Aminosyra biotillgänglighet av Fava Beans (Leg4Life)

Målet är att bestämma näringskvaliteten hos protein från favabean hos friska människor, särskilt när det gäller aminosyrasmältbarhet. Ileal smältbarhet bestäms i ileal digesta uppsamlad postprandialt med en naso-ileal tub. Favabönerna är inbyggt märkta i 15N för att spåra kväve i kosten och aminosyror i proverna.

Etiska och regulatoriska aspekter:

Protokollet överlämnades till den etiska kommittén för godkännande och till den franska myndigheten för droger och hälsa för administrativt godkännande. Personuppgiftshanteringen kommer att ske i enlighet med förordningen om personuppgiftsskydd ( "förordning nr 2018-493 du 20 juni 2018").

Måltid:

Måltiden kommer att bestå av 250 g kokt och skalad favaböna, för att ge 20 g protein. Sensoriska tester kommer att genomföras för att optimera måltidens organoleptiska egenskaper. 15N-märkta bönor kommer att kokas i vatten med salt. På morgonen för experimentet kommer portionen av favaböna att värmas upp.

Volontärer:

Åtta ämnen kommer att ingå i studien. Utredarna planerar att rekrytera cirka 16 frivilliga för att ta emot de vanliga 50 % avhoppen.

En vecka före experimentet kommer de frivilliga att följa en standarddiet anpassad till deras kroppsvikt för att kontrollera deras proteinintag (1,3 g protein/kg kroppsvikt). De kommer att bli ombedda att konsumera en till 3 portioner favaböna i veckan.

Volontärerna kommer att anlända till Human Nutrition Research Center på Avicenne Hospital på morgonen före dagen för experimentet. De kommer att vara utrustade med en tarmkanal med dubbel lumen som kommer att tillåtas gå genom tarmkanalen i 24 timmar. En av lumen är radioopak och tjänar till att genomsyra en icke-absorberbar tillverkare i tarmen (långsam markörmetoden). Den andra lumen är dedikerad till den kontinuerliga aspirationen av avloppsvattnet, 15 cm under perfusionsstället. Mätningen av den icke-absorberbara markören i avloppsvattnet tillåter bestämning av avloppsflödet.

På dagen för experimentet kommer rörets position att kontrolleras med röntgen för att verifiera dess placering vid den terminala ileum. En kateter kommer att föras in i underarmsvenen för blodprovstagning. Perfusionen av den icke-absorberbara markören, PEG-4000 (20g/l), startar med en flödeshastighet på 1ml/min. Tarmflödet och det basala ileala provet kommer att samlas in under 30 min. Basalt plasmaprov kommer att tas.

Sedan, vid t=0, kommer frivilliga att dricka testmåltiden. Fram till t=8h kommer tarminnehållet att kontinuerligt samlas in genom aspiration och poolas var 30:e minut. Blodprover tas var 30:e minut under 4 timmar och därefter varje timme. Urinen kommer att samlas upp varannan timme i 8 timmar.

Försökspersonerna kommer att samla avföringsprover hemma under 48 timmar efter måltiden. Pallar kommer att skickas till Finland.

Mått:

I matsmältningen:

PEG-4000 med turbidimetrisk metod, total N och 15N anrikning med EA-IRMS, aminosyrakoncentrationer med UPLC (efter syrahydrolys HCl 6N vid 110°C i 24 timmar), 15N aminosyraanrikning med GC-c-IRMS (efter rening på katjonbytarharts och derivatisering).

I plasman:

Glukos, urea (kolorimetriska metoder), insulin (ELISA), aminosyrakoncentrationer (UPLC), 15N anrikning av plasmaprotein, urea och fria aminosyror (EA-IRMS, efter rening på katjonbytarharts och derivatisering).

I urinen:

Urea (kolorimetrisk metod) och 15N urea (EA-IRMS, efter rening på katjonbytarharts och derivatisering).

I avföringen:

Mikrobiellt DNA.

Resultat:

Verklig ileal smältbarhet av protein och aminosyror (matsmältningsförluster), postprandial deaminering (metaboliska förluster), netto postprandial proteinanvändning, mikrobiotasammansättning.