Effetto della supplementazione di vitamina D sul miglioramento dei bambini polmonari

Materie e metodi:

Disegno dello studio e impostazione dello studio L'attuale studio è uno studio randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo (RCT) condotto presso l'ospedale pediatrico Abou ElReesh dell'Università del Cairo, che è un ospedale universitario affiliato all'università in Egitto, per valutare l'effetto della vitamina Integrazione D3 sull'esito del trattamento dei bambini con polmonite. I casi di polmonite sono stati reclutati da due dei dipartimenti pediatrici generali dell'ospedale e dalle quattro unità di terapia intensiva pediatrica (PICU) dell'ospedale.

Dimensione del campione e popolazione dello studio Per rilevare una differenza del 20% nella durata media della polmonite tra il braccio vitamina D e il braccio di controllo [5 giorni contro 6 giorni (SD 2)] consentendo un errore di tipo I del 5% e un errore di tipo II di 10 %, 86 per gruppo (172 in totale) è il numero minimo da reclutare. Dopo aver considerato il 10% per la mancata risposta o la perdita per il follow-up e il 25% per l'esclusione dei bambini con diagnosi di livelli di vitamina D sufficienti o tossici dopo il test della vitamina D (riquadro 1) in base alla prevalenza della carenza vitaminica in un ospedale pediatrico di India orientale, 233 era il numero minimo con cui iniziare.

I casi di polmonite lieve e moderata sono stati reclutati da due dei reparti pediatrici generali dell'ospedale scelti da un semplice campione casuale da un totale di sei dipartimenti ospedalieri, mentre i casi di polmonite grave sono stati reclutati dai quattro PICU dell'ospedale.

Tutti i bambini (259 bambini) di età compresa tra 1 mese e 12 anni ricoverati nei reparti selezionati nel periodo dal 9 settembre 2019 al 15 dicembre 2019 e con diagnosi clinica di polmonite secondo i criteri di gravità dell'Organizzazione Mondiale della Sanità (Box 2) sono stati sottoposti a screening per i criteri di inclusione. Bambini che presentavano segni clinici di rachitismo (2 bambini), malattie gravi (meningite, disturbi cardiaci o renali, morbillo, grave malnutrizione, disfunzione endocrina, ipercalcemia, ipertiroidismo e sospetta tubercolosi) (4 bambini) o erano noti per aver ricevuto alte dosi di dose di vitamina D negli ultimi 3 mesi (3 bambini) sono stati esclusi dallo studio. Sono stati esclusi anche i bambini con livelli di vitamina D sufficienti (52 bambini) o tossici (7 bambini).

Pertanto, 191 bambini (93 nel braccio di intervento e 98 nel braccio di controllo) affetti da polmonite con livello insufficiente o carente di vitamina D e i loro genitori hanno acconsentito a partecipare sono stati arruolati nello studio, hanno completato la valutazione di base e quella dei risultati e hanno continuato il follow-up clinico giornaliero fino alla dimissione (miglioramento o decesso) dall'ospedale.

Riquadro 1: Livello di vitamina D Vitamina D sufficiente (25(OH)D: ≥ 30 ng/mL), Vitamina D insufficiente (25(OH)D o a rischio di carenza: 10-29 ng/mL) e Vitamina carente D(25(OH)D: <10 ng/mL).

Riquadro 2: Diagnosi di polmonite Polmonite: (i) tachipnea età-specifica (>60 ⁄ min se <2 mesi; >50 ⁄ min se 2-11 mesi; >40 se 12-24 mesi) e (ii) assenza di respiro sibilante (con o senza febbre).

Febbre: temperatura ascellare >37,50 _C (età 1 settimana-3 mesi) o >38,0 _C (2-23 mesi).

la temperatura ascellare è stata misurata utilizzando termometri a mercurio standard. La frequenza respiratoria è stata misurata due volte per un minuto intero mentre il bambino è tranquillo utilizzando cronometri che effettuano il conteggio medio.

