生殖補助医療における精子 DNA 断片化と精子形態の診断価値

この研究は民間の体外受精センターで実施されます。 この研究の目的は、生殖補助医療の結果を予測する際に、精液処理前後の精子の DNA 断片化レベルと精子の形態の予後価値を判断することです。

60組のカップルが民間の体外受精センターでICSIサイクルを受けることになる。 すべての患者はICSIサイクルを経ます。 モニタリング: COH は経膣超音波検査によってモニタリングされ、卵胞の大きさと数に応じてゴナドトロピンの投与量が調整されます。

排卵の誘発：3つ以上の卵胞が18mmを超え、子宮内膜の三重線が8mmを超えた場合、ゴナドトロピンとアゴニストの両方の注射が中止され、10,000 IUのhCGが投与されます。

採卵：hCG注射後34～36時間、胚移植：採卵後48～72時間。 黄体期サポート: 妊娠検査の日まで毎日 100 mg のプロゲステロンを筋肉内注射します。

妊娠検査：胚移植から15日後。 精液の採取と準備。 精液サンプルは、通常 2 ～ 3 日間の禁欲後に、清潔な容器にマスターベーションによって収集されます。 各サンプルは 37 °C で少なくとも 20 分間液化させます。

精液分析:

精子数、濃度、運動性、形態などの基本的な精子パラメータは、世界保健機関のガイドラインに従って評価されます。 最初の評価の後、射精液は 3 つのアリコートに分割されます。 各サンプルのアリコートは精子の DNA 損傷を評価するために使用され、2 番目のアリコートは直接スイムアップ技術 (n 30) またはゼータ テスト技術 (n 30) によって処理され、その後、それぞれのサンプルで再度 DNA 損傷が評価されます。サンプルを採取して各技術で処理した後の DNA 損傷の違いを測定し、その後 3 番目のアリコートからの精子を精子染色と光学顕微鏡を使用して手動で形態学的分析し、WHO に従ってスコアリングします。

DNA断片化アッセイ:

DNA損傷の評価は、改良版の精子クロマチン分散検査を使用して、各サンプルの処理の前後に測定されます。 サンプルは分析用に準備されます。 準備されたスライドを評価するには、染色ステップが必要です。 サンプルは Diff-Quik 溶液で染色され、各スライドを Diff-Quik 溶液 I (好酸性) および Diff-Quik 溶液 II (好塩基性) にそれぞれ 6 分間浸し、室温で乾燥させます。その後、スライドを検査します。明視野顕微鏡下で。