用于残留牙周袋辅助治疗的透明质酸

人群 共有 144 名患者从 6 个大学临床中心（罗马第一大学牙周病学系，意大利罗马；里耶卡大学牙科医学院，克罗地亚里耶卡；萨格勒布大学牙周病学系，萨格勒布，克罗地亚；Jagiellonian 大学牙科学院，波兰克拉科夫；索非亚医科大学牙科学院，保加利亚索非亚；普罗夫迪夫医科大学牙科学院，普罗夫迪夫，保加利亚）。 从患者招募到方案结束的时间延长为 2016 年 1 月至 2018 年 11 月。

样本量的确定考虑了患者水平作为统计单位和探测深度 (PD) 作为主要结果测量。 为了检测组间 PD 的平均差异 1 毫米，标准差为 1 毫米，保持 85% 的功效，显着性水平 (alpha) 为 0.05，退出率为 25%，每组 12 名参与者每个中心都需要。

每个中心的伦理委员会批准了本研究的方案。 该协议遵循赫尔辛基宣言关于临床试验良好行为的伦理原则。 所有患者都被彻底告知治疗细节以及如果错过任何 3 个月的随访预约或总体上表现出不良依从性则被排除在研究之外的可能性。 在口头接受协议的条件后，患者在研究开始前签署知情同意书。 图 1 逐步显示了每位患者遵循的研究方案。

研究设计、随机化、分配隐藏和盲法 本研究计划作为一项为期 2 个月的对照随机多中心三盲临床试验，以比较使用标准非手术机械清创术使用和不使用透明质酸凝胶对残留牙周袋的治疗效果。 治疗和评估的详细描述在以下段落中描述。

在研究开始之前，操作员接受了治疗应用和 PD 测量方面的培训和校准。 对 3 名牙周病患者进行的初步 PD 测量显示，每个操作员和不同操作员之间的类内相关系数≥ 0.75。

本研究使用基于网络的电子在线随机化系统，包括用于试验开始前操作员培训的软件模拟版本。 该系统已获得奥地利卫生与食品安全局 (AGES) 的批准。 系统参数设置为随机块大小为 4，治疗代码选择为随机，每个中心使用 24 个治疗代码，并使用最小化方法。 中心被作为随机化过程的一个因素，每个中心的分配概率为 0,125（8 个中心 x 0,125 = 1.0），因为随机化比率为 1:1，对应于治疗/对照分配比率。

每个操作员都有一个用户名和密码来为每个患者执行随机化过程。 准确的审计跟踪显示每个用户日志条目，包括登录 ID、中心号码、调查员姓名、事件代码、日期和事件发生的时间。 该系统具有试验特定功能（基于角色的访问控制），其中试验协调员可以管理每个用户分配的特定角色以确定用户的访问权限。 对于本研究，研究者的作用是在无法查看试验设计或随机化设计的情况下进行随机化。 完全控制、查看随机化、非盲随机化的访问权限仅授予独立试验协调员。

此外，该系统提供了高度的灵活性和安全性，包括验证每个研究者的个人电子邮件以确保每个研究者亲自执行随机化，设置预定义的随机化限制，每个中心下包括多个用户的可能性，以及有效的每次执行随机化后的电子邮件通知和确认。 系统上的所有交易都被记录下来，并且试验监控器可以随时分析审计线索。

分配隐藏是通过独立的计算机化随机序列过程完成的，该过程只能由独立的试验协调员访问。 研究人员获得在线登录，并被指示仅在完成选定牙齿的基线测量和机械清创后才执行随机化。 为确保这一点，研究人员被要求在完成清创术后在提供的病例报告表上写下确切时间。 发送分配的计算机化时间戳、电子日志用作监视分配隐藏的方法。 此外，将随机化与分层（按中心分层）置换块平行，作为防止了解即将到来的患者分配的第二层。

临床操作员一直处于失明状态，直到随机分配器分配辅助治疗应用的那一刻。 在整个随访过程中，患者一直处于盲态状态。 微生物学评估和结果的统计解释对所进行的处理不知情。

治疗程序 每个中心都配备了相同数量的 HA、Eppendorf 管、刮匙、牙膏、牙刷 ** 和牙缝刷。 指导患者使用改良的 Bass 技术每天使用提供的不含氯己定的牙膏刷牙两次，并每天使用牙缝刷一次。 他们被指示不要使用任何类型的漱口水。

所有患者连续两次就诊均在 48 小时内完成全口清创术。 使用超声波设备进行清创，然后用刮匙对所有大于 4 毫米的囊袋进行清创。 重复超声波处理以确保所有表面清洁，然后进行抛光。

在重新评估时，选择了一颗进入纳入标准的牙齿。 应用局部麻醉剂后，进行牙菌斑去除和牙面抛光，然后试验组局部施用透明质酸凝胶，对照组局部施用麻醉剂。 将安装在含有 HA 的注射器上的钝头应用针头小心地插入袋中，直到感觉到阻力。 进行注射直到残余物开始从口袋中流出。 建议患者在 2 小时内不要饮水或进食。 这种辅助治疗在基线和 3 个月对照时进行。 两组均在 3、6、9 和 12 个月时重复清洁龈上牙齿沉积物和抛光。

统计分析 数值变量报告为中位数 (IQR)，而分类变量报告为频率（百分比）。 McNemar检验用于检验组内时间点之间的比例差异，卡方检验用于检验组间比例差异。 对于数值变量，使用 Kruskal-Wallis 检验评估时间点差异，并使用 Mann-Whitney U 检验和 Wilcoxon 符号秩检验（分别用于不相关和相关测量）进行成对比较。 Holms 校正用于调整多重比较。 所有统计检验均使用 0.05 的显着性水平。 所有分析测试均使用统计软件 R（3.6.0 版）进行。