Аминокислотная биодоступность бобов Фава (Leg4Life)

Цель состоит в том, чтобы определить питательные качества белка из бобов фава у здоровых людей, особенно с точки зрения усвояемости аминокислот. Переваримость подвздошной кишки определяют в подвздошной пищеварительной системе, собранной после приема пищи с помощью назо-подвздошной трубки. Фава-бобы помечены 15N, чтобы отслеживать пищевой азот и аминокислоты в образцах.

Этические и нормативные аспекты:

Протокол был представлен Комитету по этике для одобрения и Французскому агентству лекарственных средств и здравоохранения для административного разрешения. Управление персональными данными будет осуществляться в соответствии с положением о защите персональных данных («Регламент № 2018-493 от 20 июня 2018 г.»).

Еда:

Еда будет состоять из 250 г приготовленных и очищенных фасолевых бобов, чтобы обеспечить 20 г белка. Органолептические тесты будут реализованы для оптимизации органолептических свойств еды. Фасоль с маркировкой 15N будет вариться в воде с добавлением соли. Утром перед экспериментом порция фасоли будет подогрета.

Волонтеры:

В исследование будут включены восемь предметов. Исследователи планируют набрать около 16 добровольцев, чтобы справиться с обычными 50% отсева.

За неделю до эксперимента добровольцы будут придерживаться стандартной диеты, адаптированной к их массе тела, чтобы контролировать потребление белка (1,3 г белка/кг массы тела). Их попросят потреблять от одной до трех порций фавабана в неделю.

Добровольцы прибудут в Исследовательский центр питания человека больницы Авиценна утром накануне дня эксперимента. Они будут оснащены двухпросветной кишечной трубкой, которая будет проходить через кишечный тракт в течение 24 часов. Один из просветов является рентгеноконтрастным и служит для перфузии нерассасывающегося препарата в кишечнике (метод медленного маркера). Другой просвет предназначен для непрерывной аспирации выделений на 15 см ниже места перфузии. Измерение неабсорбируемого маркера в сточных водах позволяет определить скорость потока сточных вод.

В день эксперимента положение трубки будет проверено с помощью рентгенографии, чтобы подтвердить ее расположение в терминальном отделе подвздошной кишки. Катетер будет вставлен в вену предплечья для забора крови. Перфузия неабсорбируемого маркера ПЭГ-4000 (20 г/л) начинается при скорости потока 1 мл/мин. Кишечный поток и базальный образец подвздошной кишки будут собраны в течение 30 минут. Будет взят образец базальной плазмы.

Затем, в t=0, добровольцы выпивают тестовую еду. До t=8 часов кишечное содержимое будет непрерывно собираться путем аспирации и объединяться каждые 30 минут. Кровь будет браться каждые 30 минут в течение 4 часов, а затем каждый час. Моча будет собираться каждые 2 часа в течение 8 часов.

Субъекты будут собирать образцы стула дома в течение 48 часов после еды. Табуреты будут отправлены в Финляндию.

Размеры:

В дайджесте:

ПЭГ-4000 турбидиметрическим методом, общее обогащение N и 15N методом EA-IRMS, концентрации аминокислот методом УЭЖХ (после кислотного гидролиза HCl 6N при 110°C в течение 24 ч), обогащение аминокислот 15N методом GC-c-IRMS (после очистки на катионообменная смола и дериватизация).

В плазме:

Глюкоза, мочевина (колориметрические методы), инсулин (ELISA), концентрации аминокислот (UPLC), обогащение 15N белками плазмы, мочевиной и свободными аминокислотами (EA-IRMS, после очистки на катионообменной смоле и дериватизации).

В моче:

Мочевина (колориметрический метод) и 15N мочевина (EA-IRMS, после очистки на катионообменной смоле и дериватизации).

В табуретках:

Микробная ДНК.

Результаты:

Реальная усвояемость белка и аминокислот в подвздошной кишке (пищеварительные потери), постпрандиальное дезаминирование (метаболические потери), чистое постпрандиальное использование белка, состав микробиоты.