Fenotypisk og funksjonell karakterisering av human B-cellerespons i Pemphigus (CaReLyBP)

Pemphigus er en sjelden autoimmun sykdom som involverer hud og slimhinner med en forekomst estimert til 0,7 til 7 nye tilfeller per million per år, ansvarlig for ikke-ubetydelig sykelighet og dødelighet. Pemphigus er preget av produksjon av patogene autoantistoffer rettet mot to desmosomale proteiner involvert i keratinocyttadhesjon (dvs. desmoglein 1 og desmoglein 3). Disse antistoffene er ansvarlige for forstyrrelsen av desmosomer som fører til akantolyse-fenomenet, som resulterer i dannelse av hud- og slimhinneblemmer. To klassiske hovedundertyper av pemphigus har blitt individualisert, pemphigus vulgaris (PV) og pemphigus foliaceus (PF), der patogene autoantistoffer er rettet mot desmosomale transmembrane glykoproteiner som tilhører henholdsvis cadherinfamilien, desmoglein 3 og desmoglein 1. Som for mange autoimmune sykdommer, forble høye doser kortikosteroider (CS) bærebjelken i førstelinjebehandlingen i lang tid, alene eller sammen med immunsuppressiva. På disse regimene oppstår imidlertid hyppige tilbakefall ved nedtrapping av CS-dosering som fører til langtidsbehandling og den tilhørende risikoen for CS-bivirkninger.

Siden ti år har forbedringen i kunnskapen om B-celleaktivering og overlevelse, så vel som deres direkte implikasjon i autoimmun sykdom som pemfigus gjennom patogen autoantistoffproduksjon, ført til identifisering av nye terapeutiske mål. Nye biologiske terapier basert på uttømming av B-celler ble utviklet ved alvorlige autoimmune lidelser, spesielt i pemphigus.

Flere team demonstrerte sikkerheten og effekten til Rituximab, et kimært immunoglobulin gamma-1(IgG1) monoklonalt antistoff(mAb) rettet mot klyngen av differensieringsantigen 20(CD20)-molekylet uttrykt av normale B-celler fra pre-B-celler bortsett fra plasmaceller , ved alvorlig pemphigus som er refraktær overfor kortikosteroider så vel som i første behandlingslinje. På tvers av disse verkene var noen av dem enige om å forbedre kunnskapen om B-cellepopulasjoner som er ansvarlige for pemphigus-aktivitet. Hos pemfiguspasienter ble B-cellepopulasjonen vist å omfatte autoreaktive B-lymfocytter som produserer antistoffer rettet mot desmogleiner, direkte ansvarlige for sykdomsaktivitet, og regulatoriske B-lymfocytter (B-reg). Etter rituximab-behandling av pemfiguspasienter, ble klinisk aktivitet vist å være assosiert med sirkulerende autoantistoffer høye titere og en økning av autoreaktive B-celler, mens klinisk remisjon var assosiert med en endring i B-cellepopulasjoner, som B-celle repertoar. endret seg fra oligoklonal til polyklonal ved rekonstituering etter behandling, med en økning av umodne og overgangsmessige B-celler som produserer IL-10 (B-reg).

Mekanismene som fører til utseende av autoreaktive B-celler, den nøyaktige rollen til B-reg i immuntoleranse, og faktorene som utløser ubalansen mellom pro-autoimmune og regulatoriske immun-B-celler som fører til pemphigus-aktivitet, gjenstår å bli oppdaget. Som for andre autoimmune sykdommer, ble første oppblussing og tilbakefall beskrevet etter infeksjonshendelser. Dermed kan smittestoffer utløse ukjente mekanismer som deltar i immunsystemets ubalanse ved aktivering av tidligere hvilende autoreaktive B-celler eller effektor-B-celler.

Polymorfonukleære nøytrofile granulocytter (PMN) er immunsystemets første respondere på trusler fra invaderende mikroorganismer; utføre essensielle funksjoner av medfødt immunitet i vertsforsvar mot et bredt spekter av patogener, spesielt ved fagocytose, intracellulær nedbrytning og ekstracellulær utslipp av antimikrobielle faktorer. Siden 2004 ble polynukleær nøytral nøytrofil (PNN) vist å produsere nøytrofile ekstracellulære feller (NET), strukturer bestående av dekondensert kromatin innebygd med histoner, granulære og cytoplasmatiske proteiner som fanger og dreper mikrober. NET ble opprinnelig ansett for å oppstå etter celledød (NETosis), men NET-dannelse ble også beskrevet uten PMN-død med mitokondriell DNA-ekstrudering. NET-produksjon under smittsomme hendelser er ansvarlig for frigjøring av cytosoliske, nukleære og mitokondrielle antigener i det ekstracellulære miljøet; denne auto-antigeneksponeringen utgjør gunstige forhold for autoimmun sykdom som lupus erythematosus og AntiNeutrophil Cytoplasmic Antibody (ANCA) vaskulitt, hvorav autoantistoffmål tilhører NET-komponenter (DNA, RNA, MPO, PR3). I tillegg til antimikrobiell funksjon, ble en overdreven produksjon av NET eller NET utilstrekkelig clearance funnet for å opprettholde vevsbetennelse og overdreven vevsskader som bidrar til autoinflammatoriske og autoimmune sykdommer.

Ved lupus viste nyere arbeider bevis på at NET-komponenter finnes i immunkomplekser som er ansvarlige for vevsbetennelse, og at polyklonal aktivering av B-celle så vel som minne B-celleaktivering kan oppnås i nærvær av immunkomplekser avledet fra NET.

Foruten lupus, viste andre arbeider bevis på NET-implikasjon i inflammatoriske og autoimmune tilstander ved revmatoid artritt og vaskulitt i små kar.

Etterforskerne antar at B-celleaktivering av NET kanskje ikke er begrenset til autoimmune sykdommer hvor antistoffer retter seg mot NET-komponenter, slik det er tilfelle for lupus (DNA, RNA, LL37), revmatoid artritt (RA) (citrullinerte proteiner) eller små karvaskulitt (PR3, MPO).

Derfor er det primære målet å vurdere effekten på B-celleaktivering og de fenotypiske endringene i B-cellepopulasjonen fra pemfiguspasienter etter stimulering av nøytrofile ekstracellulære feller.

Det sekundære målet er å sammenligne resultatene oppnådd hos pemfiguspasienter med pasienter med andre autoimmune sykdommer som lupus, revmatoid artritt og Gougerot-Sjögrens syndrom.