Phänotypische und funktionelle Charakterisierung der menschlichen B-Zell-Antwort bei Pemphigus (CaReLyBP)

Pemphigus ist eine seltene Autoimmunerkrankung der Haut und Schleimhäute mit einer geschätzten Inzidenz von 0,7 bis 7 Neuerkrankungen pro Million pro Jahr, die für eine nicht zu vernachlässigende Morbidität und Mortalität verantwortlich ist. Pemphigus ist gekennzeichnet durch die Produktion pathogener Autoantikörper, die gegen zwei desmosomale Proteine ​​gerichtet sind, die an der Keratinozytenadhäsion beteiligt sind (d. h. Desmoglein 1 und Desmoglein 3). Diese Antikörper sind für die Zerstörung von Desmosomen verantwortlich, was zu dem Akantholyse-Phänomen führt, das zur Bildung von Haut- und Schleimhautblasen führt. Zwei klassische Hauptsubtypen des Pemphigus wurden individualisiert, Pemphigus vulgaris (PV) und Pemphigus foliaceus (PF), bei denen pathogene Autoantikörper gegen desmosomale Transmembran-Glykoproteine ​​gerichtet sind, die zur Cadherin-Familie Desmoglein 3 bzw. Desmoglein 1 gehören. Wie bei vielen Autoimmunerkrankungen blieben hohe Dosen von Kortikosteroiden (CS) lange Zeit die Hauptstütze der Erstlinienbehandlung, allein oder in Kombination mit Immunsuppressiva. Bei diesen Regimen kommt es jedoch häufig zu Rückfällen, wenn die CS-Dosierung ausgeschlichen wird, was zu einer Langzeitbehandlung und dem damit verbundenen Risiko von CS-Nebenwirkungen führt.

Seit zehn Jahren führten die Verbesserung des Wissens über B-Zell-Aktivierung und -Überleben sowie ihre direkte Auswirkung auf Autoimmunerkrankungen wie Pemphigus durch pathogene Autoantikörperproduktion zur Identifizierung neuer therapeutischer Ziele. Bei schweren Autoimmunerkrankungen, insbesondere bei Pemphigus, wurden neue biologische Therapien auf der Grundlage der B-Zell-Depletion entwickelt.

Mehrere Teams demonstrierten die Sicherheit und Wirksamkeit von Rituximab, einem chimären Immunglobulin-Gamma-1(IgG1)-monoklonalen Antikörper (mAb), der auf das Molekül Cluster of Differentiation Antigen 20 (CD20) abzielt, das von normalen B-Zellen aus Prä-B-Zellen mit Ausnahme von Plasmazellen exprimiert wird , bei schwerem Pemphigus, der auf Kortikosteroide nicht anspricht, sowie in der Erstlinientherapie. Über diese Arbeiten hinweg stimmten einige von ihnen überein, das Wissen über B-Zell-Populationen zu verbessern, die für die Pemphigus-Aktivität verantwortlich sind. Bei Pemphigus-Patienten wurde gezeigt, dass die B-Zell-Population autoreaktive B-Lymphozyten umfasst, die Antikörper gegen Desmogleine produzieren, die direkt für die Krankheitsaktivität verantwortlich sind, und regulatorische B-Lymphozyten (B-reg). Nach der Rituximab-Behandlung von Pemphigus-Patienten wurde nachgewiesen, dass die klinische Aktivität mit hohen Titern zirkulierender Autoantikörper und einem Anstieg autoreaktiver B-Zellen verbunden war, während eine klinische Remission mit einer Veränderung der B-Zell-Populationen als B-Zell-Repertoire verbunden war bei der Rekonstitution nach der Behandlung von oligoklonal zu polyklonal geändert, mit einer Zunahme von unreifen und Übergangs-B-Zellen, die IL-10 (B-reg) produzieren.

