补充维生素D改善肺炎患儿的作用

主题和方法：

研究设计和研究背景 本研究是一项随机、双盲安慰剂对照试验 (RCT)，在埃及大学附属教学医院开罗大学 Abou ElReesh 儿童医院进行，旨在评估维生素D3补充剂对小儿肺炎治疗结局的影响。 肺炎病例是从医院的两个普通儿科部门和医院的四个儿科重症监护病房 (PICU) 招募的。

样本量和研究人群 检测维生素 D 组和对照组肺炎平均持续时间 20% 的差异 [5 天与 6 天 (SD 2)]，允许 5% 的 I 类错误和 10 的 II 类错误%，每组 86 人（共 172 人）是最低招募人数。 考虑到 10% 的无反应或失访，以及 25% 的儿童在维生素 D 测试后被诊断为维生素 D 足够或中毒水平（方框 1），根据儿科医院维生素缺乏症的患病率，排除了 25%印度东部，233 是开始的最小数字。

轻度和中度肺炎病例是从医院普通儿科中的两个通过简单随机抽样从总共六个医院科室中抽取的，而重度肺炎病例是从医院的四个 PICU 中招募的。

对 2019 年 9 月 9 日至 2019 年 12 月 15 日期间入院并根据世界卫生组织严重程度标准（方框 2）临床诊断为肺炎的所有 1 个月至 12 岁的儿童（259 名儿童）进行了筛查为纳入标准。 有佝偻病临床症状（2 名儿童）、严重疾病（脑膜炎、心脏或肾脏疾病、麻疹、严重营养不良、内分泌功能障碍、高钙血症、甲状腺功能亢进和疑似肺结核）（4 名儿童）或已知接受过高剂量治疗的儿童在过去 3 个月（3 名儿童）中服用维生素 D 的人被排除在研究之外。 维生素 D 水平充足（52 名儿童）或中毒（7 名儿童）的儿童也被排除在外。

因此，191 名患有维生素 D 水平不足或不足的肺炎的儿童（干预组 93 名，对照组 98 名）及其父母同意参加该研究，完成了基线和结果评估，并继续进行每日临床随访直至出院（好转或死亡）。

方框 1：维生素 D 水平 维生素 D 充足（25(OH)D：≥ 30 ng/mL）、维生素 D 不足（25(OH)D 或有缺乏风险：10-29 ng/mL）和维生素缺乏D（25（OH）D：<10 纳克/毫升）。

方框 2：肺炎的诊断 肺炎：(i) 年龄特异性呼吸急促（如果 <2 个月，>60 ⁄ 分钟；如果 2-11 个月，>50 ⁄ 分钟；如果 12-24 个月，>40）和 (ii) 无喘息（有或没有发烧）。

发热：腋温 >37.50 °C（1 周至 3 个月）或 >38.0 °C（2-23 个月）。

使用标准水银温度计测量腋窝温度 当孩子安静时使用秒表测量呼吸频率两次，持续一整分钟，取平均数。

轻度肺炎：呼吸功略有增加，无低氧血症，可耐受 PO

重症肺炎：呼吸功显着增加，精神状态改变，担心呼吸衰竭败血症，氧饱和度不能维持在 50% 的 FiO2，需要正压通气。 氧饱和度是使用脉搏血氧计测量的，探头放在手指或脚趾上，室内空气。

改善（出院标准）：（满足所有）耐受 PO，无低氧血症（超过 90%），轻度增加或正常呼吸功。

维生素 D 检测 2 毫升静脉血采集到普通试管中，静置 10 分钟凝固，然后以 3000 rpm 离心 5 分钟；将分离的血清样品储存在-20°C直至测定时间，并用于通过ELISA使用（DIAsource 25OH维生素D总ELISA试剂盒，目录号. KAP 1971) 由 DIA source Immunoassays S.A. (Rue Du Bosquet, 2 B-1348 Louvain-la Neuve, Belgium) 提供，根据制造商的说明并基于在微量滴定板上进行的固相酶联免疫吸附测定的原理。 底物周转量通过测量吸光度以比色法确定，吸光度与总 25OH 维生素 D（D2 和 D3）浓度成反比。 绘制校准曲线，样品的总 25OH 维生素 D（D2 和 D3）浓度通过校准曲线的剂量插值确定。

