Multivirus allogénique - Lymphocytes T cytotoxiques dirigés (CTL)

Les infections virales sont normalement contrôlées par l'immunité des lymphocytes T et sont donc une cause importante de morbidité et de mortalité pendant la période de rétablissement immunitaire après une greffe de cellules souches hématopoïétiques (GCSH).1 Le risque d'infection est influencé par le degré d'inadéquation tissulaire entre le donneur et receveur et le statut immunitaire du donneur, y compris le degré et la durée de l'immunosuppression après la transplantation. La réactivation de virus latents tels que le cytomégalovirus (CMV) et le virus d'Epstein-Barr (EBV) est courante et provoque souvent une maladie symptomatique. Les virus respiratoires tels que l'adénovirus provoquent également fréquemment une infection. Les agents pharmacologiques antiviraux ne sont efficaces que contre certains de ces virus ; leur utilisation est coûteuse et associée à des toxicités importantes et à la prolifération de mutants résistants aux médicaments. Comme le retard dans la récupération de la réponse immunitaire cellulaire spécifique au virus est clairement associé à la réactivation virale et à la maladie chez ces patients, l'immunothérapie cellulaire pour restaurer l'immunité spécifique au virus est une option intéressante qui a déjà été utilisée avec succès pour cibler certains de ces virus.

Cellules T spécifiques aux multivirus

Pour élargir la spécificité des lignées CTL uniques afin d'inclure les trois agents pathogènes viraux les plus courants des receveurs de cellules souches, les chercheurs ont réactivé les cellules T spécifiques du CMV et de l'adénovirus en utilisant des cellules mononucléaires transduites avec un vecteur adénoviral recombinant codant pour l'antigène CMV pp65 (Ad5f35CMVpp65). Des stimulations ultérieures avec EBV-LCL transduites avec le même vecteur ont à la fois réactivé les cellules T spécifiques de l'EBV et maintenu l'expansion de l'adénovirus activé et des cellules T spécifiques du CMV. Cette méthode a produit de manière fiable des CTL avec une fonction cytotoxique spécifique pour les trois virus, que les chercheurs ont infusés dans 14 receveurs de cellules souches dans une étude de prophylaxie de phase I. Ils ont observé une récupération de l'immunité contre le CMV et l'EBV chez tous les patients, mais une augmentation des lymphocytes T spécifiques à l'adénovirus n'a été observée que chez les patients qui présentaient des signes d'infection par l'adénovirus avant la perfusion. Une étude de suivi dans laquelle la fréquence des lymphocytes T spécifiques de l'adénovirus a été augmentée dans les CTL infusés a produit des résultats similaires, soulignant ainsi l'importance de l'antigène endogène pour favoriser l'expansion des lymphocytes T infusés in vivo. Néanmoins, tous les patients des deux essais cliniques présentant une infection ou une réactivation par le CMV, l'adénovirus ou l'EBV avant la perfusion ont pu éliminer l'infection, y compris un patient atteint d'une pneumonie adénovirale sévère nécessitant une assistance ventilatoire. Les CTL reconnaissant plusieurs antigènes peuvent donc produire des effets cliniquement pertinents contre les trois virus.

CTL pour les patients HSCT avec des donneurs naïfs de virus

Toutes les stratégies de cellules T spécifiques aux donneurs discutées jusqu'à présent ont utilisé des produits dérivés de donneurs qui sont séropositifs pour le virus d'intérêt. Avec l'utilisation croissante des greffes de sang de cordon (CB), il existe un nombre appréciable de patients qui reçoivent des greffes de donneurs naïfs de virus. La réactivation du CMV se produit généralement à partir d'un virus endogène et les receveurs séropositifs avec des donneurs séronégatifs restent le groupe le plus à risque de développer le CMV. Le développement de lymphocytes T spécifiques de multivirus à partir de receveurs de greffes de sang de cordon nécessite l'amorçage de lymphocytes T naïfs plutôt que la simple expansion de lymphocytes T mémoire préexistants provenant de donneurs séropositifs. En utilisant un protocole stimulant les cellules T dérivées de CB avec des cellules dendritiques autologues dérivées de CB et EBV-LCL transduites avec le vecteur Ad5f35CMVpp65 en présence d'IL-7, 12 et 15, les cellules T spécifiques de multivirus peuvent être amorcées in vitro à partir du 20 Fraction % d'une unité de sang de cordon. Jusqu'à présent, huit patients ont reçu des CTL en prophylaxie ou en traitement après une TCC sans toxicité. Aucune toxicité liée à la perfusion/GvHD n'a été observée et bien qu'ils n'aient reçu que 80 % de l'unité CB, tous les patients ont reçu des neutrophiles greffés dans les 30 jours. Des preuves précoces d'efficacité ont également été démontrées avec une élimination de l'EBV, du CMV et de l'adénovirus chez deux patients et une diminution de la charge virale de l'EBV chez un tiers, les 5 autres patients restant indemnes de virus. Par conséquent, ces résultats suggèrent que le transfert de lymphocytes T naïfs (CB) dérivés du virus spécifique aux patients après la TCC peut être sûr et faciliter la reconstitution à long terme des lymphocytes T spécifiques du virus in vivo.