精子DNA片段化和精子形态学对辅助生殖治疗的诊断价值

这项研究将在私人试管婴儿中心进行。 本研究的目的是确定精液处理前后精子 DNA 碎片水平和精子形态在预测辅助生殖结果中的预后价值。

60 对夫妇将在私人试管婴儿中心接受 ICSI 周期。 所有患者都将经历一个 ICSI 周期。 监测：通过经阴道超声监测COH，然后根据卵泡大小和数量调整促性腺激素的剂量。

触发排卵：当三个或更多卵泡达到>18mm，子宫内膜三线超过8mm时，停止促性腺激素和激动剂注射，给予10,000 IU hCG。

取卵：hCG 注射后 34-36 小时，胚胎移植：取卵后 48-72 小时。 黄体期支持：每天肌肉注射 100 毫克黄体酮，直至妊娠试验当天。

妊娠试验：胚胎移植后15天。 精液采集和制备。 通常在禁欲 2-3 天后，通过手淫将精液样本收集在干净的容器中。 每个样品将被允许在 37°C 下液化至少 20 分钟。

精液分析：

将根据世界卫生组织指南评估基本精子参数，包括精子数量、浓度、活力和形态。 初步评估后，将精液分成三份。 每个样本的等分试样将用于评估精子 DNA 损伤，第二个等分试样将通过直接上游技术 (n 30) 或 zeta 测试技术 (n 30) 进行处理，随后将再次评估每个样本中的 DNA 损伤样品以测量每种技术处理后 DNA 损伤的差异，然后使用精子染色和光学显微镜对来自第三等份的精子进行形态学手动分析，并将根据 WHO 进行评分。

DNA 片段化分析：

将使用改进版的精子染色质分散测试在处理每个样本之前和之后测量 DNA 损伤的评估。 样品将准备用于分析。 需要染色步骤来评估准备好的载玻片。 样品将用 Diff-Quik 溶液染色，将每张载玻片分别浸入 Diff-Quik 溶液 I（嗜酸性）和 Diff-Quik 溶液 II（嗜碱性）中 6 分钟，让其在室温下干燥。然后检查载玻片在明场显微镜下。