Wpływ suplementacji witaminy D na poprawę stanu dzieci z zapaleniem płuc

Tematy i metody:

Projekt badania i warunki badania Obecne badanie jest randomizowanym, podwójnie zaślepionym badaniem kontrolowanym placebo (RCT), które zostało przeprowadzone w szpitalu dziecięcym Cairo University Abou ElReesh, będącym afiliowanym z uniwersytetem szpitalem klinicznym w Egipcie, w celu oceny wpływu witamin Suplementacja D3 na wyniki leczenia dzieci z zapaleniem płuc. Przypadki zapalenia płuc rekrutowano z dwóch ogólnych szpitalnych oddziałów pediatrycznych i czterech pediatrycznych oddziałów intensywnej terapii (PICU) szpitala.

Wielkość próby i badana populacja Wykrycie 20% różnicy w średnim czasie trwania zapalenia płuc między grupą otrzymującą witaminę D a grupą kontrolną [5 dni vs. 6 dni (SD 2)] przy uwzględnieniu błędu typu I wynoszącego 5% i błędu typu II wynoszącego 10 %, 86 na grupę (łącznie 172) to minimalna liczba do rekrutacji. Po uwzględnieniu 10% przypadków braku odpowiedzi lub utraty podczas obserwacji i 25% wykluczenia dzieci z rozpoznaniem wystarczającego lub toksycznego poziomu witaminy D po badaniu witaminy D (ramka 1) zgodnie z częstością występowania niedoboru witamin w szpitalu pediatrycznym w we wschodnich Indiach, 233 to minimalna liczba na początek.

Przypadki łagodnego i umiarkowanego zapalenia płuc rekrutowano z dwóch ogólnych szpitalnych oddziałów pediatrycznych wybranych przez prostą losową próbę z łącznie sześciu oddziałów szpitalnych, podczas gdy ciężkie przypadki zapalenia płuc rekrutowano z czterech szpitalnych oddziałów intensywnej terapii.

Wszystkie dzieci (259 dzieci) w wieku od 1 miesiąca do 12 lat przyjęte na wybrane oddziały w okresie od 9 września 2019 do 15 grudnia 2019 roku z rozpoznanym klinicznie zapaleniem płuc według kryteriów ciężkości Światowej Organizacji Zdrowia (ramka 2) zostały przebadane dla kryteriów włączenia. Dzieci z klinicznymi objawami krzywicy (2 dzieci), ciężkimi chorobami (zapalenie opon mózgowych, choroby serca lub nerek, odra, ciężkie niedożywienie, zaburzenia endokrynologiczne, hiperkalcemia, nadczynność tarczycy i podejrzenie gruźlicy) (4 dzieci) lub wiadomo, że otrzymywały dawki witaminy D w ciągu ostatnich 3 miesięcy (3 dzieci) zostały wyłączone z badania. Wykluczono również dzieci z wystarczającym (52 ​​dzieci) lub toksycznym (7 dzieci) poziomem witaminy D.

W ten sposób 191 dzieci (93 w ramieniu interwencyjnym i 98 w ramieniu kontrolnym), które miały zapalenie płuc z niedostatecznym lub niedoborowym poziomem witaminy D, a ich rodzice wyrazili zgodę na udział w badaniu, zostało włączonych do badania, ukończyło ocenę wyjściową i końcową oraz kontynuowało codzienna obserwacja kliniczna aż do wypisu (poprawy lub zgonu) ze szpitala.

Ramka 1: Poziom witaminy D Wystarczająca ilość witaminy D (25(OH)D: ≥ 30 ng/ml), Niewystarczająca ilość witaminy D (25(OH)D lub zagrożona niedoborem: 10-29 ng/ml) oraz Niedobór witaminy D D (25(OH)D: <10 ng/ml).

Ramka 2: Rozpoznanie zapalenia płuc Zapalenie płuc: (i) Tachypnoe specyficzne dla wieku (>60⁄ min w wieku poniżej 2 miesięcy; >50⁄ min w wieku od 2 do 11 miesięcy; >40 w wieku od 12 do 24 miesięcy) oraz (ii) brak świszczącego oddechu (z gorączką lub bez).

Gorączka: temperatura pod pachą >37,50°C (wiek 1 tydzień-3 miesiące) lub >38,0°C (2-23 miesiące).

temperaturę pachową mierzono za pomocą standardowych termometrów rtęciowych. Częstość oddechów mierzono dwukrotnie przez jedną pełną minutę, podczas gdy dziecko było spokojne, za pomocą stoperów, zliczając średnią.

