Effetto dell'eliminazione dell'anchilostoma e dell'intervento di vitamina A sullo stato del ferro dei bambini in età prescolare nel Sichuan, in Cina

Soggetti e approvazione etica Questo studio di coorte randomizzato, di controllo e in doppio cieco è stato condotto nei paesi di Dayi, Pixian e Meishan, provincia di Sichuan, Cina occidentale, che sono sobborghi della città di Chengdu con uno stato socioeconomico basso, da marzo 2012 a settembre 2014 e circa 216 bambini anemici in età prescolare di età compresa tra 3 e 6 anni sono stati reclutati casualmente da nove asili dei tre paesi per lo studio durante il periodo di intervento. I criteri di ammissibilità per la partecipazione erano i seguenti: 1) salute apparente; 2) concentrazione di Hb <110 g/l ma non <80 g/l; 3) Proteina di reazione C (PCR) <10 mg/L; 4) approvazione dei genitori o del tutore della partecipazione a tutti gli aspetti dello studio; e 5) accordo dei genitori/tutori per evitare l'uso aggiuntivo di integratori vitaminici e minerali e la somministrazione di anchilostomi durante lo studio. I bambini con Hb<80 g/l e/o CRP >10 mg/l sono stati inviati in ospedale con trattamento speciale.

Abbiamo condotto un censimento in ogni scuola materna regionale per determinare quali famiglie includevano bambini idonei in età prescolare. Quindi gli operatori sanitari sul campo hanno condotto un'indagine familiare per determinare quali bambini fossero inclusi. Le famiglie idonee sono state visitate da un operatore sul campo che ha spiegato il protocollo, risposto alle domande e ottenuto il consenso informato scritto dai genitori/tutori. L'arruolamento e il piano di ricerca sono stati esaminati e approvati dal comitato etico istituzionale del Chengdu Women's and Children's Central Hospital dell'Università medica di Chongqing nella provincia di Sichuan, in Cina. Il presente studio è conforme al codice etico della World Medical Association (Dichiarazione di Helsinki).

L'obiettivo primario del presente studio era misurare la variazione dell'Hb sierica prima e dopo l'intervento. È stata richiesta una dimensione del campione di circa 60 bambini in età prescolare anemici per gruppo per rilevare una differenza assoluta di 10 g/L di concentrazione di Hb tra tre gruppi di intervento dopo l'integrazione con una potenza del 95% e α= 0,05 per un t-campione a due code a due code. test. Per consentire un tasso di abbandono del 20% per tutta la durata dello studio, inizialmente avevamo pianificato di reclutare circa 72 bambini anemici per gruppo (in totale 216). Abbiamo stimato che la prevalenza dell'anemia dei bambini in età prescolare nella località fosse di circa il 16%[17], alla fine circa 1350 bambini sono stati reclutati in uno studio iniziale di screening dell'Hb prima dell'intervento e circa 450 per ciascun gruppo.

Intervento Tutti i bambini anemici ammissibili sono stati divisi casualmente in tre gruppi: il gruppo 1 non ha ricevuto alcun intervento come gruppo di controllo; Il gruppo 2 ha ricevuto 400 mg di somministrazione di albendazolo in dose singola e il gruppo 3 ha ricevuto una capsula di vitamina A da 200.000 UI combinata con 400 mg di albendazolo in dose singola una volta inizialmente. Per motivi etici, a tutti i bambini del gruppo di controllo è stata somministrata una singola dose di albendazolo alla fine dello studio. Immediatamente dopo il reclutamento, ai bambini di una classe è stato assegnato un numero di studio che era stato precedentemente assegnato in modo casuale al gruppo di intervento o di controllo con allocazione fissa e uguale a ciascun gruppo preparato da una terza parte. La funzione RAND di Excel (Microsoft, Redmond, WA, USA) è stata utilizzata per generare codici permutati casualmente dal computer. I medici, gli infermieri, gli operatori sanitari sul campo, i genitori, i bambini e il personale di laboratorio erano all'oscuro dell'assegnazione del trattamento a ciascun bambino per tutto il periodo di studio. Il responsabile dei dati, lo statistico e tutti i ricercatori sono rimasti ciechi rispetto agli incarichi di gruppo fino alla fine dell'analisi dei dati. La durata totale dell'intervento e della valutazione è stata di sei mesi. La capsula di vitamina A e la compressa di albendazolo sono state fornite da Sichuan Pearl Pharmaceutical Co., Ltd.

