天疱疮中人类 B 细胞反应的表型和功能特征 (CaReLyBP)

天疱疮是一种罕见的自身免疫性疾病，涉及皮肤和粘膜，估计每年每百万人中有 0.7 至 7 个新病例，导致不可忽视的发病率和死亡率。 天疱疮的特征是产生针对参与角质形成细胞粘附的两种桥粒蛋白的致病性自身抗体（即 桥粒芯糖蛋白 1 和桥粒芯糖蛋白 3)。 这些抗体负责破坏桥粒，导致棘层松解现象，从而导致皮肤和粘膜水疱的形成。 天疱疮的两种主要经典亚型已被个体化，寻常型天疱疮 (PV) 和天疱疮落叶型 (PF)，其中致病性自身抗体针对属于钙粘蛋白家族的桥粒跨膜糖蛋白、桥粒芯糖蛋白 3 和桥粒芯糖蛋白 1。 对于许多自身免疫性疾病，高剂量皮质类固醇 (CS) 长期以来一直是一线治疗的中流砥柱，单独或与免疫抑制剂联合使用。 然而，在这些方案中，当逐渐减少 CS 剂量导致长期治疗及其相关的 CS 副作用风险时，会频繁复发。

十年来，随着对 B​​ 细胞活化和存活的认识的提高，以及它们通过致病性自身抗体的产生直接影响天疱疮等自身免疫性疾病，导致了新的治疗靶点的确定。 基于 B 细胞耗竭的新生物疗法被开发用于治疗严重的自身免疫性疾病，尤其是天疱疮。

几个团队证明了 Rituximab 的安全性和有效性，Rituximab 是一种嵌合免疫球蛋白 gamma-1 (IgG1) 单克隆抗体 (mAb)，靶向分化抗原 20 (CD20) 分子簇，由除浆细胞外的前 B 细胞的正常 B 细胞表达，在皮质类固醇难治的严重天疱疮以及一线治疗中。 在这些工作中，其中一些工作同意提高对负责天疱疮活动的 B 细胞群的认识。 在天疱疮患者中，B 细胞群显示包含自身反应性 B 淋巴细胞，这些细胞产生针对桥粒芯糖蛋白的抗体，直接负责疾病活动，以及调节性 B 淋巴细胞 (B-reg)。 利妥昔单抗治疗天疱疮患者后，临床活动被证明与循环自身抗体的高滴度和自身反应性 B 细胞的增加有关，而临床缓解与 B 细胞群的变化有关，因为 B 细胞库治疗后重建时从寡克隆变为多克隆，产生 IL-10 (B-reg) 的未成熟和过渡 B 细胞增加。

导致自身反应性 B 细胞出现的机制、B-reg 在免疫耐受中的确切作用，以及触发促自身免疫和调节免疫 B 细胞之间失衡导致天疱疮活动的因素仍有待发现。 至于其他自身免疫性疾病，在感染事件后描述了首次发作和复发。 因此，感染因子可能通过激活先前静止的自身反应性 B 细胞或效应 B 细胞，触发参与免疫系统失衡的未知机制。

多形核中性粒细胞 (PMN) 是免疫系统对入侵微生物威胁的第一反应者；在宿主防御广泛的病原体中发挥先天免疫的基本功能，特别是通过吞噬作用、细胞内降解和抗菌因子的细胞外释放。 自 2004 年以来，多核中性中性粒细胞 (PNN) 被证明可以产生中性粒细胞胞外陷阱 (NET)，该结构由嵌有组蛋白、颗粒状和细胞质蛋白的去浓缩染色质组成，可捕获和杀死微生物。 NET 最初被认为是在细胞死亡 (NETosis) 后出现的，但 NET 的形成也被描述为没有 PMN 死亡和线粒体 DNA 挤出。 感染事件期间 NET 的产生负责细胞外环境中细胞溶质、核和线粒体抗原的释放；这种自身抗原暴露为红斑狼疮和抗中性粒细胞胞质抗体 (ANCA) 血管炎等自身免疫性疾病构成有利条件，其中自身抗体靶点属于 NET 成分（DNA、RNA、MPO、PR3）。 除了抗菌功能外，还发现 NET 的过度产生或 NET 的清除不足会维持组织炎症和导致自身炎症和自身免疫性疾病的过度组织损伤。

在狼疮中，最近的工作证明了 NET 成分存在于负责组织炎症的免疫复合物中，并且在 NET 衍生的免疫复合物存在的情况下可以获得 B 细胞的多克隆激活以及记忆 B 细胞激活。

除狼疮外，其他研究表明 NET 与类风湿性关节炎和小血管炎的炎症和自身免疫状态有关。

研究人员假设 NET 对 B 细胞的激活可能不仅限于抗体靶向 NET 成分的自身免疫性疾病，如狼疮（DNA、RNA、LL37）、类风湿性关节炎 (RA)（瓜氨酸化蛋白）或小血管炎（PR3，MPO）。

因此，主要目的是评估中性粒细胞胞外陷阱刺激后对天疱疮患者 B 细胞活化和 B 细胞群表型变化的影响。

次要目的是将在天疱疮患者中获得的结果与患有其他自身免疫性疾病（例如狼疮、类风湿性关节炎和 Gougerot-Sjögren 综合征）的患者进行比较。