Studio dell'associazione delle adipochine salivari con il prediabete e il diabete mellito di tipo 2

Questo studio è condotto in un ospedale per cure terziarie, il Dr.A.Ramachandran's Diabetes Hospitals, Chennai. Le persone senza storia di diabete, che richiedono uno screening per il diabete saranno invitate a partecipare allo studio e dopo aver firmato il modulo di consenso informato saranno valutati dal punteggio di rischio. I pazienti che soddisfano i criteri di inclusione saranno arruolati in questo studio e verranno eseguiti ulteriori test. Inviteremo anche il coniuge, i parenti o gli amici del paziente che sono disposti a partecipare a questo studio.

Screening preliminare: il team comprende un ricercatore associato (dentista), un ricercatore associato, due tecnici di laboratorio e un assistente di laboratorio. Le misurazioni saranno valutate dagli stessi membri del team durante lo screening, per eliminare potenziali variazioni tra osservatori. I partecipanti di età ≥35 anni che visitano la clinica saranno invitati a sottoporsi a uno screening preliminare. Il peso e l'altezza vengono misurati con i partecipanti che indossano abiti leggeri senza scarpe. Il BMI è calcolato (kg/m2). La circonferenza della vita è misurata a metà strada tra il margine costale inferiore e la cresta iliaca. La pressione sanguigna viene misurata utilizzando uno sfigmomanometro a mercurio standard dopo un riposo di 5 minuti. Per l'analisi viene utilizzata una media delle due letture. Verrà accertata la precedente storia di ipertensione, diabete borderline e diabete gestazionale. Storia familiare di diabete, malattie cardiache, ictus e stile di vita sedentario sono registrati in un questionario strutturato. Se il partecipante ha 2 o più fattori di rischio, verrà testato per il digiuno e la glicemia plasmatica di 2 ore dopo 75 g di glucosio orale (Accu check performa, Roche Diagnostics).

I partecipanti del giorno successivo saranno classificati in base ai criteri di inclusione ed esclusione come pazienti normoglicemici, pre diabetici (IFG / IGT) e diabetici di tipo 2 di nuova diagnosi. I partecipanti selezionati saranno sottoposti a visita odontoiatrica per verificare la presenza di parodontite. Quindi si preleva un campione di siero salivare ea digiuno da tutti gli individui per la stima dei biomarcatori (adiponectina, apelina, visfatina e vaspina). HbA1c, profilo lipidico e gamma-glutamil transferasi (GGT) vengono analizzati nel siero a digiuno.

In una provetta per siero vengono raccolti circa 10 ml di sangue. La separazione dei campioni di sangue viene eseguita presso il laboratorio sperimentale centrale. I campioni di sangue vengono separati, aliquotati, refrigerati e immediatamente conservati a -70˚C per l'analisi dei biomarcatori. L'HbA1c viene misurata mediante immunoturbidometria (tina-quant II; roche diagnostics corporation, germania); una procedura certificata dal programma nazionale di standardizzazione della glicoemoglobina. Il profilo lipidico sierico a digiuno (colesterolo totale, trigliceridi e lipoproteine ​​ad alta densità, colesterolo) e il GGT sono stimati utilizzando metodi enzimatici standard. I test biochimici vengono eseguiti su un autoanalizzatore Cobas Integra 450 plus (Roche, Germania) utilizzando i reagenti della diagnostica Roche, con metodi di controllo di qualità appropriati (siero di riferimento della diagnostica Roche).

I campioni salivari non stimolati saranno raccolti in un tubo di raccolta del campione. Al partecipante verrà chiesto di astenersi dal mangiare o bere per circa due ore prima della raccolta della saliva; è fatto intorno alle 8:00 - 10:00. Ai soggetti verrà chiesto di sciacquarsi la bocca con acqua potabile e quindi di espettorare tutta la saliva in un tubo di raccolta. La saliva viene quindi centrifugata a 9300 g a 40 C per circa 10 minuti e quindi conservata a -70 gradi C, fino al successivo utilizzo.

La saliva e il plasma saranno scongelati a temperatura ambiente per la misurazione dei biomarcatori mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). Viene utilizzato un kit ELISA commerciale per biomarcatori umani per siero e saliva e il test viene condotto secondo le istruzioni del produttore. Ogni campione di saliva e plasma dello stesso paziente sarà analizzato nello stesso set sperimentale. I campioni di plasma richiedono diluizione. I campioni di saliva saranno analizzati senza diluizione.

I referti saranno spediti dal laboratorio centrale ai partecipanti tramite corriere. I partecipanti con diabete di nuova diagnosi o diabete non controllato verranno indirizzati a un diabetologo per il trattamento e seguiti per due anni. Agli individui con prediabete verrà consigliato di migliorare l'attività fisica e le abitudini alimentari e seguiti per due anni. I partecipanti con parodontite verranno indirizzati a un chirurgo dentale e seguiti per due anni.

Durante la visita 4 e 6 verranno misurati il ​​peso del partecipante, la circonferenza della vita, il BMI, la pressione sanguigna e le indagini di laboratorio come il digiuno e la glicemia postprandiale di 2 ore, HbA1c e il profilo lipidico. Alla Visita 6 i campioni di saliva e siero del partecipante vengono raccolti per la misurazione delle adipochine.