Multivirus allogenico - Linfociti T citotossici diretti (CTL)

Le infezioni virali sono normalmente controllate dall'immunità delle cellule T e quindi sono un'importante causa di morbilità e mortalità durante il periodo di recupero immunitario dopo il trapianto di cellule staminali ematopoietiche (HSCT).1 Il rischio di infezione è influenzato dal grado di discrepanza tissutale tra donatore e ricevente e lo stato immunitario del donatore, compreso il grado e la durata dell'immunosoppressione dopo il trapianto. La riattivazione di virus latenti come il citomegalovirus (CMV) e il virus di Epstein-Barr (EBV) sono comuni e spesso causano malattie sintomatiche. Anche i virus respiratori come l'adenovirus causano spesso infezioni. Gli agenti farmacologici antivirali sono efficaci solo contro alcuni di questi virus; il loro uso è costoso e associato a tossicità significative e alla crescita di mutanti resistenti ai farmaci. Poiché il ritardo nel recupero della risposta immunitaria cellulare specifica del virus è chiaramente associato alla riattivazione virale e alla malattia in questi pazienti, l'immunoterapia cellulare per ripristinare l'immunità specifica del virus è un'opzione interessante che è già stata utilizzata con successo per colpire alcuni di questi virus.

Cellule T multivirus-specifiche

Per ampliare la specificità delle singole linee CTL per includere i tre patogeni virali più comuni dei riceventi di cellule staminali, i ricercatori hanno riattivato le cellule T CMV e specifiche dell'adenovirus utilizzando cellule mononucleate trasdotte con un vettore adenovirale ricombinante che codifica l'antigene CMV pp65 (Ad5f35CMVpp65). Successive stimolazioni con EBV-LCL trasdotte con lo stesso vettore hanno riattivato le cellule T specifiche per EBV e hanno mantenuto l'espansione dell'adenovirus attivato e delle cellule T specifiche per CMV. Questo metodo ha prodotto in modo affidabile CTL con funzione citotossica specifica per tutti e tre i virus, che i ricercatori hanno infuso in 14 riceventi di cellule staminali in uno studio di profilassi di Fase I. Hanno osservato il recupero dell'immunità a CMV ed EBV in tutti i pazienti, ma un aumento delle cellule T specifiche dell'adenovirus è stato osservato solo nei pazienti che presentavano evidenza di infezione da adenovirus prima dell'infusione. Uno studio di follow-up in cui la frequenza delle cellule T specifiche dell'adenovirus è stata aumentata nei CTL infusi ha prodotto risultati simili, evidenziando così l'importanza dell'antigene endogeno per promuovere l'espansione delle cellule T infuse in vivo. Tuttavia, tutti i pazienti in entrambi gli studi clinici con infezione o riattivazione da CMV, adenovirus o EBV pre-infusione sono stati in grado di eliminare l'infezione, incluso un paziente con polmonite adenovirale grave che necessitava di supporto ventilatorio. I CTL che riconoscono più antigeni possono quindi produrre effetti clinicamente rilevanti contro tutti e tre i virus.

CTL per pazienti HSCT con donatori naïve al virus

Tutte le strategie di cellule T specifiche del donatore discusse finora hanno utilizzato prodotti derivati ​​da donatori sieropositivi per il virus di interesse. Con il crescente uso di innesti di sangue cordonale (SCO) vi è un numero considerevole di pazienti che ricevono innesti da donatore naïve al virus. La riattivazione del CMV di solito si verifica a causa del virus endogeno e i riceventi sieropositivi con donatori sieronegativi rimangono il gruppo a più alto rischio di sviluppare il CMV. Lo sviluppo di cellule T multivirus specifiche da riceventi di innesti di sangue del cordone ombelicale richiede l'innesco di cellule T naïve piuttosto che la semplice espansione di cellule T di memoria preesistenti da donatori sieropositivi. Utilizzando un protocollo che stimola le cellule T derivate da CB con cellule dendritiche derivate da CB autologhe e EBV-LCL trasdotte con il vettore Ad5f35CMVpp65 in presenza di IL-7, 12 e 15, le cellule T multivirus specifiche possono essere innescate in vitro dal 20 % frazione di un'unità di sangue cordonale. Finora, otto pazienti hanno ricevuto CTL come profilassi o trattamento dopo CBT senza tossicità. Non sono state osservate tossicità correlate all'infusione/GvHD e nonostante abbiano ricevuto solo l'80% dell'unità di SCO, tutti i pazienti hanno trapiantato i neutrofili entro 30 giorni. Prove iniziali di efficacia sono state dimostrate anche con la clearance di EBV, CMV e adenovirus in due pazienti e la diminuzione della carica virale di EBV in un terzo, mentre gli altri 5 pazienti sono rimasti liberi dal virus. Pertanto, questi risultati suggeriscono che il trasferimento di cellule T specifiche del virus derivate da cellule T naive (CB) ai pazienti dopo la CBT può essere sicuro e facilitare la ricostituzione a lungo termine delle cellule T specifiche del virus in vivo.