子宮内膜細胞に対する低レベルレーザー治療の効果: in vitro 研究 (LLLT)

作業計画:

国立研究センターの不妊クリニックに通う 40 人の不妊女性から 40 個のヒト子宮内膜サンプルが収集され（各サンプルは 3 つの培養プレート、単回曝露グループ、複数曝露グループ、対照グループ）、研究。

各ヒト子宮内膜サンプルは 3 つのプレートに分割され、単一レーザー照射グループの培養プレート 40 枚、複数レーザー照射グループの培養プレート 40 枚、対照サンプルの組織培養プレート 40 枚の 3 つの主要グループを確立するため、合計 120 枚になります。組織培養プレートが研究され、研究グループは低レベルのレーザー治療を受け、対応する対照と比較されます。

子宮内膜組織サンプルの採取のタイミング:

子宮内膜組織生検は、月経終了直後の初期増殖期（5日目から8日目）に実施されます。

同意 処置の前に、各女性から書面によるインフォームドコンセントが得られます。 同意には、手順の目的、研究の目的、および起こり得る副作用について説明されます。

子宮内膜細胞培養:

子宮内膜生検ストリップは、研究に含まれる女性から収集されます。 子宮内膜生検ストリップは、ピペラを使用して子宮壁から採取されます。

子宮内膜組織は隔離媒体に入れて研究室に輸送されます。 子宮内膜組織は 4°C で保存され、2 ～ 10 時間以内に処理されます。

細胞のクラスターが肉眼で見えるようになり、50 個を超える細胞が含まれる場合、コロニーとみなされます。

同じ培養条件が研究サンプルと対照サンプルの両方に適用されます。 組織培養は研究が完了する 14 日後に廃棄されます。

低レベルレーザー治療は波長 635nm ダイオードレーザーで、出力 40mw を 9.62cm2 のペトリ皿で培養子宮内膜細胞に対して連続モードでフルエンス率 4.2J/cm2 でテストします。635nm での浸透深さの範囲は 1 ～ 6mm。

研究グループの組織培養は 2 つのグループに分けられます。第 1 グループは 40 枚の組織培養プレートで構成され、出力 40mw に調整された低レベル治療機を使用して、16 分間の 1 回のセッションで総フルエンス線量 4.2 J/cm2 に曝露されます。 2 番目のグループはさらに 40 枚の組織培養プレートで構成され、同じフルエンス率で曝露されますが、複数のセッション「3 セッション」で隔日で実行され、各セッションは約 5.34 分間続きます。 3 回目のセッション終了後に同じフルエンス線量 4.2 J/cm2 に達する出力 40mw の低レベルレーザー。

LLLT の 1 回照射と複数回照射を子宮内膜培養プレートでテストし、レーザーに照射しなかった対照群と比較します。 生体内での薄い子宮内膜における複数回の曝露セッションのリスクに対する利点を判断するには、1回のセッションでの曝露と複数回のセッションでの曝露の比較が重要です。これは侵襲的処置であり、子宮内に光ファイバープローブを挿入する必要があり、子宮内に光ファイバープローブを挿入する必要があり、患者に不快感を与え、患者のコンプライアンスに影響を受ける可能性があります。

RT-PCR 分析手法と手順:

リアルタイム PCR は、子宮内膜着床マーカー、つまりインテグリン aVB3「α v B3」、MUC-1、LIF の発現、および前癌性子宮内膜疾患の早期マーカーとしての PTEN 腫瘍抑制遺伝子の発現のスクリーニングと検出に使用されます。 。

電子顕微鏡法;子宮内膜受容性の増加のマーカーとしてピノポデの存在を検出するために、組織培養中の細胞を電子顕微鏡で検査します。