中国四川省钩虫清除和维生素 A 干预对学龄前儿童铁状况的影响

受试者和伦理批准 本随机、对照和双盲队列研究于 2012 年 3 月至 2014 年 9 月在中国西部四川省成都郊区社会经济地位较低的大邑、郫县和眉山县进行。干预期间，从这三个国家的九所幼儿园随机招募约216名3-6岁贫血学龄前儿童进行研究。 参与资格标准如下：1) 外表健康； 2) Hb浓度<110 g/l但不<80 g/l； 3）C反应蛋白（CRP）<10mg/L； 4) 父母或监护人同意参与研究的所有方面；和 5) 父母/监护人同意在试验期间避免额外使用维生素和矿物质补充剂以及去钩虫剂。 Hb<80 g/l 和/或 CRP >10 mg/l 的患儿被送往医院接受特殊治疗。

我们对每个地区的幼儿园进行了一次普查，以确定哪些家庭包括符合条件的学龄前儿童。 然后现场卫生工作者进行了家庭调查以确定哪些儿童被包括在内。 一名现场工作人员访问了符合条件的家庭，该工作人员解释了协议、回答了问题并获得了父母/监护人的书面知情同意。 入组和研究计划经中国四川省重庆医科大学成都妇女儿童中心医院机构伦理委员会审查批准。 本研究符合世界医学协会的道德规范（赫尔辛基宣言）。

本研究的主要目的是测量干预前后血清 Hb 的变化。 需要每组约 60 名贫血学龄前儿童的样本量来检测三个干预组之间 10 g/L 的 Hb 浓度绝对差异在补充 95% 功效和 α= 0.05 后，对于双侧双样本 t-测试。 为了在研究期间允许 20% 的辍学率，我们最初计划每组招募约 72 名贫血儿童（共 216 名）。 我们估计当地学龄前儿童的贫血患病率约为 16%[17]，最终约有 1350 名儿童被招募到干预前的初始 Hb 筛查研究中，每组约 450 名。

干预 所有符合条件的贫血儿童随机分为三组：第一组不接受干预作为对照组；第 2 组接受 400 mg 单剂量阿苯达唑给药，第 3 组最初接受 200,000 IU 维生素 A 胶囊联合 400 mg 单剂量阿苯达唑一次。 出于伦理原因，对照组的所有儿童在研究结束时均给予单剂量阿苯达唑。 招募后，立即为一个班级的儿童分配一个研究编号，该编号先前已随机分配到干预组或对照组，由第三方准备的固定、平等分配给每个组。 Excel (Microsoft, Redmond, WA, USA) 的 RAND 函数用于生成计算机随机排列代码。 在整个研究期间，医生、护士、现场卫生工作者、父母、儿童和实验室人员对每个儿童的治疗分配不知情。 在数据分析结束之前，数据管理员、统计学家和所有调查人员都对分组不知情。 干预和评估的总持续时间为六个月。 维生素A胶囊和阿苯达唑片由四川明珠药业有限公司提供。

阿苯达唑片剂和维生素 A 胶囊的依从性 使用记录表监测阿苯达唑片剂和维生素 A 胶囊的依从性，教师在记录表中记录孩子是“全部”服用还是“不服用”阿苯达唑片剂和维生素 A 胶囊。 为避免同学们交换阿苯达唑片和维生素 A 胶囊，三组学生被转移到教室的相对角落进行物理隔离。 阿苯达唑片剂和维生素 A 胶囊的分发和消费是在严密监督下进行的；第二组和第三组的孩子在吃完阿苯达唑片和维生素A胶囊之前不允许离开教室或回到原来的座位。 药片的分发由托儿所管理人员执行，而不是医护人员和托儿所教师。 阿苯达唑片剂和维生素 A 胶囊的可接受性信息是在给药后通过一份简短的问卷调查获得的。

问卷调查 招募后，由训练有素的调查员进行了 30 分钟的问卷调查。 问卷内容包括人口统计信息（儿童的年龄、性别）、主要照顾者的教育水平（至少负责照顾儿童一半时间）、家庭月收入、试验前维生素/矿物质补充剂的使用情况和进食频率回忆（深色蔬菜和牛奶、肝脏和鸡蛋的频率）。

人体测量测量 人体测量检查由同一位训练有素的人体测量护士在基线和随访（6 个月）时间点使用标准化技术进行，以消除检查员内部错误。 对所有儿童进行重复测量。 每组每位考官体重和身高的考官间变异系数小于5%。 使用体重秤（100Med，北京，中国）记录体重，精确到 100 克，受试者穿着最少的衣服和赤脚。 类似地，通过身高尺（Haode，Guangzhou，China）在标准位置测量身高，精确到 0.1 cm。 通过使用世界卫生组织 (WHO; 2005) 的参考数据，计算了年龄别身高 (HAZ)、身高别体重 (WHZ) 和年龄别体重 (WAZ) 的 Z 分数。 根据 WHO (http://www.who.int/childgrowth/software/en/) 的建议，所有指数均使用个人计算机的 Anthro (2005) 计算得出。

血样采集和生化评估 在干预开始和干预后第 3 个月和第 6 个月，在医院早餐前通过静脉穿刺从每位受试者的肘前静脉采集 3 份血样（约 1 mL）。 将四分之一毫升吸入装有肝素的容器中，通过氰化血红蛋白法（Maker，成都，中国）测量 Hb。 批间变异小于5%，批内变异小于10%。 血液样本立即储存在 4°C 以防止微溶血，并在 5 小时内分离。 将剩余的血液在室温下以 3000g 离心 5 分钟。 将离心后的血清样品分成等份并立即运送到实验室并在-20°C下储存。 使用商业酶联免疫吸附测定（ELISA）（Sunbiote，上海，中国）测量血清铁蛋白（SF）的浓度。 通过微粒增强免疫测定法（Sunbiote，上海，中国）测量血清可溶性转铁蛋白受体（sTfR）。 通过粒子增强免疫比浊法（Sunbiote，上海，中国）测量 CRP。 使用高效液相色谱法测定血清视黄醇浓度。 血清视黄醇由重庆医科大学儿科实验室经验丰富的检测人员检测，其他生化指标在成都妇女儿童中心医院检验科中心检测。