Изучение ассоциации слюнных адипокинов с преддиабетом и сахарным диабетом 2 типа

Это исследование проводится в больнице третичного уровня, Диабетической больнице доктора А.Рамачандрана, Ченнаи. Лица без истории диабета, желающие пройти скрининг на диабет, будут приглашены для участия в исследовании, и после подписания формы информированного согласия они будут оценены по шкале риска. Пациенты, соответствующие критериям включения, будут включены в это исследование, и им будут проведены дополнительные тесты. Мы также пригласим супруга пациента, родственников или друзей, которые захотят принять участие в этом исследовании.

Предварительный отбор: В состав группы входят один научный сотрудник (стоматолог), один научный сотрудник, два лаборанта и один лаборант. Измерения будут оцениваться одними и теми же членами команды на протяжении всего скрининга, чтобы исключить возможные различия между наблюдателями. Участникам в возрасте ≥35 лет, посетившим клинику, будет предложено пройти предварительный скрининг. Вес и рост измеряются у участников в легкой одежде без обуви. Рассчитывается ИМТ (кг/м2). Окружность талии измеряется посередине между нижним краем ребра и гребнем подвздошной кости. Артериальное давление измеряют с помощью стандартного ртутного тонометра после 5-минутного отдыха. Для анализа используется среднее значение двух показаний. Будет установлена ​​предыдущая история гипертонии, пограничного диабета и гестационного диабета. Семейный анамнез диабета, сердечных заболеваний, инсульта и малоподвижного образа жизни записывается в структурированную анкету. Если у участника есть 2 или более факторов риска, он будет проверен на содержание глюкозы в плазме натощак и через 2 часа после перорального приема 75 г глюкозы (Accu check Performa, Roche Diagnostics).

На следующий день участники будут разделены на категории на основе критериев включения и исключения как пациенты с нормогликемическим состоянием, преддиабетическим состоянием (IFG/IGT) и недавно диагностированным диабетом 2 типа. Отобранные участники пройдут стоматологическое обследование на предмет пародонтита. Затем у всех индивидуумов получают образцы слюны и сыворотки натощак для оценки биомаркеров (адипонектин, апелин, висфатин и васпин). HbA1c, липидный профиль и гамма-глутамилтрансферазу (ГГТ) анализируют в сыворотке натощак.

Примерно 10 мл крови собирают в пробирку для сыворотки. Сепарация проб крови проводится в центральной исследовательской лаборатории. Образцы крови разделяют, делят на аликвоты, охлаждают и сразу же хранят при -70°C для анализа биомаркеров. HbA1c измеряют иммунотурбидометрическим методом (tina-quant II; Roche Diagnostics Corporation, Германия); процедура, сертифицированная национальной программой стандартизации гликогемоглобина. Липидный профиль сыворотки натощак (общий холестерин, триглицериды и липопротеины высокой плотности, холестерин) и ГГТ оценивают стандартными ферментативными методами. Биохимические анализы выполняются на автоанализаторе Cobas Integra 450 plus (Roche, Германия) с использованием реагентов Roche Diagnostics с соответствующими методами контроля качества (эталонная сыворотка Roche Diagnostics).

Нестимулированные образцы слюны будут собираться в пробирку для сбора образцов. Участника попросят воздержаться от еды и питья примерно за два часа до сбора слюны; это делается около 8 утра - 10 утра. Субъектов попросят прополоскать рот питьевой водой, а затем отхаркнуть всю слюну в пробирку для сбора. Затем слюну центрифугируют при 9300 g при 40°C в течение примерно 10 минут, а затем хранят при -70°C до дальнейшего использования.

Слюну и плазму размораживают при комнатной температуре для измерения биомаркеров с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Используют коммерческий набор ELISA для человеческих биомаркеров сыворотки и слюны, и анализ проводят в соответствии с инструкциями производителя. Каждый образец слюны и плазмы одного и того же пациента будет проанализирован в одной и той же экспериментальной группе. Образцы плазмы требуют разбавления. Образцы слюны будут анализироваться без разбавления.

Отчеты будут отправлены из центральной лаборатории участникам курьером. Участники с недавно диагностированным диабетом или неконтролируемым диабетом будут направлены к диабетологу для лечения и последующего наблюдения в течение двух лет. Людям с преддиабетом будет рекомендовано улучшить физическую активность и диетические привычки, после чего они будут наблюдаться в течение двух лет. Участники с пародонтитом будут направлены к хирургу-стоматологу и будут наблюдаться в течение двух лет.

Во время визита 4 и 6 будут измерены вес участника, окружность талии, ИМТ, артериальное давление, а также лабораторные исследования, такие как уровень глюкозы в крови натощак и через 2 часа после приема пищи, HbA1c и профиль липидов. При посещении 6 образцы слюны и сыворотки участника собирают для измерения адипокинов.