Caractérisation phénotypique et fonctionnelle de la réponse des lymphocytes B humains dans le pemphigus (CaReLyBP)

Le pemphigus est une maladie auto-immune rare de la peau et des muqueuses dont l'incidence est estimée à 0,7 à 7 nouveaux cas par million par an, responsable d'une morbi-mortalité non négligeable. Le pemphigus est caractérisé par la production d'auto-anticorps pathogènes dirigés contre deux protéines desmosomales impliquées dans l'adhésion des kératinocytes (i.e. desmogléine 1 et desmogléine 3). Ces anticorps sont responsables de la perturbation des desmosomes conduisant au phénomène d'acantholyse, qui se traduit par la formation de vésicules cutanées et muqueuses. Deux principaux sous-types classiques de pemphigus ont été individualisés, le pemphigus vulgaire (PV) et le pemphigus foliacé (PF), dans lesquels les auto-anticorps pathogènes sont dirigés contre les glycoprotéines transmembranaires desmosomales appartenant à la famille des cadhérines, la desmogléine 3 et la desmogléine 1, respectivement. Comme pour de nombreuses maladies auto-immunes, les fortes doses de corticoïdes (CS) sont restées longtemps le pilier du traitement de première intention, seuls ou en association avec des immunosuppresseurs. Cependant, sur ces schémas thérapeutiques, des rechutes fréquentes se produisent lors de la diminution de la dose de CS conduisant à un traitement à long terme et au risque associé d'effets secondaires de CS.

Depuis une dizaine d'années, l'amélioration des connaissances sur l'activation et la survie des lymphocytes B, ainsi que leur implication directe dans les maladies auto-immunes telles que le pemphigus via la production d'auto-anticorps pathogènes, ont conduit à l'identification de nouvelles cibles thérapeutiques. De nouvelles thérapies biologiques basées sur la déplétion en lymphocytes B ont été développées dans les maladies auto-immunes sévères, notamment dans le pemphigus.

Plusieurs équipes ont démontré l'innocuité et l'efficacité du Rituximab, un anticorps monoclonal (mAb) d'immunoglobuline gamma-1 (IgG1) chimérique ciblant le groupe de molécules de l'antigène de différenciation 20 (CD20) exprimé par les cellules B normales à partir des cellules pré-B, à l'exception des plasmocytes. , dans le pemphigus sévère réfractaire aux corticoïdes ainsi qu'en première ligne de traitement. À travers ces travaux, certains d'entre eux ont concouru à améliorer les connaissances sur les populations de cellules B responsables de l'activité du pemphigus. Chez les patients atteints de pemphigus, il a été démontré que la population de lymphocytes B comprenait des lymphocytes B auto-réactifs produisant des anticorps ciblant les desmogléines, directement responsables de l'activité de la maladie, et des lymphocytes B régulateurs (B-reg). Après le traitement par rituximab des patients atteints de pemphigus, il a été prouvé que l'activité clinique était associée à des titres élevés d'auto-anticorps circulants et à une augmentation des lymphocytes B auto-réactifs, tandis que la rémission clinique était associée à un changement dans les populations de lymphocytes B, comme le répertoire des lymphocytes B. passé d'oligoclonal à polyclonal lors de la reconstitution après traitement, avec une augmentation des cellules B immatures et transitionnelles produisant de l'IL-10 (B-reg).

Les mécanismes conduisant à l'apparition des lymphocytes B autoréactifs, le rôle précis de B-reg dans la tolérance immunitaire et les facteurs déclenchant le déséquilibre entre les lymphocytes B pro auto-immuns et régulateurs immunitaires conduisant à l'activité du pemphigus restent à découvrir. Comme pour les autres maladies auto-immunes, des premières poussées et rechutes ont été décrites suite à des événements infectieux. Ainsi, des agents infectieux pourraient déclencher des mécanismes inconnus participant au déséquilibre du système immunitaire par l'activation de lymphocytes B autoréactifs précédemment quiescents ou de lymphocytes B effecteurs.

Les granulocytes neutrophiles polymorphonucléaires (PMN) sont les premiers intervenants du système immunitaire face aux menaces des micro-organismes envahisseurs ; remplissant les fonctions essentielles de l'immunité innée dans la défense de l'hôte contre un large éventail d'agents pathogènes, notamment par la phagocytose, la dégradation intracellulaire et la décharge extracellulaire de facteurs antimicrobiens. Depuis 2004, il a été démontré que les neutrophiles neutres polynucléaires (PNN) produisent des pièges extracellulaires de neutrophiles (NET), des structures constituées de chromatine décondensée incrustée d'histones, de protéines granulaires et cytoplasmiques qui piègent et tuent les microbes. Les NET étaient initialement considérés comme survenant après la mort cellulaire (NETosis), mais la formation de NET a également été décrite sans mort de PMN avec extrusion d'ADN mitochondrial. La production de NET lors d'événements infectieux est responsable de la libération d'antigènes cytosoliques, nucléaires et mitochondriaux dans l'environnement extracellulaire ; cette exposition aux auto-antigènes constituant des conditions favorables aux maladies auto-immunes telles que le lupus érythémateux et la vascularite à AntiNeutrophil Cytoplasmic Antibody (ANCA), dont les cibles d'auto-anticorps appartiennent aux composants NET (ADN, ARN, MPO, PR3). Outre la fonction antimicrobienne, une production excessive de NET ou une clairance insuffisante de NET ont été trouvées pour maintenir l'inflammation tissulaire et les dommages tissulaires excessifs qui contribuent aux maladies auto-inflammatoires et auto-immunes.

Dans le lupus, des travaux récents ont mis en évidence que des composants NET se trouvent dans des complexes immuns responsables de l'inflammation tissulaire et que l'activation polyclonale des cellules B ainsi que l'activation des cellules B mémoire pouvaient être obtenues en présence de complexes immuns dérivés de NET.

Outre le lupus, d'autres travaux ont mis en évidence l'implication des NET dans les états inflammatoires et auto-immuns de la polyarthrite rhumatoïde et de la vascularite des petits vaisseaux.

Les chercheurs émettent l'hypothèse que l'activation des cellules B par les NET pourrait ne pas être limitée aux maladies auto-immunes dont les anticorps ciblent les composants des NET, comme c'est le cas pour le lupus (ADN, ARN, LL37), la polyarthrite rhumatoïde (PR) (protéines citrullinées) ou les petites vascularite vasculaire (PR3, MPO).

Ainsi, l'objectif principal est d'évaluer les effets sur l'activation des lymphocytes B et les changements phénotypiques dans la population de lymphocytes B des patients atteints de pemphigus après stimulation par des pièges extracellulaires de neutrophiles.

L'objectif secondaire est de comparer les résultats obtenus chez des patients atteints de pemphigus à des patients atteints d'autres maladies auto-immunes telles que le lupus, la polyarthrite rhumatoïde ou le syndrome de Gougerot-Sjögren.