Fænotypisk og funktionel karakterisering af human B-celle respons i Pemphigus (CaReLyBP)

Pemphigus er en sjælden autoimmun sygdom, der involverer hud og slimhinder med en forekomst anslået til 0,7 til 7 nye tilfælde pr. million om året, ansvarlig for ikke-ubetydelig morbiditet og dødelighed. Pemphigus er karakteriseret ved produktion af patogene autoantistoffer rettet mod to desmosomale proteiner involveret i keratinocytadhæsion (dvs. desmoglein 1 og desmoglein 3). Disse antistoffer er ansvarlige for afbrydelsen af ​​desmosomer, der fører til akantolyse-fænomenet, hvilket resulterer i dannelsen af ​​hud- og slimhindeblærer. To klassiske hovedundertyper af pemphigus er blevet individualiseret, pemphigus vulgaris (PV) og pemphigus foliaceus (PF), hvor patogene autoantistoffer er rettet mod desmosomale transmembrane glycoproteiner tilhørende cadherin-familien, henholdsvis desmoglein 3 og desmoglein 1. Som for mange autoimmune sygdomme forblev høje doser kortikosteroider (CS) grundpillen i førstelinjebehandlingen i lang tid, alene eller sammen med immunsuppressiva. På disse regimer forekommer der imidlertid hyppige tilbagefald, når dosis af CS nedtrappes, hvilket fører til langtidsbehandling og dens associerede risiko for CS-bivirkninger.

Siden ti år har forbedringen i viden om B-celleaktivering og overlevelse, såvel som deres direkte implikation i autoimmun sygdom som pemphigus gennem patogen autoantistofproduktion, ført til identifikation af nye terapeutiske mål. Nye biologiske terapier baseret på B-celledepletion blev udviklet ved alvorlige autoimmune lidelser, især i pemphigus.

Adskillige hold demonstrerede sikkerheden og effektiviteten af ​​Rituximab, et kimært immunoglobulin gamma-1(IgG1) monoklonalt antistof(mAb) rettet mod klyngen af ​​differentieringsantigen 20(CD20)-molekyle udtrykt af normale B-celler fra præ-B-celler undtagen plasmaceller , ved svær pemphigus refraktær over for kortikosteroider såvel som i første behandlingslinje. På tværs af disse værker var nogle af dem enige om at forbedre viden om B-cellepopulationer, der er ansvarlige for pemphigus-aktivitet. Hos pemfiguspatienter blev B-cellepopulationen vist at omfatte autoreaktive B-lymfocytter, der producerer antistoffer rettet mod desmogleins, direkte ansvarlige for sygdomsaktivitet, og regulatoriske B-lymfocytter (B-reg). Efter rituximab-behandling af pemphigus-patienter viste sig klinisk aktivitet at være forbundet med cirkulerende autoantistoffers høje titere og en stigning i autoreaktive B-celler, hvorimod klinisk remission var forbundet med en ændring i B-cellepopulationer som B-celle-repertoire ændret fra oligoklonal til polyklonal ved rekonstituering efter behandling, med en stigning af umodne og overgangsmæssige B-celler, der producerer IL-10 (B-reg).

Mekanismerne, der fører til autoreaktive B-cellers fremkomst, den præcise rolle af B-reg i immuntolerance, og de faktorer, der udløser ubalancen mellem pro-autoimmune og regulatoriske immune B-celler, der fører til pemphigus-aktivitet, mangler at blive opdaget. Som for andre autoimmune sygdomme blev de første opblussen og tilbagefald beskrevet efter infektionshændelser. Infektiøse stoffer kan således udløse ukendte mekanismer, der deltager i immunsystemets ubalance ved aktivering af tidligere hvilende autoreaktive B-celler eller effektor-B-celler.

Polymorfonukleære neutrofile granulocytter (PMN) er immunsystemets første respondere på trusler fra invaderende mikroorganismer; udfører essentielle funktioner af medfødt immunitet i værtsforsvar mod en bred vifte af patogener, især ved fagocytose, intracellulær nedbrydning og ekstracellulær udledning af antimikrobielle faktorer. Siden 2004 har Polynuclear Neutral Neutrophil (PNN) vist sig at producere neutrofile ekstracellulære fælder (NET), strukturer bestående af dekondenseret kromatin indlejret med histoner, granulære og cytoplasmatiske proteiner, der fanger og dræber mikrober. NET blev oprindeligt anset for at opstå efter celledød (NETosis), men NET-dannelse blev også beskrevet uden PMN-død med mitokondriel DNA-ekstrudering. NET-produktion under infektiøse hændelser er ansvarlig for frigivelsen af ​​cytosoliske, nukleare og mitokondrielle antigener i det ekstracellulære miljø; denne auto-antigen eksponering udgør gunstige betingelser for autoimmun sygdom såsom lupus erythematosus og AntiNeutrophil Cytoplasmic Antibody (ANCA) vaskulitis, hvoraf auto-antistof-mål tilhører NET-komponenter (DNA, RNA, MPO, PR3). Udover antimikrobiel funktion blev en overdreven produktion af NET eller NET utilstrækkelig clearance fundet til at opretholde vævsinflammation og overdreven vævsskade, der bidrager til autoinflammatoriske og autoimmune sygdomme.

I lupus har nyere værker vist beviser for, at NET-komponenter findes i immunkomplekser, der er ansvarlige for vævsinflammation, og at polyklonal aktivering af B-celle såvel som hukommelses-B-celleaktivering kunne opnås i nærvær af immunkomplekser afledt af NET.

Udover lupus viste andre værker tegn på NET-implikation i inflammatoriske og autoimmune tilstande i reumatoid arthritis og vaskulitis i små kar.

Efterforskerne antager, at B-celleaktivering af NET muligvis ikke er begrænset til autoimmune sygdomme, hvoraf antistoffer er rettet mod NET-komponenter, som det er tilfældet for lupus (DNA, RNA, LL37), reumatoid arthritis (RA) (citrullinerede proteiner) eller små karvaskulitis (PR3, MPO).

Det primære formål er således at vurdere effekterne på B-celleaktivering og de fænotypiske ændringer i B-cellepopulationen fra pemfiguspatienter efter stimulering med neutrofile ekstracellulære fælder.

Det sekundære mål er at sammenligne resultaterne opnået hos pemfiguspatienter med patienter med andre autoimmune sygdomme såsom lupus, leddegigt og Gougerot-Sjögrens syndrom.