Conformità La conformità della compressa di albendazolo e della capsula di vitamina A è stata monitorata utilizzando tabelle di registrazione, in cui gli insegnanti registravano se il bambino consumava "tutta" o "nessuna" della compressa di albendazolo e della capsula di vitamina A. Per evitare lo scambio di compresse di albendazolo e capsule di vitamina A da parte dei compagni di classe, i tre gruppi sono stati separati fisicamente spostandoli in angoli opposti della classe. La distribuzione e il consumo della compressa di albendazolo e della capsula di vitamina A sono avvenuti sotto stretta supervisione; i bambini del gruppo 2 e del gruppo 3 non potevano lasciare l'aula o tornare ai loro posti originali prima di aver finito di mangiare la loro compressa di albendazolo e la capsula di vitamina A. La distribuzione dei tablet è stata effettuata dai gestori dei nidi, ma non dagli operatori sanitari e dalle maestre dei nidi. Le informazioni sull'accettabilità della compressa di albendazolo e della capsula di vitamina A sono state ottenute mediante un breve questionario dopo la somministrazione.

Colloquio del questionario Un questionario di 30 minuti è stato condotto da un intervistatore qualificato dopo il reclutamento. Il questionario includeva domande su informazioni demografiche (età dei bambini, sesso), livelli di istruzione dei principali caregiver (che erano responsabili almeno della metà del tempo di cura dei bambini), reddito familiare mensile, uso di integratori vitaminici/minerali prima del processo e frequenza alimentare richiamo (la frequenza di verdure dal colore intenso e latte, fegato e uova).

Misurazioni antropometriche Gli esami antropometrici sono stati condotti dalla stessa infermiera antropometrica addestrata al basale e ai punti temporali di follow-up (6 mesi) utilizzando tecniche standardizzate per eliminare l'errore intra-esaminatore. Sono state eseguite misurazioni duplicate per tutti i bambini. Il coefficiente inter-esaminatore di variazione di peso e altezza per ciascun esaminatore in ciascun gruppo era inferiore al 5%. Il peso è stato registrato utilizzando una bilancia (100Med, Pechino, Cina) con l'approssimazione di 100 g con soggetti in abiti minimi e piedi nudi. Allo stesso modo, l'altezza è stata misurata nella posizione standard da una scala di altezza (Haode, Guangzhou, Cina) con l'approssimazione di 0,1 cm. Utilizzando i dati di riferimento dell'Organizzazione mondiale della sanità (OMS; 2005), i punteggi Z sono stati calcolati per altezza per età (HAZ), peso per altezza (WHZ) e peso per età (WAZ). Tutti gli indici sono stati calcolati utilizzando Anthro (2005) per il personal computer, come raccomandato dall'OMS (http://www.who.int/childgrowth/software/en/).

Prelievo di campioni di sangue e valutazione biochimica All'inizio ea 3 e 6 mesi dopo l'intervento, sono stati prelevati tre campioni di sangue (circa 1 mL) mediante prelievo venoso di una vena antecubitale da ciascun soggetto prima della colazione in ospedale. Un quarto di millilitro è stato aspirato in un contenitore contenente eparina per misurare l'Hb con il metodo dell'emoglobina cianuro (Maker, Chengdu, Cina). La variazione inter-saggio era inferiore al 5% e la variazione intra-saggio era inferiore al 10%. I campioni di sangue sono stati immediatamente conservati a 4°C per prevenire la microemolisi e sono stati separati entro 5 ore. Il sangue rimanente è stato centrifugato a 3000 g per 5 minuti a temperatura ambiente. I campioni di siero centrifugati sono stati divisi in aliquote e immediatamente trasportati in laboratorio e conservati a -20°C. Le concentrazioni di ferritina sierica (SF) sono state misurate utilizzando un test di immunoassorbimento enzimatico commerciale (ELISA) (Sunbiote, Shanghai, Cina). Il recettore della transferrina solubile nel siero (sTfR) è stato misurato mediante saggio immunologico potenziato con microparticelle (Sunbiote, Shanghai, Cina). La CRP è stata misurata mediante immunoturbidimetria potenziata da particelle (Sunbiote, Shanghai, Cina). La concentrazione di retinolo sierico è stata determinata mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni. Il retinolo sierico è stato misurato da esaminatori esperti nel laboratorio pediatrico dell'Università medica di Chongqing e gli altri indici biochimici nel centro di laboratorio clinico dell'ospedale centrale femminile e pediatrico di Chengdu.