Die Mechanismen, die zum Auftreten autoreaktiver B-Zellen führen, die genaue Rolle von B-reg bei der Immuntoleranz und die Faktoren, die das Ungleichgewicht zwischen pro-autoimmunen und regulatorischen Immun-B-Zellen auslösen, was zu Pemphigus-Aktivität führt, müssen noch entdeckt werden. Wie bei anderen Autoimmunerkrankungen wurden erste Schübe und Rückfälle nach infektiösen Ereignissen beschrieben. Daher könnten Infektionserreger unbekannte Mechanismen auslösen, die an dem Ungleichgewicht des Immunsystems durch die Aktivierung von zuvor ruhenden autoreaktiven B-Zellen oder Effektor-B-Zellen beteiligt sind.

Polymorphkernige neutrophile Granulozyten (PMN) sind die ersten Responder des Immunsystems auf Bedrohungen durch eindringende Mikroorganismen; Erfüllung wesentlicher Funktionen der angeborenen Immunität bei der Abwehr des Wirts gegen ein breites Spektrum von Pathogenen, insbesondere durch Phagozytose, intrazellulären Abbau und extrazelluläre Freisetzung von antimikrobiellen Faktoren. Seit 2004 wurde gezeigt, dass polynukleäre neutrale Neutrophile (PNN) neutrophile extrazelluläre Fallen (NET) produzieren, Strukturen, die aus dekondensiertem Chromatin bestehen, das in Histone eingebettet ist, körnige und zytoplasmatische Proteine, die Mikroben einfangen und töten. Ursprünglich wurde angenommen, dass NET nach dem Zelltod (NETosis) entstehen, aber die NET-Bildung wurde auch ohne PMN-Tod mit mitochondrialer DNA-Extrusion beschrieben. Die NET-Produktion während infektiöser Ereignisse ist für die Freisetzung von zytosolischen, nuklearen und mitochondrialen Antigenen in die extrazelluläre Umgebung verantwortlich; diese Autoantigen-Exposition stellt günstige Bedingungen für Autoimmunkrankheiten wie Lupus erythematodes und Vaskulitis mit antineutrophilen zytoplasmatischen Antikörpern (ANCA) dar, deren Autoantikörper-Targets zu NET-Komponenten (DNA, RNA, MPO, PR3) gehören. Neben der antimikrobiellen Funktion wurde festgestellt, dass eine übermäßige Produktion von NET oder eine unzureichende NET-Clearance Gewebeentzündungen und übermäßige Gewebeschäden aufrechterhält, die zu autoinflammatorischen und Autoimmunerkrankungen beitragen.

Bei Lupus zeigten neuere Arbeiten Hinweise darauf, dass NET-Komponenten in Immunkomplexen gefunden werden, die für Gewebeentzündungen verantwortlich sind, und dass eine polyklonale Aktivierung von B-Zellen sowie eine Aktivierung von Gedächtnis-B-Zellen in Gegenwart von Immunkomplexen erhalten werden könnte, die von NET stammen.

Neben Lupus zeigten andere Arbeiten Hinweise auf eine Beteiligung von NET an entzündlichen und autoimmunen Zuständen bei rheumatoider Arthritis und Vaskulitis kleiner Gefäße.

Die Forscher gehen davon aus, dass die B-Zell-Aktivierung durch NET möglicherweise nicht auf Autoimmunerkrankungen beschränkt ist, bei denen Antikörper gegen NET-Komponenten gerichtet sind, wie dies bei Lupus (DNA, RNA, LL37), Rheumatoide Arthritis (RA) (citrullinierte Proteine) oder klein der Fall ist Gefäßvaskulitis (PR3, MPO).

Daher besteht das Hauptziel darin, die Auswirkungen auf die B-Zell-Aktivierung und die phänotypischen Veränderungen in der B-Zell-Population von Pemphigus-Patienten nach Stimulation durch extrazelluläre Fallen von Neutrophilen zu bewerten.

Das sekundäre Ziel besteht darin, die bei Pemphiguspatienten erzielten Ergebnisse mit Patienten mit anderen Autoimmunerkrankungen wie Lupus, rheumatoider Arthritis und Gougerot-Sjögren-Syndrom zu vergleichen.