唾液脂肪因子与糖尿病前期和2型糖尿病的关联研究

这项研究是在金奈的 A.Ramachandran 博士糖尿病医院的三级医院进行的。 没有糖尿病病史、寻求糖尿病筛查的人将被邀请参加研究，在签署知情同意书后，他们将通过风险评分进行评估。 符合纳入标准的患者将被纳入本研究，并将进行额外的测试。 我们还将邀请愿意参与本研究的患者的配偶、亲属或朋友。

初步筛选：该团队由一名研究助理（牙医）、一名研究助理、两名实验室技术员和一名实验室助理组成。 在整个筛选过程中，测量结果将由相同的团队成员进行评估，以消除潜在的观察者间差异。 访问诊所的年龄≥35 岁的参与者将被邀请进行初步筛选。 参与者穿着轻便的衣服，不穿鞋，测量体重和身高。 计算 BMI (kg/m2)。 腰围是在肋骨下缘和髂嵴之间的中间位置测量的。 休息 5 分钟后使用标准水银血压计测量血压。 两个读数的平均值用于分析。 将确定以前的高血压、临界糖尿病和妊娠糖尿病病史。 糖尿病、心脏病、中风和久坐不动的生活方式的家族史记录在结构化的问卷中。 如果参与者有 2 个或更多风险因素，他们将在 75 克口服葡萄糖后测试空腹和 2 小时血糖（Accu check performa，Roche Diagnostics）。

第二天将根据纳入和排除标准将参与者分类为血糖正常、糖尿病前期 (IFG/IGT) 和新诊断的 2 型糖尿病患者。 选定的参与者将接受牙科检查以检查牙周炎。 然后从所有个体获得唾液和空腹血清样本用于估计生物标志物（脂联素、apelin、visfatin 和 vaspin）。 在空腹血清中分析 HbA1c、脂质谱和γ-谷氨酰转移酶 (GGT)。

在血清管中收集大约 10 毫升血液。 血样分离在中央研究实验室进行。 血液样本被分离、等分、冷藏并立即储存在 -70˚C 下用于生物标志物分析。 HbA1c 通过免疫比浊法测量（tina-quant II；罗氏诊断公司，德国）；由国家糖化血红蛋白标准化计划认证的程序。 空腹血脂谱（总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白、胆固醇）和 GGT 是使用标准酶促方法估算的。 生化测定在 Cobas Integra 450 plus（Roche，Germany）自动分析仪上使用来自 Roche diagnostics 的试剂和适当的质量控制方法（Roche diagnostics 参考血清）进行。

未刺激的唾液样本将收集在样本收集管中。 参与者将被要求在收集唾液前约两小时内不要进食或饮水；它在早上 8 点到 10 点左右完成。 将要求受试者用饮用水漱口，然后在收集管中吐出全部唾液。 然后将唾液在 40°C 下以 9300g 离心约 10 分钟，然后在-70°C 下储存，直到进一步使用。

唾液和血浆将在室温下解冻，用于通过酶联免疫吸附测定 (ELISA) 测量生物标志物。 使用用于血清和唾液的人类生物标志物的商业 ELISA 试剂盒，并根据制造商的说明进行测定。 来自同一患者的每个唾液和血浆样本将在同一实验组中进行分析。 血浆样品需要稀释。 唾液样本将在不稀释的情况下进行分析。

报告将通过快递从中心实验室发送给参与者。 新诊断出糖尿病或未控制糖尿病的参与者将被转介给糖尿病专家进行治疗，并进行为期两年的随访。 建议糖尿病前期患者改善身体活动和饮食习惯，并随访两年。 患有牙周炎的参与者将被转介给牙科医生并随访两年。

在访问 4 和 6 期间，将测量参与者的体重、腰围、BMI、血压和实验室调查，如空腹和餐后 2 小时血糖、HbA1c 和血脂概况。 在访问 6 时，参与者的唾液和血清样本被收集用于脂肪因子测量。