西洛他唑内皮祖细胞和侧支形成在外周动脉闭塞病 (PAOD) 中的作用
2014年7月16日 更新者：National Cheng-Kung University Hospital
双能 128 排 CT 血管造影通过多种机制介导的轻中度 PAOD 患者评估西洛他唑增强循环内皮祖细胞和侧支形成的数量和功能
- 循环内皮祖细胞 (EPC) 的数量和功能与冠状动脉危险因素和动脉粥样硬化疾病（如 PAOD）呈负相关。
- 这项双盲、随机、安慰剂对照试验旨在评估西洛他唑对人类早期 EPC 和血管生成的影响，以及轻度至中度 PAOD 患者的潜在作用机制。
研究概览
详细说明
药物滴定
- 磨合期：筛选符合条件的受试者并获取基线血样
学习时间：12周
- 24 名服用西洛他唑的受试者和 20 名服用安慰剂的受试者
- 在研究期结束后的第一天，通过相同的程序获得后续数据
血液采样和血清生物标志物的测量
- 在磨合期和研究治疗期结束时从所有研究对象的外周静脉获得
- 用于人类 EPC 的分离、细胞培养和分析
- 还储存用于酶联免疫吸附试验（基质细胞衍生因子-alfa1、脂联素、可溶性血栓调节蛋白、血管内皮生长因子）
人类内皮祖细胞的分析
- EPC 的集落形成
- EPC 和凋亡内皮细胞的定量
- 趋化运动、增殖/活力和细胞凋亡测定
- 通过双能多层计算机断层扫描血管造影评估侧支血管形成和远端径流
- 超声心动图检查以评估左心室功能
研究类型
介入性
注册 (实际的)
44
阶段
- 第四阶段
联系人和位置
本节提供了进行研究的人员的详细联系信息，以及有关进行该研究的地点的信息。
学习地点
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-
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Tainan、台湾、704
- National Cheng Kung University Hospital
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参与标准
研究人员寻找符合特定描述的人，称为资格标准。这些标准的一些例子是一个人的一般健康状况或先前的治疗。
资格标准
适合学习的年龄
20年 及以上 (成人、年长者)
接受健康志愿者
不
有资格学习的性别
全部
描述
纳入标准：
- 单腿或双腿踝臂指数 (ABI) 小于 0.9，但无明显间歇性跛行症状
排除标准：
- 明显的间歇性跛行症状
- 严重 PAD（Fontaine 分级 > 3）或至少一条腿严重肢体缺血
- 严重肝功能障碍（转氨酶>正常上限10倍，有肝硬化或肝癌病史）
- > 4 期慢性肾病（不排除慢性透析的终末期肾病）
- 超声心动图检查左心室射血分数 <50%
- 有记录的活动性恶性肿瘤
- 慢性炎症性疾病
- 计划在 3 个月内进行冠状动脉介入治疗或血管内治疗或搭桥手术
- 已知的西洛他唑药物过敏史
- 当前使用西洛他唑或任何其他 cAMP 提升剂
- 绝经前妇女
学习计划
本节提供研究计划的详细信息，包括研究的设计方式和研究的衡量标准。
研究是如何设计的？
设计细节
- 主要用途：治疗
- 分配：随机化
- 介入模型：并行分配
- 屏蔽：四人间
武器和干预
参与者组/臂 |
干预/治疗 |
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有源比较器：西洛他唑
每天两次一粒（100 毫克），持续 12 周
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每天两次一粒（100 毫克），持续 12 周
其他名称：
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安慰剂比较：虚拟安慰剂
每天两次，每次一粒，持续 12 周
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每天两次，每次一粒，持续 12 周
其他名称：
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研究衡量的是什么？
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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循环 EPC 编号
大体时间：3个月
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外周血单核细胞（每个细胞一百万个）悬浮在 100 µL 磷酸盐缓冲盐水中，并与针对人多甲藻素叶绿素蛋白偶联的分化抗原 45 簇、藻红蛋白偶联的抗人 45 簇的单克隆抗体孵育 30 分钟与 Alexa Flour 647 偶联的分化抗原 34 抗体和抗人激酶插入域受体 (KDR) 抗体。
洗涤细胞并在 FACSCalibur 流式细胞仪上进行分析，淋巴细胞门中有 100,000 个事件。
EPCs，定义为分化抗原簇 45 阴性，分化抗原簇 34 和 KDR 阳性。
根据外周血单个核细胞计数，计算循环 EPCs/µL 的绝对数量。
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3个月
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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EPC 的集落形成
大体时间：3个月
