Caracterización fenotípica y funcional de la respuesta de células B humanas en pénfigo (CaReLyBP)

El pénfigo es una rara enfermedad autoinmune que afecta la piel y las mucosas con una incidencia estimada de 0,7 a 7 nuevos casos por millón al año, responsable de una morbimortalidad no despreciable. El pénfigo se caracteriza por la producción de autoanticuerpos patógenos dirigidos contra dos proteínas desmosómicas involucradas en la adhesión de los queratinocitos (es decir, desmogleína 1 y desmogleína 3). Estos anticuerpos son responsables de la ruptura de los desmosomas que conducen al fenómeno de la acantólisis, que da como resultado la formación de ampollas en la piel y las mucosas. Se han individualizado dos subtipos clásicos principales de pénfigo, el pénfigo vulgar (PV) y el pénfigo foliáceo (PF), en los que los autoanticuerpos patógenos se dirigen contra las glicoproteínas transmembrana desmosómicas que pertenecen a la familia de las cadherinas, la desmogleína 3 y la desmogleína 1, respectivamente. En cuanto a muchas enfermedades autoinmunes, las altas dosis de corticosteroides (CS) siguieron siendo el pilar del tratamiento de primera línea durante mucho tiempo, solos o junto con inmunosupresores. Sin embargo, en estos regímenes, ocurren recaídas frecuentes cuando se reduce gradualmente la dosis de CS, lo que conduce a un tratamiento a largo plazo y su riesgo asociado de efectos secundarios de CS.

Desde hace diez años, la mejora en el conocimiento de la activación y supervivencia de las células B, así como su implicación directa en enfermedades autoinmunes como el pénfigo a través de la producción de autoanticuerpos patógenos, condujo a la identificación de nuevas dianas terapéuticas. Se desarrollaron nuevas terapias biológicas basadas en la depleción de células B en trastornos autoinmunitarios graves, en particular en el pénfigo.

Varios equipos demostraron la seguridad y la eficacia de Rituximab, un anticuerpo monoclonal (mAb) de inmunoglobulina quimérica gamma-1 (IgG1) dirigido al grupo de moléculas del antígeno de diferenciación 20 (CD20) expresado por las células B normales de las células pre-B, excepto las células plasmáticas. , en pénfigo severo refractario a corticoides así como en primera línea de tratamiento. A través de estos trabajos, algunos de ellos coincidieron en mejorar el conocimiento sobre las poblaciones de células B responsables de la actividad del pénfigo. En pacientes con pénfigo, se demostró que la población de células B comprende linfocitos B autorreactivos que producen anticuerpos dirigidos a las desmogleínas, directamente responsables de la actividad de la enfermedad, y linfocitos B reguladores (B-reg). Después del tratamiento con rituximab de pacientes con pénfigo, se demostró que la actividad clínica estaba asociada con títulos elevados de autoanticuerpos circulantes y un aumento de células B autorreactivas, mientras que la remisión clínica se asoció con un cambio en las poblaciones de células B, ya que el repertorio de células B cambió de oligoclonal a policlonal cuando se reconstituye después del tratamiento, con un aumento de células B inmaduras y de transición que producen IL-10 (B-reg).

Quedan por descubrir los mecanismos que conducen a la aparición de células B autorreactivas, el papel preciso de B-reg en la tolerancia inmune y los factores que desencadenan el desequilibrio entre las células B pro-autoinmunes e inmunes reguladoras que conducen a la actividad del pénfigo. En cuanto a otras enfermedades autoinmunes, se describieron primeros brotes y recaídas después de eventos infecciosos. Por lo tanto, los agentes infecciosos podrían desencadenar mecanismos desconocidos que participan en el desequilibrio del sistema inmunitario mediante la activación de células B autorreactivas previamente inactivas o células B efectoras.

Los granulocitos de neutrófilos polimorfonucleares (PMN) son los primeros en responder del sistema inmunitario a las amenazas de los microorganismos invasores; realizando funciones esenciales de la inmunidad innata en la defensa del huésped contra una amplia gama de patógenos, en particular mediante la fagocitosis, la degradación intracelular y la descarga extracelular de factores antimicrobianos. Desde 2004, se demostró que los neutrófilos neutros polinucleares (PNN) producen trampas extracelulares de neutrófilos (NET), estructuras que consisten en cromatina descondensada incrustada con histonas, proteínas granulares y citoplasmáticas que atrapan y matan microbios. Inicialmente, se consideró que los NET surgían después de la muerte celular (NETosis), pero también se describió la formación de NET sin muerte de PMN con extrusión de ADN mitocondrial. La producción de NET durante eventos infecciosos es responsable de la liberación de antígenos citosólicos, nucleares y mitocondriales en el entorno extracelular; esta exposición a autoantígenos constituye condiciones favorables para enfermedades autoinmunes como el lupus eritematoso y la vasculitis por anticuerpos citoplasmáticos antineutrófilos (ANCA), cuyos objetivos de autoanticuerpos pertenecen a los componentes NET (DNA, RNA, MPO, PR3). Además de la función antimicrobiana, se encontró una producción excesiva de NET o una eliminación insuficiente de NET para mantener la inflamación de los tejidos y daños excesivos en los tejidos que contribuyen a las enfermedades autoinflamatorias y autoinmunes.

En lupus, trabajos recientes demostraron evidencias de que los componentes de NET se encuentran en los complejos inmunes responsables de la inflamación de los tejidos y que la activación policlonal de las células B y la activación de las células B de memoria podrían obtenerse en presencia de complejos inmunes derivados de NET.

Además del lupus, otros trabajos mostraron evidencia de la implicación de NET en estados inflamatorios y autoinmunes en artritis reumatoide y vasculitis de vasos pequeños.

Los investigadores plantean la hipótesis de que la activación de las células B por NET podría no estar restringida a las enfermedades autoinmunes en las que los anticuerpos se dirigen a los componentes de NET, como es el caso del lupus (ADN, ARN, LL37), la artritis reumatoide (AR) (proteínas citrulinadas) o pequeñas vasculitis vascular (PR3, MPO).

Por lo tanto, el objetivo principal es evaluar los efectos sobre la activación de las células B y los cambios fenotípicos en la población de células B de pacientes con pénfigo después de la estimulación con trampas extracelulares de neutrófilos.

El objetivo secundario es comparar los resultados obtenidos en pacientes con pénfigo con pacientes con otras enfermedades autoinmunes como lupus, artritis reumatoide y síndrome de Gougerot-Sjögren.