Fenotypisk och funktionell karaktärisering av mänskligt B-cellssvar i Pemphigus (CaReLyBP)

Pemphigus är en sällsynt autoimmun sjukdom som involverar hud och slemhinnor med en incidens som uppskattas till 0,7 till 7 nya fall per miljon per år, ansvarig för icke försumbar sjuklighet och dödlighet. Pemphigus kännetecknas av produktionen av patogena autoantikroppar riktade mot två desmosomala proteiner involverade i keratinocytadhesion (dvs. desmoglein 1 och desmoglein 3). Dessa antikroppar är ansvariga för störningen av desmosomer som leder till akantolysfenomenet, vilket resulterar i bildandet av hud- och slemhinneblåsor. Två huvudsakliga klassiska subtyper av pemphigus har individualiserats, pemphigus vulgaris (PV) och pemphigus foliaceus (PF), där patogena autoantikroppar är riktade mot desmosomala transmembrana glykoproteiner som tillhör cadherinfamiljen, desmoglein 3 respektive desmoglein 1. Som för många autoimmuna sjukdomar förblev höga doser kortikosteroider (CS) grundpelaren i förstahandsbehandlingen under lång tid, ensamma eller tillsammans med immunsuppressiva medel. På dessa regimer inträffar dock frekventa återfall när CS-dosen minskas, vilket leder till långtidsbehandling och dess associerade risk för CS-biverkningar.

Sedan tio år tillbaka har förbättringen av kunskapen om B-cellsaktivering och överlevnad, såväl som deras direkta implikation i autoimmun sjukdom som pemfigus genom patogen produktion av autoantikroppar, lett till identifieringen av nya terapeutiska mål. Nya biologiska terapier baserade på utarmning av B-celler utvecklades vid svåra autoimmuna sjukdomar, särskilt vid pemfigus.

Flera team demonstrerade säkerheten och effekten av Rituximab, en chimär immunglobulin gamma-1(IgG1) monoklonal antikropp(mAb) riktad mot klustret av differentieringsantigen 20(CD20)-molekylen uttryckt av normala B-celler från pre-B-celler förutom plasmaceller , vid svår pemfigus som är refraktär mot kortikosteroider såväl som i första behandlingslinjen. I dessa verk gick några av dem överens om att förbättra kunskapen om B-cellspopulationer som är ansvariga för pemfigusaktivitet. Hos pemfiguspatienter visades B-cellspopulationen omfatta autoreaktiva B-lymfocyter som producerar antikroppar riktade mot desmogleiner, direkt ansvariga för sjukdomsaktivitet, och regulatoriska B-lymfocyter (B-reg). Efter rituximabbehandling av pemfiguspatienter visade sig klinisk aktivitet vara associerad med höga titrar av cirkulerande autoantikroppar och en ökning av autoreaktiva B-celler, medan klinisk remission var associerad med en förändring i B-cellspopulationer, som B-cellsrepertoar förändrats från oligoklonal till polyklonal vid rekonstituering efter behandling, med en ökning av omogna och övergångsmässiga B-celler som producerar IL-10 (B-reg).

Mekanismerna som leder till uppkomsten av autoreaktiva B-celler, den exakta rollen av B-reg i immuntolerans och faktorerna som utlöser obalansen mellan pro-autoimmuna och regulatoriska immuna B-celler som leder till pemfigusaktivitet återstår att upptäcka. Liksom för andra autoimmuna sjukdomar, beskrevs första flare och skov efter infektionshändelser. Således kan infektiösa medel utlösa okända mekanismer som deltar i immunsystemets obalans genom aktivering av tidigare vilande autoreaktiva B-celler eller effektor-B-celler.

Polymorfonukleära neutrofila granulocyter (PMN) är immunsystemets första svar på hot från invaderande mikroorganismer; utföra väsentliga funktioner av medfödd immunitet i värdförsvar mot ett brett spektrum av patogener, särskilt genom fagocytos, intracellulär nedbrytning och extracellulär utsöndring av antimikrobiella faktorer. Sedan 2004 har Polynuclear Neutral Neutrophil (PNN) visat sig producera neutrofila extracellulära fällor (NET), strukturer bestående av dekondenserat kromatin inbäddat med histoner, granulära och cytoplasmatiska proteiner som fångar och dödar mikrober. NET ansågs initialt uppstå efter celldöd (NETosis) men NET-bildning beskrevs också utan PMN-död med mitokondriell DNA-extrudering. NET-produktion under infektiösa händelser är ansvarig för frisättningen av cytosoliska, nukleära och mitokondriella antigener i den extracellulära miljön; denna auto-antigenexponering utgör gynnsamma förhållanden för autoimmun sjukdom såsom lupus erythematosus och antineutrofil cytoplasmatisk antikropp (ANCA) vaskulit, varav autoantikroppsmål tillhör NET-komponenter (DNA, RNA, MPO, PR3). Förutom antimikrobiell funktion befanns en överdriven produktion av NET eller NET otillräcklig clearance upprätthålla vävnadsinflammation och överdriven vävnadsskador som bidrar till autoinflammatoriska och autoimmuna sjukdomar.

I lupus visade nyare arbeten bevis på att NET-komponenter finns i immunkomplex som är ansvariga för vävnadsinflammation och att polyklonal aktivering av B-cell såväl som minnes-B-cellsaktivering kan erhållas i närvaro av immunkomplex härledda från NET.

Förutom lupus visade andra verk bevis på NET-implikation i inflammatoriska och autoimmuna tillstånd vid reumatoid artrit och vaskulit i små kärl.

Utredarna antar att B-cellsaktivering av NET kanske inte är begränsad till autoimmuna sjukdomar där antikroppar riktar sig mot NET-komponenter, eftersom det är fallet för lupus (DNA, RNA, LL37), reumatoid artrit (RA) (citrullinerade proteiner) eller små kärlvaskulit (PR3, MPO).

Det primära syftet är således att bedöma effekterna på B-cellsaktivering och de fenotypiska förändringarna i B-cellspopulationen från pemfiguspatienter efter stimulering av neutrofila extracellulära fällor.

Det sekundära syftet är att jämföra resultaten från pemfiguspatienter med patienter med andra autoimmuna sjukdomar som lupus, reumatoid artrit och Gougerot-Sjögrens syndrom.