Studie av Association of Salivary Adipokines With Prediabetes and Type 2 Diabetes Mellitus

Denna studie genomförs på ett sjukhus för tertiärvård, Dr.A.Ramachandran's Diabetes Hospitals, Chennai. Personer utan diabetes som söker screening för diabetes kommer att bjudas in att delta i studien och efter att ha undertecknat formuläret för informerat samtycke kommer de att bedömas utifrån riskpoängen. De patienter som uppfyller inklusionskriterierna kommer att registreras i denna studie och ytterligare tester kommer att göras. Vi kommer också att bjuda in patientens make, släktingar eller vänner som är villiga att delta i denna studie.

Preliminär screening: Teamet består av en forskarassistent (tandläkare), en forskarassistent, två laboratorietekniker och en labbassistent. Mätningarna kommer att bedömas av samma medlemmar i teamet under hela screeningen, för att eliminera potentiell variation mellan observatörer. Deltagare i åldern ≥35 år som besöker kliniken kommer att bjudas in att genomgå en preliminär screening. Vikt och längd mäts med att deltagarna bär lätta kläder utan skor. BMI beräknas (kg/m2). Midjemåttet mäts mitt emellan den nedre revbenskanten och höftbenskammen. Blodtrycket mäts med en vanlig kvicksilver-sfygmomanometer efter 5 minuters vila. Ett medelvärde av de två avläsningarna används för analysen. Tidigare historia av hypertoni, borderline diabetes och graviditetsdiabetes kommer att fastställas. Familjehistoria av diabetes, hjärtsjukdomar, stroke och stillasittande livsstil registreras i ett strukturerat frågeformulär. Om deltagaren har 2 eller fler riskfaktorer kommer de att testas för fasta och 2 timmars plasmaglukos efter 75 g oralt glukos (Accu check performa, Roche Diagnostics).

Nästa dag kommer deltagarna att kategoriseras baserat på inklusions- och uteslutningskriterierna som normoglykemiska, prediabetiska (IFG/IGT) och nydiagnostiserade typ 2-diabetespatienter. De utvalda deltagarna kommer att genomgå tandundersökning för att kontrollera om det finns parodontit. Sedan tas saliv- och fastande serumprov från alla individer för uppskattning av biomarkörer (adiponektin, apelin, visfatin och vaspin). HbA1c, lipidprofil och gamma-glutamyltransferas (GGT) analyseras i fastande serum.

Cirka 10 ml blod samlas upp i ett serumrör. Blodprovsseparation utförs på det centrala undersökningslaboratoriet. Blodprover separeras, alikvoteras, kyls och förvaras omedelbart vid -70˚C för biomarköranalys. HbA1c mäts med immunturbidometri (tina-quant II; roche diagnostics corporation, tyskland); ett förfarande som är certifierat av det nationella standardiseringsprogrammet för glykohemoglobin. Den fasta serumlipidprofilen (totalkolesterol, triglycerider och högdensitetslipoprotein, kolesterol) och GGT uppskattas med hjälp av enzymatiska standardmetoder. Biokemiska analyser utförs på en Cobas Integra 450 plus (Roche, Tyskland) autoanalysator med användning av reagenser från Roche diagnostics, med lämpliga kvalitetskontrollmetoder (Roche diagnostics referensserum).

Ostimulerade salivprover kommer att samlas in i ett provtagningsrör. Deltagaren kommer att uppmanas att avstå från att äta eller dricka i cirka två timmar före salivuppsamling; det görs runt 8-10. Försökspersonerna kommer att bli ombedda att skölja munnen med dricksvatten och sedan upphosta hela saliven i ett uppsamlingsrör. Saliven centrifugeras sedan vid 9300g vid 40 C i cirka 10 minuter och förvaras sedan vid -70 grader C, tills vidare användning.

Saliv och plasma kommer att tinas vid rumstemperatur för mätning av biomarkörer med enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA). Ett kommersiellt ELISA-kit för humana biomarkörer för serum och saliv används och analysen utförs enligt tillverkarens instruktioner. Varje prov av saliv och plasma från samma patient kommer att analyseras i samma experimentuppsättning. Plasmaprover kräver utspädning. Salivprover kommer att analyseras utan utspädning.

Rapporter kommer att skickas från centrallaboratoriet till deltagarna med bud. Deltagare med nydiagnostiserad diabetes eller okontrollerad diabetes kommer att remitteras till en diabetolog för behandling och följas upp i två år. Individer med prediabetes kommer att uppmanas att förbättra fysisk aktivitet och kostvanor och följas upp i två år. Deltagare med parodontit kommer att remitteras till tandkirurg och följas upp i två år.

Under besök 4 & 6 kommer deltagarens vikt, midjemått, BMI, blodtryck att mätas och laboratorieundersökningar som fasta och 2 timmars postprandial blodsocker, HbA1c och Lipidprofil. Vid besök 6 samlas deltagarens saliv- och serumprover in för adipokinmätning.