低强度激光治疗对子宫内膜细胞的影响：一项体外研究 (LLLT)

工作计划：

将从国家研究中心不孕门诊就诊的 40 名不孕妇女采集 40 份人体子宫内膜样本（每个样本将分为 3 个培养板；单次暴露组、多次暴露组和对照组），并将纳入研究。

每个人子宫内膜样本将分为 3 个板，以建立 3 个主要组，每个组 40 个培养板用于单激光照射组，40 个培养板用于多次激光照射组，40 个组织培养板用于对照样品，因此总共 120将研究组织培养板，研究组将接受低水平激光治疗，并与匹配的对照组进行比较。

子宫内膜组织样本的时间：

子宫内膜组织活检将在月经停止后的早期增殖期（从第5天到第8天）进行。

同意书 将在手术前获得每位女性的书面知情同意书。 同意书将解释程序的目的、研究的目的和可能的副作用。

子宫内膜细胞培养：

将从研究中包括的女性中收集子宫内膜活检条。 子宫内膜活检条将使用吸管从子宫壁取出。

子宫内膜组织将在隔离介质中运送到实验室。 子宫内膜组织将储存在 4°C，并在 2-10 小时内处理。

当细胞簇在肉眼可见且包含超过 50 个细胞时，它们将被视为集落。

相同的培养条件将应用于研究和对照样品。 组织培养物将在研究完成 14 天后丢弃。

低强度激光治疗将使用波长 635nm 的二极管激光，将在 9.62cm2 的培养皿 S.A. 中对培养的子宫内膜细胞进行 40mw 的功率测试，连续模式下的注量率为 4.2 J/cm2，635nm 的穿透深度范围为 1 至6 毫米。

研究组的组织培养将分为2组；第 1 组将由 40 个组织培养板组成，将在单次持续 16 分钟的疗程中暴露于 4.2 J/cm2 的总注量剂量，并使用功率调整为 40mw 的低水平治疗机。 第二组将由另外 40 个组织培养板组成，它们将暴露在相同的注量率下，但在多个会话“3 个会话”中，每隔一天进行一次，每个会话将持续约 5.34 分钟，使用40mw功率的低能级激光在第3期结束后达到4.2J/cm2的相同注量剂量。

将在子宫内膜培养板中测试 LLLT 的单次暴露与多次暴露，并将与未暴露于激光的对照组进行比较。 单次暴露和多次暴露之间的比较很重要，以确定体内薄子宫内膜多次暴露的风险优势，这是一种侵入性手术，需要在子宫内插入光纤探头，这可能会导致一些给患者带来不适，并且可能会受到患者依从性的影响。

RT-PCR分析技术及步骤：

实时 PCR 将用于筛选和检测子宫内膜植入标志物的存在，即整合素 aVB3“α v B3”、MUC-1、LIF 的表达以及作为癌前子宫内膜疾病的早期标志物的 PTEN 肿瘤抑制基因的表达.

电子显微镜;将通过电子显微镜检查组织培养中的细胞，以检测胞饮足的存在作为子宫内膜容受性增加的标志。