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根据标准方案通过密度梯度离心分离外周血单核细胞。
离心后，洗涤细胞，重悬于添加有 20% (vol/vol) 胎牛血清、10 ng/ml 血管内皮生长因子、2 ng/ml 碱性成纤维细胞生长因子、10 ng/ml 表皮生长因子的 M199 培养基中和2 ng/ml胰岛素生长因子，在涂有人纤连蛋白的24孔板中培养7天。
EPC 细胞通过摄取乙酰低密度脂蛋白和凝集素以及通过 EPC 标记物的表达得到证实。
7 天后收获细胞，固定并用结晶紫试剂染色。
使用成像测量软件在放大 100 倍的奥林巴斯显微镜下对菌落密度进行量化。
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3个月
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其他结果措施
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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EPC 的生存能力（增殖）
大体时间：3个月
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将250,000个细胞接种于96孔板的每个孔中，向细胞中加入200μl培养基并在37℃下孵育。
3 天后进行培养基更换。
在第 7 天，将板与 100 μl 新鲜培养基和额外的 50 μl 2,3-Bis-(2-Methoxy-4-Nitro-5-Sulfophenyl)-2 Hydrogen-Tetrazolium-5-Carboxanilide 试剂一起重新孵育, 并进一步在 37°C 的黑暗中孵育 4 小时。
孵育后，使用带有 450 nm 参考滤光片的酶标仪在 450 nm 处读取形成的橙色复合物。
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3个月
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合作者和调查者
在这里您可以找到参与这项研究的人员和组织。
出版物和有用的链接
负责输入研究信息的人员自愿提供这些出版物。这些可能与研究有关。
一般刊物
- Chao TH, Tseng SY, Li YH, Liu PY, Cho CL, Shi GY, Wu HL, Chen JH. A novel vasculo-angiogenic effect of cilostazol mediated by cross-talk between multiple signalling pathways including the ERK/p38 MAPK signalling transduction cascade. Clin Sci (Lond). 2012 Aug 1;123(3):147-59. doi: 10.1042/CS20110432.
- Biscetti F, Pecorini G, Straface G, Arena V, Stigliano E, Rutella S, Locatelli F, Angelini F, Ghirlanda G, Flex A. Cilostazol promotes angiogenesis after peripheral ischemia through a VEGF-dependent mechanism. Int J Cardiol. 2013 Aug 10;167(3):910-6. doi: 10.1016/j.ijcard.2012.03.103. Epub 2012 Apr 2.
- Chao TH, Chen IC, Li YH, Lee PT, Tseng SY. Plasma Levels of Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 Are Elevated in Patients With Peripheral Artery Disease and Associated With Metabolic Disorders and Dysfunction in Circulating Progenitor Cells. J Am Heart Assoc. 2016 May 20;5(5):e003497. doi: 10.1161/JAHA.116.003497. Erratum In: J Am Heart Assoc. 2016;5(7). pii: e002090. doi: 10.1161/JAHA.116.002090.
研究记录日期
这些日期跟踪向 ClinicalTrials.gov 提交研究记录和摘要结果的进度。研究记录和报告的结果由国家医学图书馆 (NLM) 审查，以确保它们在发布到公共网站之前符合特定的质量控制标准。
研究主要日期
学习开始
2012年1月1日
初级完成 (实际的)
2013年9月1日
研究完成 (实际的)
2013年9月1日
研究注册日期
首次提交
2013年9月21日
首先提交符合 QC 标准的
2013年9月25日
首次发布 (估计)
2013年9月30日
研究记录更新
最后更新发布 (估计)
2014年7月18日
上次提交的符合 QC 标准的更新
2014年7月16日
最后验证
2014年7月1日
更多信息
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