Allogén multivírus – Irányított citotoxikus T-limfociták (CTL)

A vírusfertőzéseket általában a T-sejtes immunitás szabályozza, ezért a hematopoetikus őssejt-transzplantációt (HSCT) követő immunrendszer felépülésének időszakában a morbiditás és mortalitás fontos oka.1 A fertőzés kockázatát befolyásolja a donor és a szövetek közötti eltérés mértéke. a recipiens és a donor immunstátusza, beleértve a transzplantációt követő immunszuppresszió mértékét és időtartamát. A látens vírusok, például a citomegalovírus (CMV) és az Epstein-Barr vírus (EBV) reaktiválása gyakori, és gyakran tüneti betegséget okoz. A légúti vírusok, például az adenovírus is gyakran okoznak fertőzést. A vírusellenes farmakológiai szerek csak néhány vírus ellen hatásosak; Használatuk költséges, és jelentős toxicitással és a gyógyszerrezisztens mutánsok növekedésével jár. Mivel a vírusspecifikus celluláris immunválasz felépülésének késése egyértelműen összefüggésbe hozható a vírus reaktiválásával és betegségeivel ezeknél a betegeknél, a vírusspecifikus immunitás helyreállítására szolgáló celluláris immunterápia vonzó lehetőség, amelyet már sikeresen alkalmaztak e vírusok némelyikének megcélzására.

Multivírus-specifikus T-sejtek

Annak érdekében, hogy az egyes CTL-vonalak specifitását az őssejt-recipiensek három leggyakoribb víruspatogénjére is kiterjesszék, a kutatók a CMV-antigént pp65 (Ad5f35CMVpp65) kódoló rekombináns adenovírus-vektorral transzdukált mononukleáris sejteket használva reaktiválták a CMV- és az adenovírus-specifikus T-sejteket. Az ugyanazzal a vektorral transzdukált EBV-LCL-lel végzett későbbi stimulációk egyaránt újraaktiválták az EBV-specifikus T-sejteket, és fenntartották az aktivált adenovírus és CMV-specifikus T-sejtek terjedését. Ez a módszer megbízhatóan termelt mindhárom vírusra specifikus citotoxikus funkciójú CTL-eket, amelyeket a kutatók 14 őssejt-recipiensbe juttattak be egy fázis I. profilaxis vizsgálatban. Minden betegnél megfigyelték a CMV-vel és EBV-vel szembeni immunitás helyreállítását, de az adenovírus-specifikus T-sejtek számának növekedését csak azoknál a betegeknél figyelték meg, akiknél az infúzió előtt adenovírusfertőzésről volt szó. Hasonló eredményeket produkált egy nyomon követési vizsgálat, amelyben az adenovírus-specifikus T-sejtek gyakoriságát megnövelték az infúzióval bevitt CTL-ekben, így rávilágított az endogén antigén fontosságára az infundált T-sejtek in vivo terjedésének elősegítésében. Mindazonáltal mindkét klinikai vizsgálatban az infúzió előtti CMV-, adenovírus- vagy EBV-fertőzésben vagy reaktivációban szenvedő betegek mindegyike képes volt megszabadulni a fertőzéstől, köztük egy súlyos adenovírusos tüdőgyulladásban szenvedő beteg, aki lélegeztetési támogatást igényelt. A több antigént felismerő CTL-ek ezért klinikailag jelentős hatást válthatnak ki mindhárom vírus ellen.

CTL-ek HSCT-betegek számára, akiknél naiv vírus donorok vannak

Az összes eddig tárgyalt donorspecifikus T-sejt-stratégia olyan donoroktól származó termékeket használt, akik szeropozitívak a kérdéses vírusra. A köldökzsinórvér (CB) graftok növekvő használatának köszönhetően jelentős számú olyan beteg van, akik vírus naiv donor graftot kapnak. A CMV reaktivációja általában endogén vírusból következik be, és a szeronegatív donorokkal rendelkező szeropozitív recipiensek továbbra is a legmagasabb kockázati csoport a CMV kialakulásában. A köldökzsinórvér-graftok recipienseiből származó multivírus-specifikus T-sejtek kifejlesztése a naiv T-sejtek beindítását igényli, nem pedig a szeropozitív donoroktól származó, már meglévő memória T-sejtek egyszerű kiterjesztését. A CB-eredetű T-sejteket autológ CB-eredetű dendritikus sejtekkel és az Ad5f35CMVpp65 vektorral IL-7, 12 és 15 jelenlétében transzdukált EBV-LCL-lel stimuláló protokoll alkalmazásával a multivírus-specifikus T-sejtek in vitro indíthatók a 20-ból. A köldökzsinórvér egység %-os töredéke. Eddig nyolc beteg kapott CTL-t profilaxisként vagy kezelésként CBT után toxicitás nélkül. Nem figyeltek meg infúzióval összefüggő toxicitást/GvHD-t, és annak ellenére, hogy a CB-egységnek csak 80%-át kapták, 30 napon belül minden beteg beültetett neutrofileket. A hatékonyság korai bizonyítékát az EBV, a CMV és az adenovírus kiürülése is kimutatta két betegnél, és az EBV vírusterhelés egyharmadánál csökkent, a másik 5 beteg pedig vírusmentes maradt. Ezért ezek az eredmények azt sugallják, hogy a naiv T-sejtből (CB) származó vírusspecifikus T-sejtek átvitele a betegekbe CBT után biztonságos lehet, és elősegítheti a vírusspecifikus T-sejtek hosszú távú helyreállítását in vivo.