Valeur diagnostique de la fragmentation de l'ADN du sperme et de la morphologie du sperme pour le traitement de procréation assistée

Cette étude sera réalisée dans des centres privés de FIV. Le but de cette étude est de déterminer la valeur pronostique des niveaux de fragmentation de l'ADN du sperme avant et après le traitement du sperme et la morphologie du sperme pour prédire le résultat de la procréation assistée.

60 couples suivront des cycles ICSI dans des centres privés de FIV. Tous les patients passeront par un cycle ICSI. Surveillance : la COH sera surveillée par échographie transvaginale, puis la dose de gonadotrophine sera ajustée en fonction de la taille et du nombre de follicules.

Déclenchement de l'ovulation : lorsque trois follicules ou plus atteignent > 18 mm, la ligne triple de l'endomètre dépasse 8 mm, les injections de gonadotrophine et d'agoniste seront arrêtées et 10 000 UI d'hCG seront administrées.

Collecte des ovules : 34-36 heures après l'injection d'hCG, transfert d'embryons : 48-72 heures après le prélèvement des ovocytes. Accompagnement de la phase lutéale : avec 100 mg de progestérone en injection intramusculaire quotidienne jusqu'au jour du test de grossesse.

test de grossesse : 15 jours après le transfert d'embryon. Collecte et préparation du sperme. Les échantillons de sperme seront prélevés par masturbation dans des récipients propres, généralement après 2-3 jours d'abstinence. Chaque échantillon pourra se liquéfier pendant au moins 20 min à 37 °C.

Analyse de sperme :

Les paramètres de base du sperme, notamment le nombre de spermatozoïdes, la concentration, la motilité et la morphologie, seront évalués conformément aux directives de l'Organisation mondiale de la santé . Après l'évaluation initiale, les éjaculats seront divisés en trois aliquotes. Une aliquote de chaque échantillon sera utilisée pour évaluer les dommages à l'ADN du sperme, la deuxième aliquote sera traitée par une technique de nage directe (n 30) ou une technique de test zêta (n 30), suivie d'une nouvelle évaluation des dommages à l'ADN dans chaque échantillon pour mesurer la différence des dommages à l'ADN après traitement dans chaque technique, puis les spermatozoïdes de la troisième aliquote seront analysés morphologiquement manuellement à l'aide d'une coloration spermique et d'un microscope optique et seront notés selon l'OMS.

Test de fragmentation de l'ADN :

L'évaluation des dommages à l'ADN sera mesurée avant et après le traitement de chaque échantillon à l'aide d'une version améliorée du test de dispersion de la chromatine du sperme. Des échantillons seront préparés pour analyse. étape de coloration sera nécessaire pour évaluer les lames préparées. Les échantillons seront colorés avec la solution Diff-Quik, immergeant chaque lame dans la solution Diff-Quik I (éosinophile) et la solution Diff-Quik II (basophile) pendant 6 min chacune, laisser sécher à température ambiante. puis la lame sera examinée sous microscope à fond clair.