Влияние добавок витамина D на улучшение состояния детей с легочной болезнью

Предметы и методы:

Дизайн исследования и условия исследования Настоящее исследование представляет собой рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование (РКИ), которое было проведено в детской больнице Абу-Эль-Риш Каирского университета, являющейся университетской клинической больницей в Египте, для оценки эффекта витамина Добавка D3 на исход лечения детей с пневмонией. Случаи пневмонии были набраны из двух общих педиатрических отделений больницы и четырех педиатрических отделений интенсивной терапии (PICU) больницы.

Размер выборки и популяция исследования Выявить 20%-ную разницу в средней продолжительности пневмонии между группой, получавшей витамин D, и контрольной группой [5 дней против 6 дней (SD 2)], допуская ошибку типа I в 5% и ошибку типа II в 10 %, 86 на группу (всего 172) — это минимальное количество, которое необходимо набрать. После допущения 10% случаев отсутствия ответа или потери для последующего наблюдения и 25% исключения детей с диагнозом достаточный или токсичный уровень витамина D после тестирования на витамин D (вставка 1) в соответствии с распространенностью дефицита витамина в педиатрической больнице г. восточная Индия, 233 было минимальным числом для начала.

Случаи пневмонии легкой и средней степени тяжести были отобраны из двух общих педиатрических отделений больницы, выбранных методом простой случайной выборки из шести отделений больницы, в то время как случаи тяжелой пневмонии были отобраны из четырех отделений интенсивной терапии больницы.

Все дети (259 детей) в возрасте от 1 месяца до 12 лет, поступившие в выбранные отделения в период с 9 сентября 2019 г. по 15 декабря 2019 г. и имеющие клинический диагноз пневмонии в соответствии с критериями тяжести Всемирной организации здравоохранения (вставка 2), прошли скрининг. по критериям включения. Дети, имевшие клинические признаки рахита (2 ребенка), тяжелые заболевания (менингит, сердечные или почечные заболевания, корь, тяжелая недостаточность питания, эндокринная дисфункция, гиперкальциемия, гипертиреоз и подозрение на туберкулез) (4 ребенка) или получавшие высокие дозы прием дозы витамина D за последние 3 месяца (3 ребенка) исключали из исследования. Также были исключены дети с достаточным (52 ребенка) или токсичным (7 детей) уровнем витамина D.

Таким образом, 191 ребенок (93 в группе вмешательства и 98 в группе контроля), у которых была пневмония с недостаточным или дефицитным уровнем витамина D, и их родители дали согласие на участие, были включены в исследование, прошли исходную оценку и оценку результатов и продолжили исследование. ежедневное диспансерное наблюдение до выписки (улучшение или смерть) из стационара.

Вставка 1: Уровень витамина D Достаточный уровень витамина D (25(OH)D: ≥ 30 нг/мл), Недостаточный уровень витамина D (25(OH)D или риск дефицита: 10–29 нг/мл) и Дефицит витамина D (25(OH)D: <10 нг/мл).

Вставка 2: Диагностика пневмонии Пневмония: (i) возрастное тахипноэ (> 60 ⁄ мин, если < 2 месяцев; > 50 ⁄ мин, если 2–11 месяцев; > 40, если 12–24 месяца) и (ii) отсутствие хрипов. (с лихорадкой или без).

Лихорадка: Подмышечная температура >37,50°С (возраст от 1 недели до 3 месяцев) или >38,0°С (2-23 месяца).

подмышечную температуру измеряли с помощью стандартных ртутных термометров. Частоту дыхания измеряли дважды в течение одной полной минуты, пока ребенок находится в покое, с помощью секундомеров, взяв средний счет.

Легкая пневмония: минимально повышенная работа дыхания, отсутствие гипоксемии, способность переносить ПО. Умеренная пневмония: гипоксемия, неспособность переносить ПО, умеренно повышенная работа дыхания (хрюканье, втягивание, тахипноэ).

Тяжелая пневмония: значительно повышенная работа дыхания, измененное психическое состояние, беспокойство по поводу сепсиса дыхательной недостаточности, неспособность поддерживать сатурацию кислорода с Fi02 50%, потребность в вентиляции с положительным давлением. Насыщение кислородом измеряли с помощью пульсового оксиметра с датчиком на пальце или пальце ноги, в комнатном воздухе.

Улучшение (критерии выписки): (соответствует всем) переносимое ПО, не гипоксическое (более 90%), умеренное усиление или нормальная работа дыхания.

Тестирование на витамин D Два миллилитра венозной крови собирали в простые пробирки, оставляли на 10 минут для свертывания, а затем центрифугировали при 3000 об/мин в течение 5 минут; разделенные образцы сыворотки хранили при -20 °C до момента проведения анализа и использовали для определения концентрации общего 25OH витамина D в сыворотке (25OH витамина D2 и D3) с помощью ELISA с использованием (DIAsource 25OH Vitamin D Total ELISA Kit, № по каталогу KAP 1971), поставляемый компанией DIA Immunoassays S.A. (Rue Du Bosquet, 2 B-1348 Louvain-la Neuve, Бельгия), в соответствии с инструкциями производителя и на основе твердофазного иммуноферментного анализа, проводимого на микротитрационных планшетах. Количество оборота субстрата определяется колориметрически путем измерения поглощения, которое обратно пропорционально общей концентрации 25OH витамина D (D2 и D3). Строят калибровочную кривую и определяют общие концентрации 25OH витамина D (D2 и D3) в образцах путем интерполяции дозы из калибровочной кривой.