Łagodne zapalenie płuc: minimalnie zwiększona praca oddechowa, brak hipoksemii, toleruje PO Umiarkowane zapalenie płuc: hipoksemia, niezdolność do tolerowania PO, umiarkowanie zwiększona praca oddechowa (chrząkanie, cofanie się, przyspieszony oddech).

Ciężkie zapalenie płuc: Znacznie zwiększona praca oddechowa, zmieniony stan psychiczny, obawa niewydolności oddechowej posocznicy, nieutrzymanie saturacji tlenem Fi02 na poziomie 50%, konieczność wentylacji dodatnim ciśnieniem. Nasycenie tlenem mierzono za pomocą pulsoksymetru z sondą na palcu ręki lub stopy, w powietrzu w pomieszczeniu.

Poprawa (kryteria wypisu): (Spełnia wszystkie) tolerancja PO, brak hipoksemii (ponad 90%), łagodny wzrost lub prawidłowa praca oddechowa.

Badanie witaminy D Dwa mililitry krwi żylnej pobrano do zwykłych probówek, pozostawiono na 10 minut do skrzepnięcia, a następnie wirowano przy 3000 obr./min przez 5 minut; oddzielone próbki surowicy przechowywano w temperaturze -20°C do czasu oznaczenia i wykorzystano do oznaczania stężenia 25OH witaminy D Total (25OH witaminy D2 i D3) metodą ELISA przy użyciu zestawu DIAsource 25OH Vitamin D Total ELISA Kit, nr katalogowy KAP 1971) dostarczony przez DIA source Immunoassays S.A. (Rue Du Bosquet, 2 B-1348 Louvain-la Neuve, Belgia), zgodnie z instrukcjami producenta i w oparciu o zasadę testu immunoenzymatycznego w fazie stałej, przeprowadzanego na płytkach do mikromiareczkowania. Wielkość obrotu substratu określa się kolorymetrycznie przez pomiar absorbancji, która jest odwrotnie proporcjonalna do całkowitego stężenia 25OH witaminy D (D2 i D3). Wykreśla się krzywą kalibracji i określa się całkowite stężenia 25OH witaminy D (D2 i D3) w próbkach przez interpolację dawki z krzywej kalibracji.

Losowy przydział grup badawczych Dzieci zostały indywidualnie losowo przydzielone do grup interwencyjnych lub kontrolnych przy użyciu losowej sekwencji liczb wywołanej w arkuszu kalkulacyjnym Excel bez żadnych ograniczeń. Alokacja została dodatkowo ukryta za pomocą zamkniętych ciemnych kopert. Biostatystyk i sekretarz biura, którzy nie byli członkami zespołu badawczego, niezależnie dokonali randomizacji, przepakowania, sekwencjonowania i ukrycia alokacji. Żaden z pracowników badania i rodziców uczestników nie był świadomy wydawania leku lub placebo. Kody zostały ujawnione dopiero podczas końcowej analizy danych.

Dzieci były codziennie obserwowane klinicznie przez trzech pediatrów prowadzących badanie w celu oceny ustąpienia lub pogorszenia objawów przedmiotowych i podmiotowych zapalenia płuc do czasu wypisania ze szpitala, czy to z powodu wyzdrowienia, czy śmierci. Rutynowe leczenie dzieci hospitalizowanych jest bezpłatne w szpitalu dziecięcym Abou ElReesh, podczas gdy witamina D została opłacona przez naukowców, aby była podawana bezpłatnie dzieciom w grupie interwencyjnej w okresie badania.

Ocena stanu wyjściowego Dla każdego uczestnika zebrano dane dotyczące zmiennych społeczno-demograficznych (wiek, płeć, zwyczaje żywieniowe), koloru skóry, charakteru i czasu trwania objawów. Wszystkie dzieci zostały zbadane pod kątem parametrów życiowych (temperatura, częstość akcji serca, częstość oddechów, ciśnienie krwi, nasycenie tlenem), bladość, sinica, zaczerwienienie nosa, chrząknięcie i stan psychiczny. Zmierzono Pa O2/FIO2 oraz wykonano badania laboratoryjne stężenia kreatyniny w surowicy, białka C-reaktywnego, liczby płytek krwi oraz bilirubiny w surowicy. Wynik SOFA oceniano w przypadku ciężkich przypadków zapalenia płuc.