Polmonite lieve: aumento minimo del lavoro respiratorio, nessuna ipossiemia, in grado di tollerare PO Polmonite moderata: ipossiemia, incapacità di tollerare PO, lavoro respiratorio moderatamente aumentato (grugniti, retrazioni, tachipnea).

Polmonite grave: aumento significativo del lavoro respiratorio, stato mentale alterato, preoccupazione per sepsi da insufficienza respiratoria, incapacità di mantenere la saturazione di ossigeno con Fi02 del 50%, necessità di ventilazione a pressione positiva. La saturazione dell'ossigeno è stata misurata utilizzando un pulsossimetro con una sonda su un dito delle mani o dei piedi, nell'aria della stanza.

Miglioramento (criteri di dimissione): (soddisfa tutti) tollerante PO, non ipossiemico (più del 90%), lieve aumento o lavoro respiratorio normale.

Test della vitamina D Due millilitri di sangue venoso sono stati raccolti su provette lisce, lasciate coagulare per 10 minuti e poi centrifugate a 3000 rpm per 5 minuti; i campioni di siero separati sono stati conservati a -20 °C fino al momento del dosaggio e utilizzati per il rilevamento delle concentrazioni sieriche di 25OH Vitamin D Total (25OH Vitamin D2 e ​​D3) mediante ELISA utilizzando (DIAsource 25OH Vitamin D Total ELISA Kit, catalogo n. KAP 1971) fornito da DIA source Immunoassays S.A. (Rue Du Bosquet, 2 B-1348 Louvain-la Neuve, Belgio), secondo le istruzioni del produttore e basato sul principio del dosaggio immunoenzimatico in fase solida eseguito su piastre di microtitolazione. La quantità di turnover del substrato viene determinata colorimetricamente misurando l'assorbanza, che è inversamente proporzionale alla concentrazione totale di 25OH Vitamina D (D2 e D3). Viene tracciata una curva di calibrazione e le concentrazioni totali di 25OH vitamina D (D2 e D3) dei campioni vengono determinate mediante interpolazione della dose dalla curva di calibrazione.

Assegnazione casuale dei gruppi di studio I bambini sono stati randomizzati individualmente in gruppi di intervento o di controllo utilizzando una sequenza numerica casuale ricavata in un foglio di calcolo Excel senza limitazioni. L'assegnazione è stata ulteriormente nascosta utilizzando buste scure chiuse. Un biostatistico e un segretario d'ufficio che non erano membri del gruppo investigativo hanno eseguito indipendentemente la randomizzazione, il riconfezionamento, il sequenziamento e l'occultamento dell'allocazione. Nessuno del personale dello studio e dei genitori dei partecipanti era a conoscenza della somministrazione del farmaco o del placebo. I codici sono stati rivelati solo al momento dell'analisi finale dei dati.

I bambini sono stati seguiti clinicamente quotidianamente dai tre pediatri dello studio per valutare la risoluzione o il peggioramento dei segni e sintomi di polmonite fino alla dimissione dall'ospedale sia per guarigione che per morte. Il trattamento di routine dei bambini ricoverati è gratuito nell'ospedale pediatrico Abou ElReesh, mentre la vitamina D è stata pagata dai ricercatori per essere somministrata gratuitamente ai bambini nel braccio di intervento durante il periodo di studio.

Valutazione di base Sono stati raccolti dati per ciascun partecipante riguardanti le variabili socio-demografiche (età, sesso, abitudini alimentari), colore della pelle, natura e durata dei sintomi di presentazione. Tutti i bambini sono stati esaminati per segni vitali (temperatura, frequenza cardiaca, frequenza respiratoria, pressione sanguigna, saturazione di ossigeno), pallore, cianosi, riacutizzazione nasale, grugnito e stato mentale. È stata misurata la Pa O2/FIO2 e sono stati eseguiti i test di laboratorio della creatinina sierica, della proteina C reattiva, della conta piastrinica e della bilirubina sierica. Il punteggio SOFA è stato valutato per i casi di polmonite grave.