研究组的随机分配 使用 Excel 电子表格中引出的随机数字序列，将儿童单独随机分为干预组或对照组，没有任何限制。 通过使用封闭的深色信封进一步隐藏分配。 一名不是调查组成员的生物统计学家和一名办公室秘书独立进行了随机化、重新包装、测序和分配隐藏。 研究人员和参与者的父母都不知道正在分发药物或安慰剂。 这些代码仅在最终数据分析时才被揭示。

三名研究儿科医生每天对这些儿童进行临床随访，以评估肺炎体征和症状的消退或恶化，直至出院，无论是因康复还是死亡。 Abou ElReesh 儿童医院对住院儿童的常规治疗是免费的，而维生素 D 则由研究人员付费，在研究期间免费提供给干预组的儿童。

基线评估 为每个参与者收集有关社会人口统计学变量（年龄、性别、喂养方式）、肤色、性质和症状持续时间的数据。 检查所有儿童的生命体征（体温、心率、呼吸频率、血压、血氧饱和度）、苍白、紫绀、鼻翼煽动、咕噜声和精神状态。 测量 Pa O2/FIO2，并进行血清肌酐、C 反应蛋白、血小板计数和血清胆红素实验室检查。 对重症肺炎病例进行了 SOFA 评分评估。

干预 2012 年，所有儿童均根据 WHO 儿童肺炎的分类和治疗在卫生机构接受抗生素治疗，在征得父母同意并完成基线评估后，儿童被单次注射 1 ml 100.000 IU 维生素 D3（胆钙化醇），维生素 D3 从 2 ml 小瓶中获得，每个小瓶含有 200,000 IU（Devarol- S- 200.000 I.U. 孟菲斯生产的。 用于制药和化学工业）并在制造商推荐的条件下在干燥、凉爽的环境中储存 1-16 周（取决于招募日期）或安慰剂，即 1 ml 生理盐水注射液。 注射器标有唯一的 ID 号，由盲法医生选择下一个带有随机代码的注射器。 （只有办公室秘书知道随机代码）。

医院随访 每八小时记录一次儿童呼吸频率、胸腔收缩、血氧饱和度、听诊结果、发烧、进食、紫绀和精神状态的记录数据。 孩子连续 2 天无发热和呼吸急促后出院。

结果评估 结果在维生素 D 注射后 7 天进行评估，第一天维生素 D 达到其血液中的最高水平，以保证所有参与者在出院前进行评估。 主要结果变量在血清 25(OH)D 水平、PaO2/FIO2、血清肌酐、C 反应蛋白、血清胆红素水平和血小板计数方面发生了变化。 此外，严重病例的 SOFA 评分。 次要结果包括病例的命运（好转或死亡）以及好转病例入组和出院之间的持续时间。

统计分析：

计算患者维生素 D (25 (OH)2D) 的变化百分比，以通过以下等式量化维生素 D3（胆钙化醇）给药前后的变化水平：

儿科，血液维生素 D 水平 (BVD) %change = [(BVD after - BVD before) ÷ BVD before] × 100 使用 IBM 社会科学软件统计包 (SPSS) 程序 21.0 版输入和分析收集的数据。 数据正态性测试（如 Shapero-Wilk 测试）表明数据不是正态分布的。 这就是为什么在单变量比较中使用 Mann-Whitney 和 Kruskal-Wallis 检验等非参数检验来量化连续变量的关联。 使用定量变量的中位数和四分位数范围总结数据。 Spearman 相关性检验用于检测连续变量之间的关系。 低于 0.05 的 P 值被认为具有统计学意义。 采用多变量 Cox 回归分析模型探讨补充维生素 D3 对肺炎儿童总体生存的独立影响。

鉴于研究随访时间短且干预单一，因此没有停止规则或中期分析。

所有随机分组的儿童均根据意向性治疗纳入分析，除非结果测量缺失 (n = 0) 或报告在 24 小时内恢复或消失 (n = 0)。 比较维生素 D 组和对照组在招募时肺炎发作的恢复时间。 Kaplan-Meier 图和对数秩检验用于比较维生素 D 组和安慰剂组从肺炎指数发作中恢复的时间。