A Fava bab aminosavak biohasznosulása (Leg4Life)

A cél a favababból származó fehérje táplálkozási minőségének meghatározása egészséges emberekben, különös tekintettel az aminosavak emészthetőségére. A csípőbél emészthetőségét étkezés után orrcsontcsonttal gyűjtött ileális emésztésben határozzuk meg. A favababok lényegében 15N-ben vannak jelölve annak érdekében, hogy nyomon kövessék a mintákban lévő étrendi nitrogént és aminosavakat.

Etikai és szabályozási szempontok:

A jegyzőkönyvet jóváhagyásra benyújtották az Etikai Bizottsághoz és adminisztratív engedélyezés céljából a Francia Kábítószer- és Egészségügyi Ügynökséghez. A személyes adatok kezelése a személyes adatok védelméről szóló rendelettel ("2018-493 du 20 juin 2018" rendelet) összhangban történik.

Étkezés:

Az étkezés 250 g főtt és hámozott favababból áll, hogy 20 g fehérjét biztosítson. Érzékszervi vizsgálatokat hajtanak végre az étkezés érzékszervi tulajdonságainak optimalizálása érdekében. A 15 N feliratú babot sós vízben megfőzzük. A kísérlet reggelén a fava bab adagját felmelegítjük.

Önkéntesek:

Nyolc alany vesz majd részt a vizsgálatban. A nyomozók körülbelül 16 önkéntes toborzását tervezik, hogy megfeleljenek a szokásos 50%-os lemorzsolódásnak.

Egy héttel a kísérlet előtt az önkéntesek a testtömegükhöz igazított standard étrendet követik, hogy szabályozzák fehérjebevitelüket (1,3 g fehérje/testtömeg-kg). A héten egy-három adag favabean fogyasztását kérik majd.

Az önkéntesek a kísérlet napját megelőző reggelen érkeznek meg az Avicenne Kórház Humán Táplálkozási Kutatóközpontjába. Dupla lumen bélcsővel lesznek felszerelve, amely 24 órán keresztül haladhat át a bélrendszeren. Az egyik lumen rádión átlátszatlan, és egy nem felszívódó gyártó perfundálására szolgál a bélben (lassú marker módszer). A másik lumen az effluens folyamatos leszívására szolgál, 15 cm-rel a perfúziós hely alatt. A szennyvízben lévő nem felszívódó marker mérése lehetővé teszi a szennyvíz áramlási sebességének meghatározását.

A kísérlet napján a cső helyzetét radiográfiával ellenőrizzük, hogy igazoljuk a helyét a terminális csípőbélben. A vérvételhez katétert helyeznek be az alkar vénájába. A nem felszívódó marker, a PEG-4000 (20 g/l) perfúziója 1 ml/perc áramlási sebességgel indul. A béláramlást és a bazális ileális mintát 30 percen keresztül gyűjtik. Alap plazmamintát vesznek.

Ezután t=0-nál az önkéntesek megiszik a tesztételt. A t = 8 óráig a béltartalom folyamatosan leszívással összegyűjtésre kerül, és 30 percenként összegyűlik. Vérmintát vesznek 30 percenként 4 órán keresztül, majd óránként. A vizeletet 2 óránként gyűjtik 8 órán keresztül.

Az alanyok székletmintát vesznek otthon az étkezést követő 48 órán belül. A székletet Finnországba küldik.

Méretek:

Az emésztőrendszerben:

PEG-4000 turbidimetriás módszerrel, teljes N és 15N dúsítás EA-IRMS-sel, aminosav koncentrációk UPLC-vel (savas hidrolízis után HCl 6N 110 °C-on 24 órán át), 15N aminosav dúsítás GC-c-IRMS-sel (tisztítás után kationcserélő gyanta és származékképzés).

A plazmában:

Glükóz, karbamid (kolorimetriás módszerek), inzulin (ELISA), aminosav koncentrációk (UPLC), 15N dúsítás plazmafehérjében, karbamidban és szabad aminosavakban (EA-IRMS, kationcserélő gyantán végzett tisztítás és származékképzés után).

A vizeletben:

Karbamid (kolorimetriás módszer) és 15 N karbamid (EA-IRMS, kationcserélő gyantán végzett tisztítás és származékképzés után).

A székletben:

Mikrobiális DNS.

Eredmények:

A fehérje és aminosavak valódi ileális emészthetősége (emésztési veszteségek), étkezés utáni dezamináció (anyagcsere veszteségek), nettó étkezés utáni fehérjehasznosítás, mikrobiota összetétel.