Biomarcadores de doenças graves agudas em crianças (BASIC)

Este é um estudo de coorte prospectivo envolvendo a coleta de dados clínicos e amostras biológicas. Nenhuma intervenção será realizada nos pacientes.

Coleta de amostras Amostras de sangue e urina serão coletadas em dois momentos. Swabs de fezes e garganta também serão coletados, se possível.

Momento 1: Durante a estabilização pela equipe CATS (primeiro contato com uma equipe de terapia intensiva) A equipe CATS coletará amostras durante a amostragem de rotina, priorizadas na seguinte ordem: DNA (2 ml); ARN (2 ml); Soro (2 ml); Plasma (2 ml) e Urina (10 ml).

Ponto de tempo 2: Dentro de 24-48 horas após a admissão na UTIP A equipe de pesquisa na UTIP participante coletará amostras durante a amostragem de rotina, priorizadas na seguinte ordem: DNA (2 ml); ARN (2 ml); Soro (2 ml); Plasma (2 ml) e Urina (10 ml). Além disso, amostras de fezes e swab da garganta serão coletadas na UTIP.

Em bebês com menos de 10 kg de peso, restringiremos o volume total de sangue coletado em cada ponto de tempo para 0,8 ml/kg de peso corporal, de acordo com as Diretrizes de Ensaios Clínicos do MCRN, 25 de julho de 2008.

Além disso, amostras fecais serão coletadas na admissão na UTIP (dia 1) e 24-48 horas após a admissão na UTIP. Se as fezes não estiverem disponíveis, um swab anal será coletado para análise microbiológica. SCFA será medido na primeira amostra fecal disponível.

Transporte, processamento e armazenamento das amostras As amostras serão transportadas pela equipe do CATS para as UTIPs de admissão em caixas térmicas (4°C). O processamento e o armazenamento das amostras ocorrerão no hospital onde o paciente estiver internado. O processamento incluirá a anonimização da amostra, gerando um número de estudo exclusivo, que será usado para todas as referências às amostras subsequentes.

Coleta de dados clínicos Será elaborado um formulário de relato de caso padronizado e um manual de coleta de dados com definições e regras. Os dados serão coletados pela equipe de pesquisa em cada unidade. Os dados clínicos abrangerão os principais estágios do percurso do paciente - encaminhamento e transporte para cuidados intensivos, curso e resultado da UTIP. Faremos fenotipagem clínica detalhada do paciente, incluindo motivo do encaminhamento/admissão na UTIP (infecção, trauma, neurológico, cardíaco, respiratório e outros), gravidade da doença (escore PIM-2), gravidade da falência de órgãos (PELOD) e desfecho na alta da UTIP (óbito, incapacidade grave). Reconhecendo que o resultado de curto prazo na alta da UTIP pode não ser o resultado mais significativo para os pais/responsáveis, ou fornecer uma imagem precisa do resultado de longo prazo em crianças, também buscaremos o consentimento dos pais/responsáveis ​​para ser contatado 1 ano após a UTIP admissão para preencher questionários curtos para avaliar o estado funcional e a qualidade de vida da criança. Os questionários serão administrados por telefone, e-mail ou meios baseados na web, dependendo da preferência dos pais.

Sempre que possível, a fim de evitar a duplicação de esforços, os dados clínicos da recuperação do CATS e da admissão na UTIP serão obtidos por ligação eletrônica da auditoria clínica nacional de cuidados intensivos pediátricos (PICANet, Universidade de Leeds e Leicester). A ligação de dados será realizada usando o número de recuperação do CATS, ao final do período do estudo. A coleta desses dados seguirá um procedimento padrão - qualquer transferência de dados (solicitações de dados e devolução do conjunto de dados completo) será realizada com segurança (com criptografia total).

Análise de dados Inicialmente, cada tipo de informação, ou seja, genética, transcriptômica, proteômica, epigenética, clínica, será analisada separadamente para identificar associações e correlações em uma primeira etapa. Comportamento diferencial e padrões de associação serão obtidos por várias análises estatísticas e bioinformáticas, univariadas e multivariadas, conforme descrito acima. Em um segundo estágio, as informações serão combinadas entre os tipos de dados em modelos preditivos. Uma abordagem de biologia de sistemas será empregada na qual redes de módulos genéticos, transcriptômicos, proteômicos e epigenéticos co-regulados serão construídos em coortes de casos e controles. Conexões de rede que serão diferentes entre casos e controles serão identificadas como "preditores" do resultado.