Случайное распределение групп исследования Дети были индивидуально рандомизированы в экспериментальные или контрольные группы с использованием последовательности случайных чисел, полученной в электронной таблице Excel без каких-либо ограничений. Распределение было дополнительно скрыто с помощью закрытых темных конвертов. Биостатистик и секретарь офиса, которые не были членами исследовательской группы, независимо друг от друга выполняли рандомизацию, переупаковку, секвенирование и сокрытие распределения. Никто из исследовательского персонала и родителей участников не знал о выдаче препарата или плацебо. Коды были выявлены только во время окончательного анализа данных.

Три педиатра-исследователя ежедневно наблюдали за детьми клинически, чтобы оценить разрешение или ухудшение признаков и симптомов пневмонии до выписки из больницы, будь то в связи с выздоровлением или смертью. Обычное лечение стационарных детей в детской больнице Abou ElReesh бесплатно, в то время как витамин D был оплачен исследователями для бесплатного предоставления детям в группе вмешательства в течение периода исследования.

Исходная оценка Для каждого участника были собраны данные относительно социально-демографических переменных (возраст, пол, методы кормления), цвета кожи, характера и продолжительности проявления симптомов. У всех детей были обследованы жизненные показатели (температура, частота сердечных сокращений, частота дыхания, артериальное давление, сатурация кислорода), бледность, цианоз, раздувание носа, хрюканье и психический статус. Измеряли Pa O2/FIO2 и проводили лабораторные анализы креатинина сыворотки, С-реактивного белка, количества тромбоцитов и билирубина сыворотки. Шкала SOFA оценивалась для случаев тяжелой пневмонии.

Вмешательство Все дети получали антибиотикотерапию по классификации ВОЗ и лечение детской пневмонии в учреждениях здравоохранения 2012 г., при поступлении после получения согласия родителей и прохождения исходного обследования детям вводили однократно 1 мл 100.000 МЕ витамина D3 (холекальциферол), витамин D3 получают из флаконов по 2 мл, содержащих по 200 000 МЕ (Деварол-С-200.000 МЕ). И.У. производства Мемфис. для фармацевтической и химической промышленности) и хранят в условиях, рекомендованных производителем, в сухом, прохладном месте в течение 1-16 недель (в зависимости от даты набора) или плацебо, представляющее собой 1 мл физиологического раствора для инъекций. Шприцы были помечены уникальным идентификационным номером, и ослепленные врачи выбирали следующий шприц с кодом рандомизации. (только секретарь офиса знает коды рандомизации).

Последующее наблюдение в стационаре Каждые восемь часов за детьми наблюдали с записью данных по частоте дыхания, втяжению грудной клетки, насыщению кислородом, данным аускультации, лихорадке, кормлению, цианозу и психическому статусу. Ребенок выписан при отсутствии лихорадки и учащенного дыхания в течение 2 дней подряд.

Оценка результатов Результаты оценивались через 7 дней после инъекции витамина D, в первый день, когда уровень витамина D достигает своего максимального уровня в крови, чтобы гарантировать оценку всех участников до их выписки. Первичные переменные исхода были изменены в сывороточном уровне 25(OH)D, PaO2/FIO2, сывороточном креатинине, С-реактивном белке, уровне билирубина в сыворотке и количестве тромбоцитов. Кроме того, оценка SOFA для тяжелых случаев. Вторичные результаты включали судьбу случаев (улучшение или смерть) и продолжительность между регистрацией и выпиской из больницы для случаев с улучшением.

Статистический анализ:

Процентное изменение уровня витамина D (25(OH)2D) у пациентов рассчитывали для количественной оценки уровней изменения до и после введения витамина D3 (холекальциферола) по уравнению:

Дети, уровень витамина D в крови (BVD) %изменение = [(BVD после - BVD до) ÷ BVD до] × 100. Собранные данные были введены и проанализированы с использованием программы Statistical Package for Social Science Software (SPSS), версия 21.0 IBM. Тесты нормальности данных (такие как тест Шаперо-Уилка) показали, что данные не распределены нормально. Вот почему непараметрические тесты, такие как тесты Манна-Уитни и Крускала-Уоллиса, использовались в однопараметрических сравнениях для количественной оценки ассоциаций непрерывных переменных. Данные были обобщены с использованием медианы и межквартильного диапазона для количественных переменных. Корреляционный тест Спирмена использовался для выявления связи между непрерывными переменными. Значения P ниже 0,05 считались статистически значимыми. Модель многомерного регрессионного анализа Кокса была проведена для изучения независимого влияния добавок витамина D3 на общую выживаемость детей с пневмонией.

Учитывая короткий период наблюдения за исследованием и единичное вмешательство, не было правила остановки или промежуточных анализов.

Все рандомизированные дети были включены в анализ на основе намерения лечиться, за исключением случаев, когда показатели исхода отсутствовали (n = 0) или сообщалось о выздоровлении или потере здоровья в течение 24 часов (n = 0). При этом время восстановления после эпизода пневмонии при наборе сравнивали для группы, получавшей витамин D, и для контрольной группы. Графики Каплана-Мейера и критерий логарифмического ранга использовались для сравнения времени выздоровления от индексного эпизода пневмонии между группами витамина D и плацебо.