Undersøgelse af sammenslutningen af ​​spytadipokiner med prædiabetes og type 2-diabetes mellitus

Denne undersøgelse er udført på et tertiært hospital, Dr.A.Ramachandran's Diabetes Hospitals, Chennai. Personer uden diabetes, som søger en screening for diabetes, vil blive inviteret til at deltage i undersøgelsen, og efter at have underskrevet den informerede samtykkeformular vil de blive vurderet ud fra risikoscore. De patienter, der opfylder inklusionskriterierne, vil blive tilmeldt denne undersøgelse, og yderligere tests vil blive udført. Vi vil også invitere patientens ægtefælle, pårørende eller venner, som er villige til at deltage i denne undersøgelse.

Foreløbig screening: Holdet består af en forskningsmedarbejder (tandlæge), en forskningsmedarbejder, to laboratorieteknikere og en laboratorieassistent. Målingerne vil blive vurderet af de samme medlemmer af teamet under hele screeningen for at eliminere potentiel inter-observatør variation. Deltagere i alderen ≥35 år, der besøger klinikken, vil blive inviteret til at gennemgå en foreløbig screening. Vægt og højde måles med deltagerne iført let tøj uden sko. BMI udregnes (kg/m2). Taljeomkredsen måles midt mellem den nederste ribben og hoftekammen. Blodtrykket måles ved hjælp af et standard kviksølvsfygmomanometer efter 5 minutters hvile. Et gennemsnit af de to aflæsninger bruges til analysen. Tidligere historie med hypertension, borderline diabetes og svangerskabsdiabetes vil blive konstateret. Familiehistorie med diabetes, hjertesygdomme, slagtilfælde og stillesiddende livsstil registreres i et struktureret spørgeskema. Hvis deltageren har 2 eller flere risikofaktorer, vil de blive testet for faste og 2 timers plasmaglukose efter 75 g oral glukose (Accu check performa, Roche Diagnostics).

Næste dag vil deltagerne blive kategoriseret baseret på inklusions- og eksklusionskriterierne som normoglykæmiske, prædiabetiske (IFG/IGT) og nydiagnosticerede type 2-diabetespatienter. De udvalgte deltagere vil gennemgå tandundersøgelse for at tjekke for paradentose. Derefter udtages spyt- og fastende serumprøver fra alle individer til estimering af biomarkører (adiponectin, apelin, visfatin og vaspin). HbA1c, lipidprofil og gamma-glutamyl transferase (GGT) analyseres i fastende serum.

Ca. 10 ml blod opsamles i et serumrør. Blodprøveseparation udføres på det centrale undersøgelseslaboratorium. Blodprøver adskilles, alikvoteres, nedkøles og opbevares straks ved -70˚C til biomarkøranalyse. HbA1c måles ved immunturbidometri (tina-quant II; roche diagnostics corporation, tyskland); en procedure certificeret af det nationale glykohæmoglobinstandardiseringsprogram. Den fastende serumlipidprofil (totalkolesterol, triglycerider og højdensitetslipoprotein, kolesterol) og GGT estimeres ved hjælp af standardenzymatiske metoder. Biokemiske analyser udføres på en Cobas Integra 450 plus (Roche, Tyskland) autoanalyzer ved hjælp af reagenser fra Roche diagnostics, med passende kvalitetskontrolmetoder (Roche diagnostics referenceserum).

Ustimulerede spytprøver vil blive opsamlet i et prøveopsamlingsrør. Deltageren vil blive bedt om at afstå fra at spise eller drikke i omkring to timer før spytopsamling; det gøres omkring kl. 8-10. Forsøgspersonerne vil blive bedt om at skylle munden med drikkevand og derefter opspytte hele spyt i et opsamlingsrør. Spyttet centrifugeres derefter ved 9300g ved 40 C i ca. 10 minutter og opbevares derefter ved -70 grader C, indtil videre brug.

Spyt og plasma vil blive optøet ved stuetemperatur til måling af biomarkører ved hjælp af enzym-linked immunosorbent assay (ELISA). Der anvendes et kommercielt ELISA-kit til humane biomarkører for serum og spyt, og analysen udføres i henhold til producentens instruktioner. Hver prøve af spyt og plasma fra den samme patient vil blive analyseret i det samme forsøgssæt. Plasmaprøver kræver fortynding. Spytprøver vil blive analyseret uden fortynding.

Rapporter vil blive sendt fra centrallaboratoriet til deltagerne med kurer. Deltagere med nydiagnosticeret diabetes eller ukontrolleret diabetes vil blive henvist til en diabetolog til behandling og fulgt op i to år. Personer med prædiabetes vil blive rådet til at forbedre fysisk aktivitet og kostvaner og følges op i to år. Deltagere med paradentose vil blive henvist til en tandkirurg og følges op i to år.

Under besøg 4 og 6 vil deltagerens vægt, taljeomkreds, BMI, blodtryk blive målt og laboratorieundersøgelser som faste og 2 timers postprandial blodsukker, HbA1c og lipidprofil. Ved besøg 6 opsamles deltagerens spyt- og serumprøver til adipokinmåling.