蚕豆的氨基酸生物利用度 (Leg4Life)

目的是确定健康人体中蚕豆蛋白质的营养质量，特别是氨基酸消化率。 回肠消化率是在餐后用鼻回肠管收集的回肠食糜中测定的。 蚕豆在 15N 中进行了固有标记，以追踪样品中的膳食氮和氨基酸。

道德和监管方面：

该方案已提交给伦理委员会批准，并提交给法国药品和卫生署以获得行政授权。 个人数据管理将符合个人数据保护条例（“2018 年 6 月 20 日第 2018-493 号条例”）。

一顿饭：

这顿饭将包括 250 克煮熟和去皮的蚕豆，以提供 20 克蛋白质。 将实现感官测试以优化膳食的感官特性。 15N 标记豆将在加盐的水中煮沸。 实验当天早上，将蚕豆部分加热。

义工：

该研究将包括八名受试者。 调查人员计划招募大约 16 名志愿者，以适应通常 50% 的辍学率。

实验前一周，志愿者按照适合自身体重的标准饮食控制蛋白质摄入量（1.3g蛋白质/kg体重）。 他们将被要求在一周内食用一到三份蚕豆。

志愿者将于实验前一天上午抵达阿维森尼医院人类营养研究中心。 他们将配备双腔肠管，允许其在肠道中前进 24 小时。 其中一个内腔是不透射线的，用于在肠内灌注不可吸收的标记物（慢标记法）。 另一个内腔专用于流出物的连续吸入，位于灌注部位下方 15 厘米处。 流出物中不可吸收标记物的测量允许确定流出物流速。

在实验当天，将通过射线照相检查管的位置，以验证其在回肠末端的位置。 将在前臂静脉中插入导管以进行血液采样。 不可吸收标记 PEG-4000 (20g/l) 的灌注将从 1ml/min 的流速开始。 将在 30 分钟内收集肠流和回肠基底样本。 将对基础血浆样本进行取样。

然后，在 t=0 时，志愿者将饮用测试餐。 直到 t = 8 小时，肠内容物将通过抽吸连续收集并每 30 分钟汇集一次。 在 4 小时内每 30 分钟采集一次血样，此后每小时采集一次。 每 2 小时收集一次尿液，持续 8 小时。

受试者将在饭后 48 小时内在家中收集粪便样本。 凳子将被送到芬兰。

测量：

在文摘中：

PEG-4000 通过比浊法，通过 EA-IRMS 富集总 N 和 15N，通过 UPLC 测定氨基酸浓度（在 110°C 下酸解 HCl 6N 24 小时后），通过 GC-c-IRMS 富集 15N 氨基酸（在阳离子交换树脂和衍生化）。

在血浆中：

葡萄糖、尿素（比色法）、胰岛素（ELISA）、氨基酸浓度（UPLC）、血浆蛋白、尿素和游离氨基酸中的 15N 富集（EA-IRMS，在阳离子交换树脂上纯化和衍生化后）。

在尿液中：

尿素（比色法）和 15N 尿素（EA-IRMS，在阳离子交换树脂上纯化和衍生化后）。

在凳子上：

微生物DNA。

结果：

蛋白质和氨基酸的实际回肠消化率（消化损失）、餐后脱氨（代谢损失）、餐后净蛋白质利用、微生物群组成。