von naiven T-Zellen als die einfache Expansion von bereits existierenden Gedächtnis-T-Zellen von seropositiven Spendern. Unter Verwendung eines Protokolls, das CB-abgeleitete T-Zellen mit autologen CB-abgeleiteten dendritischen Zellen und EBV-LCL stimuliert, die mit dem Ad5f35CMVpp65-Vektor in Gegenwart von IL-7, 12 und 15 transduziert wurden, können Multivirus-spezifische T-Zellen in vitro aus den 20 geprimt werden % Anteil einer Nabelschnurbluteinheit. Bisher haben acht Patienten CTL als Prophylaxe oder Behandlung nach CBT ohne Toxizität erhalten. Es wurden keine infusionsbedingten Toxizitäten/GvHD beobachtet, und obwohl sie nur 80 % der CB-Einheit erhielten, transplantierten alle Patienten innerhalb von 30 Tagen Neutrophile. Frühe Beweise für die Wirksamkeit wurden auch mit der Beseitigung von EBV, CMV und Adenovirus bei zwei Patienten und einer Abnahme der EBV-Viruslast bei einem dritten gezeigt, während die anderen 5 Patienten virusfrei blieben. Daher legen diese Ergebnisse nahe, dass die Übertragung von naiven T-Zellen (CB)-abgeleiteten virusspezifischen T-Zellen auf Patienten nach CBT sicher sein und die langfristige Rekonstitution virusspezifischer T-Zellen in vivo erleichtern kann.