Diagnostiskt värde av spermie-DNA-fragmentering och spermiemorfologi för assisterad reproduktionsbehandling

Denna studie kommer att genomföras i privata centra för IVF. Syftet med denna studie är att fastställa det prognostiska värdet av sperma-DNA-fragmenteringsnivåer före och efter spermabehandling och spermiemorfologi för att förutsäga resultatet av assisterad reproduktion.

60 par kommer att genomgå ICSI-cykler i privata centra för IVF. Alla patienter kommer att gå igenom en ICSI-cykel. Övervakning: COH kommer att övervakas med transvaginal sonografi, och sedan kommer dosen av gonadotropin att anpassas efter follikelstorlek och antal.

Utlöser ägglossning: när tre eller fler folliklar når >18 mm, endometriums trippellinje mer än 8 mm, kommer både gonadotropin- och agonistinjektionerna att stoppas och 10 000 IE hCG ges.

Ägguppsamling: 34-36 timmar efter hCG-injektion, embryoöverföring: 48-72 timmar efter oocythämtning. Lutealfasstöd: med 100 mg progesteroninjektion intramuskulärt dagligen fram till dagen för graviditetstestet.

Graviditetstest: 15 dagar efter embryoöverföringen. Spermainsamling och förberedelse. Spermaprover kommer att samlas in genom onani i rena behållare, vanligtvis efter 2-3 dagars abstinens. Varje prov kommer att tillåtas smälta i minst 20 minuter vid 37 °C.

Spermaanalys:

Grundläggande spermieparametrar inklusive spermieantal, koncentration, motilitet och morfologi kommer att utvärderas enligt Världshälsoorganisationens riktlinjer. Efter den första bedömningen kommer ejakulaten att delas upp i tre alikvoter. En alikvot av varje prov kommer att användas för att bedöma spermie-DNA-skada, den andra alikvoten kommer att bearbetas med direkt sim-upp-teknik (n 30) eller zeta-testteknik (n 30) detta kommer att följas av bedömning av DNA-skada igen i varje prov för att mäta skillnaden i DNA-skada efter bearbetning i varje teknik, sedan kommer spermier från den tredje alikvoten att morfologiskt analyseras manuellt med användning av spermisk färgning och ett ljusmikroskop och kommer att bedömas enligt WHO.

DNA-fragmenteringsanalys:

Bedömningen av DNA-skada kommer att mätas före och efter bearbetning för varje prov med en förbättrad version av spermiekromatin-dispersionstestet. Prover kommer att förberedas för analys. färgningssteg kommer att krävas för att utvärdera de förberedda objektglasen. Proverna kommer att färgas med Diff-Quik-lösning, nedsänkning av varje objektglas i Diff-Quik-lösning I (eosinofil) och Diff-Quik-lösning II (basofil) i 6 minuter vardera, får torka vid rumstemperatur. Sedan kommer objektglaset att undersökas under ljusfältsmikroskop.