儿童急性重病的生物标志物 (BASIC)

这是一项涉及收集临床数据和生物样本的前瞻性队列研究。 不会对患者进行任何干预。

样本采集 血液和尿液样本将在两个时间点采集。 如果可能，还将收集粪便和咽拭子。

时间点 1：在 CATS 团队稳定期间（首次与重症监护团队联系）核糖核酸 (2 毫升);血清（2 毫升）；血浆（2 毫升）和尿液（10 毫升）。

时间点 2：PICU 入院后 24-48 小时内核糖核酸 (2 毫升);血清（2 毫升）；血浆（2 毫升）和尿液（10 毫升）。 此外，PICU 还将收集粪便和咽拭子样本。

对于体重低于 10 公斤的婴儿，我们将根据 2008 年 7 月 25 日的 MCRN 临床试验指南，将每个时间点收集的总血容量限制为 0.8 毫升/公斤体重。

此外，将在 PICU 入院时（第 1 天）和 PICU 入院后 24-48 小时收集粪便样本。 如果没有粪便，将采集肛拭子进行微生物分析。 将在第一个可用的粪便样本上测量 SCFA。

样本运输、处理和储存 样本将由 CATS 团队在冷藏箱 (4°C) 中运送至入院 PICU。 样本处理和储存将在患者入院的医院进行。 处理将包括通过生成一个唯一的研究编号对样本进行匿名化处理，该编号将用于此后对样本的所有参考。

临床数据收集 将制作标准化的病例报告表和包含定义和规则的数据收集手册。 数据将由每个单位的研究人员收集。 临床数据将涵盖患者路径的关键阶段——重症监护转诊和转运、PICU 病程和结果。 我们将对患者进行详细的临床表型分析，包括 PICU 转诊/入院的原因（感染、外伤、神经、心脏、呼吸等）、疾病严重程度（PIM-2 评分）、器官衰竭严重程度（PELOD）和结果从 PICU 出院时（死亡、严重残疾）。 认识到 PICU 出院时的短期结果可能不是对父母/照顾者最有意义的结果，或提供儿童长期结果的准确描述，我们还将征得父母/照顾者同意在 PICU 后 1 年联系入院时要完成简短的问卷调查，以评估孩子的功能状态和生活质量。 调查问卷将通过电话、电子邮件或基于网络的方式进行管理，具体取决于家长的偏好。

在可能的情况下，为了避免重复工作，来自 CATS 检索和 PICU 入院的临床数据将通过儿科重症监护国家临床审计（PICANet，利兹和莱斯特大学）的电子链接获得。 在研究期结束时，将使用 CATS 检索编号进行数据链接。 这些数据的收集将遵循标准程序——任何数据传输（数据请求和完整数据集的返回）都将安全地执行（完全加密）。

数据分析 最初，将分别分析每种类型的信息，即遗传、转录组、蛋白质组、表观遗传、临床信息，以在第一阶段识别关联和相关性。 差异行为和关联模式将通过各种统计和生物信息学分析得出，包括单变量和多变量，如上所述。 在第二阶段，信息将跨数据类型组合成预测模型。 将采用系统生物学方法，在这种方法中，将在病例组和对照组中构建共同调节的遗传、转录组学、蛋白质组学和表观遗传模块网络。 病例和对照之间不同的网络连接将被识别为结果的“预测因子”。

图形建模将用于可视化那些复杂的网络。 需要大量的统计分析来确定最有影响力的连接，这些连接一旦被删除，就会对网络拓扑产生最大的影响。 模型将在不同的疾病队列中进行改进、重新评估、验证和复制，直到实现最佳的样本外分类。 数学和统计小组的专业知识将提供将 DNA 到表型的多层生物信息链接到网络系统生物学方法中的能力。

样本量 不可能进行正式的样本量计算，但我们会在每个感兴趣的组中招募最少数量的患者。 我们的目标是招募足够数量的因重症监护入院的不同原因的患者参与研究（每组 50-80 名患者）。

研究持续时间 患者招募将在 24 个月内进行，员工培训提前 6 个月，患者随访和数据库完成提前 6 个月。

患者招募 符合条件的患者将在运送过程中由来自 CATS 重症监护运输队的医疗和护理人员招募到研究中。

同意程序 一旦孩子的病情稳定，我们将寻求父母/监护人的延迟书面知情同意，通常是在 PICU 入院后 24-48 小时内。 患者信息传单将支持同意过程。 这种方法在急诊研究中有几个先例，包括儿科重症监护。 最新的欧盟临床试验条例 (2013) 也支持在危及生命的紧急情况下延迟同意。

在本研究中寻求延迟同意的主要原因是：

1. 临床：儿童的紧急重症监护转运是一种紧急情况，不能延误挽救生命的治疗，需要迅速将其转运至 PICU。 此外，父母/监护人在稳定情况下可能不在场以讨论是否同意。
2. 实用：由于救护车空间有限，纯粹为了研究同意而增加一名工作人员进行运输是不可行的。 CATS 服务的 24/7 性质以及同时发生多个传输的事实也使得拥有专门的研究人员不切实际。
3. 方法论：难以获得完全知情同意可能导致引入选择偏差。 此外，如果研究样本不是在危重疾病的早期阶段采集的，那么在开始治疗（例如补液或正性肌力药）之前，就可能无法获得可靠的危重疾病生物标志物。 虽然方法论问题不能为在研究对象明确拒绝同意时包括数据提供论据，但它确实为包括在获得同意之前收集的样本或数据提供了道德上有效的理由，并且在不存在这种明确拒绝同意的情况下。
4. 伦理：由于在紧急情况下难以获得知情同意，病情最严重的患者往往会接受轶事医疗实践。 基于对危重疾病最有力的科学理解，拒绝患病儿童受益于新研究和治疗策略的好处可能是不道德的，而这正是我们的研究旨在推进的目标。

如果父母/监护人不愿同意或无法同意，或者工作人员无法与父母/监护人取得联系，样本将被丢弃，不会收集任何临床数据。