Interwencja Wszystkie dzieci były leczone antybiotykami zgodnie z klasyfikacją WHO i leczenie zapalenia płuc wieku dziecięcego w placówkach służby zdrowia 2012, przy zapisie po uzyskaniu zgody rodziców i zakończeniu oceny wyjściowej dzieciom podano jednorazowo 1 ml roztworu 100 000 j.m. witaminy D3 (cholekalcyferol), witamina D3 uzyskana z 2 ml fiolek zawierających po 200 000 j.m. każda (Devarol- S- 200 000 j.m. wyprodukowany przez Memphisa. dla Przemysłu Farmaceutycznego i Chemicznego) i przechowywany w warunkach zalecanych przez producenta w suchym, chłodnym otoczeniu przez 1-16 tygodni (w zależności od daty rekrutacji) lub placebo, czyli 1 ml roztworu soli fizjologicznej do wstrzykiwań. Strzykawki zostały oznaczone unikalnym numerem identyfikacyjnym i nadane przez zaślepionych lekarzy wybierając kolejną strzykawkę z kodem randomizacji. (jedynie sekretarz biura zna kody randomizacji).

Obserwacja w szpitalu Dzieci monitorowano, rejestrując dane co osiem godzin pod kątem częstości oddechów, wciągania klatki piersiowej, nasycenia tlenem, wyników osłuchiwania, gorączki, karmienia, sinicy i stanu psychicznego. Dziecko wypisano do domu, gdy przez 2 kolejne dni nie było gorączki i szybkiego oddechu.

Ocena wyników Wyniki oceniano 7 dni po wstrzyknięciu witaminy D, pierwszego dnia, w którym witamina D osiąga maksymalne stężenie we krwi, aby zagwarantować ocenę wszystkich uczestników przed ich wypisem. Główne zmienne wyniku zostały zmienione w zakresie poziomu 25(OH)D w surowicy, PaO2/FIO2, kreatyniny w surowicy, białka C-reaktywnego oraz poziomu bilirubiny w surowicy i liczby płytek krwi. Również wynik SOFA dla ciężkich przypadków. Wtórne wyniki obejmowały losy przypadków (poprawa lub śmierć) oraz czas między zapisem a wypisem ze szpitala w przypadku ulepszonych przypadków.

Analiza statystyczna:

Procentową zmianę poziomu witaminy D (25(OH)2D) u pacjentów obliczono w celu ilościowego określenia poziomów zmian przed i po podaniu witaminy D3 (cholekalcyferolu) za pomocą równania:

Pediatria, zmiana procentowa poziomu witaminy D we krwi (BVD) = [(BVD po - BVD przed) ÷ BVD przed] × 100 Zebrane dane zostały wprowadzone i przeanalizowane przy użyciu programu Statistical Package for Social Science Software (SPSS), wersja 21.0 IBM. Testy normalności danych (np. test Shapero-Wilka) wykazały, że dane nie mają rozkładu normalnego. Dlatego testy nieparametryczne, takie jak testy Manna-Whitneya i Kruskala-Wallisa, zostały użyte w porównaniach jednowymiarowych w celu ilościowego określenia powiązań zmiennych ciągłych. Dane podsumowano za pomocą mediany i rozstępu międzykwartylowego dla zmiennych ilościowych. Do wykrycia związku między zmiennymi ciągłymi zastosowano test korelacji Spearmana. Wartości P poniżej 0,05 uznano za istotne statystycznie. Przeprowadzono wieloczynnikowy model analizy regresji Coxa w celu zbadania niezależnego wpływu suplementacji witaminy D3 na całkowite przeżycie dzieci z zapaleniem płuc.

Biorąc pod uwagę krótki okres obserwacji badania i pojedynczą interwencję, nie było reguły zatrzymania ani analiz pośrednich.

Wszystkie dzieci zrandomizowane zostały włączone do analizy na zasadzie zamiaru leczenia, chyba że brakowało miar wyników (n = 0) lub zgłoszono, że wyzdrowiały lub straciły w ciągu 24 godzin (n = 0). Porównano czas do wyzdrowienia w przypadku epizodu zapalenia płuc w grupie otrzymującej witaminę D i grupie kontrolnej. Wykresy Kaplana-Meiera i testy log-rank zostały wykorzystane do porównania czasu do wyzdrowienia z epizodu zapalenia płuc między grupami witaminy D i placebo.