자궁내막 세포에 대한 저수준 레이저 요법의 효과: 체외 연구 (LLLT)

작업 계획:

국립중앙연구원 난임클리닉에 재학 중인 불임 여성 40명으로부터 인체 자궁내막 시료 40개를 채취(각 시료는 3개의 배양판(단일노출군, 다중노출군, 대조군)으로 나눕니다.) 연구.

각 인간 자궁내막 샘플은 단일 레이저 노출 그룹에 대한 40개의 배양 플레이트 대 다중 레이저 노출 그룹에 대한 40개의 배양 플레이트 및 대조군 샘플에 대한 40개의 조직 배양 플레이트의 3개의 주요 그룹을 설정하기 위해 3개의 플레이트로 분할되어 총 120개 조직 배양 플레이트를 연구하고, 연구 그룹을 낮은 수준의 레이저 요법에 노출시키고 일치하는 대조군과 비교합니다.

자궁내막 조직 샘플의 시기:

자궁내막 조직 생검은 월경이 끝난 직후(5일에서 8일) 초기 증식 단계에서 수행됩니다.

동의 절차 전에 각 여성으로부터 사전 서면 동의를 얻습니다. 동의서는 절차의 목적, 연구의 목적 및 가능한 부작용을 설명합니다.

자궁내막 세포 배양:

연구에 포함된 여성으로부터 자궁내막 생검 스트립을 수집할 것입니다. 자궁내막 생검 스트립은 피펠을 사용하여 자궁벽에서 채취합니다.

자궁내막 조직은 격리 배지로 실험실로 운반됩니다. 자궁내막 조직은 4°C에서 보관되며 2-10시간 이내에 처리됩니다.

세포 클러스터는 육안으로 볼 수 있고 50개 이상의 세포를 포함할 때 콜로니로 간주됩니다.

동일한 배양 조건이 연구 및 대조 샘플 모두에 적용될 것입니다. 조직 배양은 연구가 완료되는 14일 후에 폐기됩니다.

낮은 수준의 레이저 요법은 파장 635nm 다이오드 레이저가 될 것이며, 연속 모드에서 4.2 J/cm2의 플루언스 속도로 9.62cm2의 페트리 접시 S.A.에서 배양된 자궁내막 세포에 대해 40mw의 전력을 테스트할 것이며, 635nm에서의 침투 깊이는 1에서 1까지의 범위입니다. 6mm.

연구 그룹의 조직 배양은 두 그룹으로 나뉩니다. 첫 번째 그룹은 40개의 조직 배양 플레이트로 구성되며 40mw의 전력으로 조정된 저수준 치료 기계로 16분 동안 단일 세션에서 총 플루언스 선량 4.2 J/cm2에 노출됩니다. 두 번째 그룹은 또 다른 40개의 조직 배양 플레이트로 구성되며 동일한 플루언스 속도에 노출되지만 격일로 수행되는 여러 세션 ''3 세션''에서 각 세션은 다음을 사용하여 약 5.34분 동안 지속됩니다. 40mw의 낮은 수준의 레이저는 세 번째 세션을 마친 후 4.2 J/cm2의 동일한 플루언스 선량에 도달합니다.

LLLT의 단일 노출 대 다중 노출은 자궁내막 배양 플레이트에서 테스트되고 레이저에 노출되지 않은 대조군과 비교됩니다. 단일 세션 노출과 다중 세션 노출 간의 비교는 생체 내 얇은 자궁내막에서 다중 노출 세션의 위험에 대한 이점을 결정하기 위해 중요합니다. 환자에게 불편함을 줄 수 있으며 환자의 순응도에 영향을 받을 수 있습니다.

RT-PCR 분석 기술 및 단계:

실시간 PCR은 자궁내막 이식 마커의 존재, 즉 인테그린 aVB3 "알파 v B3", MUC-1, LIF의 발현 및 전암성 자궁내막 질환에 대한 초기 마커로서 PTEN 종양 억제 유전자의 발현을 스크리닝하고 검출하는 데 사용될 것입니다. .

전자현미경; 증가된 자궁내막 수용성의 마커로서 피노포드의 존재를 검출하기 위해 조직 배양 세포를 전자현미경으로 검사할 것이다.