A modelagem gráfica será usada para visualizar essas redes complexas. Análise estatística pesada será necessária para identificar as conexões mais influentes que, uma vez removidas, teriam o maior impacto na topologia da rede. Os modelos serão refinados, reavaliados, validados e replicados nas diferentes coortes de doenças até que a melhor classificação possível fora da amostra seja alcançada. A experiência do grupo matemático e estatístico fornecerá a capacidade de vincular as múltiplas camadas de informações biológicas do DNA ao fenótipo em uma abordagem de biologia de sistemas de rede.

Tamanho da amostra Nenhum cálculo formal do tamanho da amostra é possível, mas recrutaremos um número mínimo de pacientes em cada grupo de interesse. Nosso objetivo é recrutar para o estudo um número adequado de pacientes com diferentes motivos de internação em terapia intensiva (50-80 pacientes por grupo de interesse).

Duração do estudo O recrutamento de pacientes ocorrerá durante um período de 24 meses, com 6 meses de treinamento de pessoal e 6 meses de acompanhamento de pacientes e preenchimento de bancos de dados.

Recrutamento de pacientes Os pacientes elegíveis serão recrutados para o estudo durante o transporte pela equipe médica e de enfermagem da equipe de transporte de terapia intensiva do CATS.

Procedimento de consentimento Buscaremos o consentimento informado por escrito dos pais/responsáveis ​​assim que a condição de seu filho se estabilizar, geralmente dentro de 24 a 48 horas após a admissão na UTIP. O processo de consentimento será apoiado por Folhetos de Informação do Paciente. Existem vários precedentes para essa abordagem em pesquisa de emergência, inclusive em terapia intensiva pediátrica. O suporte para consentimento diferido em situações urgentes de risco de vida também é fornecido por meio do mais recente Regulamento da UE sobre Ensaios Clínicos (2013).

As principais razões para buscar o consentimento diferido neste estudo são:

1. Clínico: O transporte de emergência para cuidados intensivos de crianças representa uma situação urgente em que o tratamento que salva vidas não pode ser adiado e o transporte para uma UTIP precisa ser realizado rapidamente. Além disso, os pais/responsáveis ​​podem não estar presentes no momento da estabilização para discutir o consentimento.
2. Prático: Levar um membro adicional da equipe para o transporte apenas para consentimento da pesquisa não é viável devido ao espaço limitado na ambulância. A natureza 24 horas por dia, 7 dias por semana do serviço CATS e o fato de vários transportes ocorrerem simultaneamente também torna impraticável ter uma equipe de pesquisa dedicada.
3. Metodológico: Dificuldades em obter consentimento informado completo podem resultar na introdução de viés de seleção. Além disso, se as amostras do estudo não forem coletadas em um estágio inicial da doença crítica, antes do início dos tratamentos (como fluidos ou inotrópicos), a derivação de biomarcadores robustos da doença crítica pode ser falha. Embora as questões metodológicas não possam fornecer um argumento para a inclusão de dados quando os sujeitos da pesquisa negam expressamente o consentimento, é um caso eticamente válido para incluir amostras ou dados coletados antes do consentimento ter sido obtido e onde tal negação explícita de consentimento não existe.
4. Ética: Devido às dificuldades de obtenção do consentimento informado em situação de emergência, os pacientes mais doentes são frequentemente submetidos à prática médica anedótica. Pode ser antiético negar às crianças doentes os benefícios de novas pesquisas e estratégias terapêuticas baseadas na compreensão científica mais robusta da doença crítica, que é o que nosso estudo pretende promover.

Se os pais/responsáveis ​​não quiserem consentir ou não puderem consentir, ou a equipe não conseguir entrar em contato com os pais/responsáveis, as amostras serão descartadas e nenhum dado clínico será coletado.