Фенотипическая и функциональная характеристика В-клеточного ответа человека при пузырчатке (CaReLyBP)

Пузырчатка является редким аутоиммунным заболеванием кожи и слизистых оболочек с частотой от 0,7 до 7 новых случаев на миллион в год, вызывая незначительную заболеваемость и смертность. Пузырчатка характеризуется продукцией патогенных аутоантител, направленных против двух десмосомных белков, участвующих в адгезии кератиноцитов (т.е. десмоглеин 1 и десмоглеин 3). Эти антитела ответственны за разрушение десмосом, приводящее к явлению акантолиза, что приводит к образованию волдырей на коже и слизистых оболочках. Были выделены два основных классических подтипа пузырчатки, вульгарная пузырчатка (PV) и листовидная пузырчатка (PF), при которых патогенные аутоантитела направлены против десмосомных трансмембранных гликопротеинов, принадлежащих к семейству кадгеринов, десмоглеину 3 и десмоглеину 1 соответственно. Что касается многих аутоиммунных заболеваний, высокие дозы кортикостероидов (КС) долгое время оставались основой лечения первой линии, отдельно или в сочетании с иммунодепрессантами. Однако при этих режимах частые рецидивы возникают при снижении дозы КС, что приводит к длительному лечению и связанному с ним риску побочных эффектов КС.

За последние десять лет усовершенствование знаний об активации и выживании В-клеток, а также об их прямом влиянии на аутоиммунные заболевания, такие как пузырчатка, посредством производства патогенных аутоантител, привело к выявлению новых терапевтических мишеней. Новые биологические методы лечения, основанные на истощении В-клеток, были разработаны при тяжелых аутоиммунных заболеваниях, особенно при пузырчатке.

Несколько команд продемонстрировали безопасность и эффективность ритуксимаба, химерного иммуноглобулина гамма-1 (IgG1), моноклонального антитела (mAb), нацеленного на молекулу кластера дифференцировочного антигена 20 (CD20), экспрессируемую нормальными В-клетками из пре-В-клеток, за исключением плазматических клеток. , при тяжелой пузырчатке, рефрактерной к кортикостероидам, а также в первой линии лечения. В этих работах некоторые из них согласились улучшить знания о популяциях B-клеток, ответственных за активность пузырчатки. Показано, что у больных пузырчаткой популяция В-клеток включает аутореактивные В-лимфоциты, продуцирующие антитела к десмоглеинам, непосредственно ответственным за активность заболевания, и регуляторные В-лимфоциты (B-reg). Было доказано, что после лечения ритуксимабом больных пузырчаткой клиническая активность была связана с высокими титрами циркулирующих аутоантител и увеличением аутореактивных В-клеток, тогда как клиническая ремиссия была связана с изменением популяций В-клеток, поскольку репертуар В-клеток изменился с олигоклонального на поликлональный при восстановлении после лечения с увеличением количества незрелых и переходных В-клеток, продуцирующих ИЛ-10 (В-reg).

Механизмы, приводящие к появлению аутореактивных В-клеток, точная роль B-reg в иммунной толерантности и факторы, вызывающие дисбаланс между проаутоиммунными и регуляторными иммунными В-клетками, приводящий к активности пузырчатки, еще предстоит выяснить. Что касается других аутоиммунных заболеваний, первые вспышки и рецидивы были описаны после инфекционных событий. Таким образом, инфекционные агенты могут запускать неизвестные механизмы, участвующие в дисбалансе иммунной системы, путем активации ранее находившихся в состоянии покоя аутореактивных В-клеток или эффекторных В-клеток.

Полиморфноядерные нейтрофильные гранулоциты (PMN) первыми реагируют иммунной системой на угрозы со стороны вторжения микроорганизмов; выполнение основных функций врожденного иммунитета в защите хозяина от широкого спектра патогенов, в частности, путем фагоцитоза, внутриклеточной деградации и внеклеточного выброса противомикробных факторов. С 2004 года было показано, что полинуклеарные нейтральные нейтрофилы (PNN) производят нейтрофильные внеклеточные ловушки (NET), структуры, состоящие из деконденсированного хроматина, встроенного в гистоны, гранулярные и цитоплазматические белки, которые захватывают и убивают микробы. Первоначально считалось, что NET возникают после гибели клеток (NETosis), но образование NET также было описано без гибели PMN с экструзией митохондриальной ДНК. Продукция NET во время инфекционных событий отвечает за высвобождение цитозольных, ядерных и митохондриальных антигенов во внеклеточную среду; это воздействие аутоантигена создает благоприятные условия для аутоиммунного заболевания, такого как красная волчанка и васкулит против нейтрофильных цитоплазматических антител (ANCA), из которых мишени аутоантител относятся к компонентам NET (ДНК, РНК, МПО, PR3). Было обнаружено, что помимо антимикробной функции чрезмерное производство NET или недостаточный клиренс NET поддерживают воспаление тканей и чрезмерные повреждения тканей, которые способствуют аутовоспалительным и аутоиммунным заболеваниям.

При волчанке недавние работы продемонстрировали доказательства того, что компоненты NET обнаруживаются в иммунных комплексах, ответственных за воспаление тканей, и что поликлональная активация B-клеток, а также активация B-клеток памяти могут быть получены в присутствии иммунных комплексов, полученных из NET.

Помимо волчанки, в других работах были представлены доказательства участия НЭО в воспалительных и аутоиммунных состояниях при ревматоидном артрите и васкулите мелких сосудов.

Исследователи предполагают, что активация В-клеток с помощью NET может не ограничиваться аутоиммунными заболеваниями, при которых антитела нацелены на компоненты NET, как это имеет место при волчанке (ДНК, РНК, LL37), ревматоидном артрите (РА) (цитруллинированные белки) или малых сосудистый васкулит (PR3, МПО).

Таким образом, основная цель состоит в том, чтобы оценить влияние на активацию В-клеток и фенотипические изменения в популяции В-клеток у пациентов с пузырчаткой после стимуляции нейтрофильными внеклеточными ловушками.

Вторичная цель состоит в том, чтобы сравнить результаты, полученные у пациентов с пузырчаткой, с пациентами с другими аутоиммунными заболеваниями, такими как волчанка, ревматоидный артрит и синдром Гужеро-Шегрена.