Allogen multivirus - rettet cytotoksiske T-lymfocytter (CTL)

Virale infektioner styres normalt af T-celleimmunitet og er derfor en vigtig årsag til morbiditet og dødelighed i perioden med immunrestitution efter hæmatopoietisk stamcelletransplantation (HSCT).1 Risikoen for infektion påvirkes af graden af ​​vævsmismatch mellem donor og modtager og donorens immunstatus, herunder graden og længden af ​​immunsuppression efter transplantation. Reaktivering af latente vira såsom cytomegalovirus (CMV) og Epstein-Barr virus (EBV) er almindelige og forårsager ofte symptomatisk sygdom. Luftvejsvira såsom adenovirus forårsager også ofte infektion. Antivirale farmakologiske midler er kun effektive mod nogle af disse vira; deres anvendelse er dyr og forbundet med betydelig toksicitet og udvækst af lægemiddelresistente mutanter. Da forsinkelse i genopretning af virusspecifik cellulær immunrespons tydeligt er forbundet med viral reaktivering og sygdom hos disse patienter, er cellulær immunterapi for at genoprette virusspecifik immunitet en attraktiv mulighed, som allerede er blevet brugt med succes til at målrette nogle af disse vira.

Multivirus-specifikke T-celler

For at udvide specificiteten af ​​enkelte CTL-linjer til at omfatte de tre mest almindelige virale patogener fra stamcellemodtagere, reaktiverede efterforskerne CMV- og adenovirus-specifikke T-celler ved at bruge mononukleære celler transduceret med en rekombinant adenoviral vektor, der koder for CMV-antigenet pp65 (Ad5f35CMVpp65). Efterfølgende stimuleringer med EBV-LCL transduceret med den samme vektor reaktiverede både EBV-specifikke T-celler og opretholdt udvidelsen af ​​det aktiverede adenovirus og CMV-specifikke T-celler. Denne metode producerede pålideligt CTL'er med cytotoksisk funktion specifik for alle tre vira, som forskere infunderede i 14 stamcellemodtagere i et fase I profylaksestudie. De observerede genopretning af immunitet over for CMV og EBV hos alle patienter, men en stigning i adenovirus-specifikke T-celler blev kun set hos patienter, som havde tegn på adenovirusinfektion før infusion. En opfølgningsundersøgelse, hvor frekvensen af ​​adenovirus-specifikke T-celler blev øget i de infunderede CTL'er, frembragte lignende resultater, hvilket fremhævede vigtigheden af ​​endogent antigen for at fremme ekspansionen af ​​infunderede T-celler in vivo. Ikke desto mindre var alle patienter i begge kliniske forsøg med pre-infusion CMV, adenovirus eller EBV infektion eller reaktivering i stand til at fjerne infektionen, inklusive en patient med svær adenoviral lungebetændelse, der krævede ventilatorisk støtte. CTL'er, der genkender flere antigener, kan derfor producere klinisk relevante virkninger mod alle tre vira.

CTL'er til HSCT-patienter med virusnaive donorer

Alle de donorspecifikke T-cellestrategier, der er diskuteret indtil videre, har brugt produkter afledt af donorer, som er seropositive for virussen af ​​interesse. Med den stigende brug af navlestrengsblod (CB)-transplantater er der et betydeligt antal patienter, som modtager virus-naive donortransplantater. CMV-reaktivering sker normalt fra endogene virus, og seropositive modtagere med seronegative donorer er fortsat den højeste risikogruppe for at udvikle CMV. Udviklingen af ​​multivirusspecifikke T-celler fra modtagere af navlestrengsblodtransplantationer kræver priming af naive T-celler snarere end den simple udvidelse af allerede eksisterende hukommelses-T-celler fra seropositive donorer. Ved at bruge en protokol, der stimulerer CB-afledte T-celler med autologe CB-afledte dendritiske celler og EBV-LCL transduceret med Ad5f35CMVpp65-vektoren i nærvær af IL-7, 12 og 15, kan multivirus-specifikke T-celler primes in vitro fra de 20 % brøkdel af en navlestrengsblod enhed. Hidtil har otte patienter modtaget CTL som profylakse eller behandling efter CBT uden toksicitet. Ingen infusionsrelaterede toksiciteter/GvHD er blevet observeret, og på trods af at de kun modtog 80 % af CB-enheden, transplanterede alle patienter neutrofiler inden for 30 dage. Tidlig evidens for effekt er også blevet påvist med clearance af EBV, CMV og adenovirus hos to patienter og faldende EBV viral load hos en tredje, mens de øvrige 5 patienter forbliver virusfrie. Derfor tyder disse resultater på, at overførsel af naive T-celle (CB)-afledte virusspecifikke T-celler til patienter efter CBT kan være sikker og lette langsigtet rekonstitution af virusspecifikke T-celler in vivo.