Intervento Tutti i bambini sono stati trattati con antibiotici secondo la classificazione dell'OMS e il trattamento della polmonite infantile presso le strutture sanitarie 2012, all'arruolamento dopo aver ottenuto il consenso dei genitori e aver completato la valutazione di base, ai bambini è stata somministrata una singola iniezione di un ml su 100.000 UI di vitamina D3 (colecalciferolo), vitamina D3 ottenuta da flaconcini da 2 ml contenenti 200.000 UI ciascuno (Devarol- S- 200.000 I.U. prodotto da Memphis. per le industrie farmaceutiche e chimiche) e conservato nelle condizioni raccomandate dal produttore in un ambiente asciutto e fresco per 1-16 settimane (a seconda della data di assunzione) o placebo che è un'iniezione di soluzione fisiologica da 1 ml. Le siringhe sono state etichettate con un numero ID univoco e fornite dai medici in cieco che hanno scelto la siringa successiva con un codice di randomizzazione. (unica segretaria d'ufficio a conoscenza dei codici di randomizzazione).

Follow-up ospedaliero I bambini sono stati monitorati con la registrazione dei dati ogni otto ore per frequenza respiratoria, aspirazione del torace, saturazione di ossigeno, risultati dell'auscultazione, febbre, alimentazione, cianosi e stato mentale. Il bambino è stato dimesso in assenza di febbre e respiro affannoso per 2 giorni consecutivi.

Valutazione dei risultati I risultati sono stati valutati 7 giorni dopo l'iniezione di vitamina D, il primo giorno in cui la vitamina D raggiunge il suo livello massimo nel sangue per garantire la valutazione di tutti i partecipanti prima della loro dimissione. Le variabili di esito primarie erano modificate nel livello sierico di 25(OH)D, PaO2/FIO2, creatinina sierica, proteina C reattiva, livelli sierici di bilirubina e conta piastrinica. Inoltre, il punteggio SOFA per i casi gravi. Gli esiti secondari includevano il destino dei casi (miglioramento o decesso) e la durata tra l'arruolamento e la dimissione dall'ospedale per i casi migliorati.

Analisi statistica:

La variazione percentuale di vitamina D (25 (OH)2D) dei pazienti è stata calcolata per quantificare i livelli di variazione prima e dopo la somministrazione di vitamina D3 (colecalciferolo) attraverso l'equazione:

Pediatrico, livello di vitamina D nel sangue (BVD) % modifica = [(BVD dopo - BVD prima) ÷ BVD prima] × 100 I dati raccolti sono stati inseriti e analizzati utilizzando il programma Statistical Package for Social Science Software (SPSS), versione 21.0 IBM. I test di normalità dei dati (come il test Shapero-Wilk) hanno rivelato che i dati non sono normalmente distribuiti. Ecco perché i test non parametrici come i test di Mann-Whitney e Kruskal-Wallis sono stati utilizzati nei confronti univariabili per quantificare le associazioni di variabili continue. I dati sono stati riassunti utilizzando la mediana e l'intervallo interquartile per le variabili quantitative. Il test di correlazione di Spearman è stato utilizzato per rilevare la relazione tra variabili continue. I valori P inferiori a 0,05 sono stati considerati statisticamente significativi. È stato condotto un modello di analisi di regressione multivariata di Cox per esplorare l'effetto indipendente dell'integrazione di vitamina D3 sulla sopravvivenza globale dei bambini affetti da polmonite.

Dato il breve periodo di follow-up dello studio e il singolo intervento, non vi era alcuna regola di interruzione o analisi ad interim.

Tutti i bambini randomizzati sono stati inclusi nell'analisi sulla base dell'intenzione di trattare a meno che le misure di esito non mancassero (n = 0) o riferissero di essersi ripresi o persi entro 24 ore (n = 0). Nel frattempo al recupero per l'episodio di polmonite al momento del reclutamento è stato confrontato per il gruppo vitamina D e il gruppo di controllo. I grafici di Kaplan-Meier e i test log-rank sono stati utilizzati per confrontare il tempo di recupero dall'episodio indice di polmonite tra i gruppi vitamina D e placebo.