Fava-papujen aminohappojen biologinen hyötyosuus (Leg4Life)

Tavoitteena on määrittää favabean-proteiinin ravintoarvo terveillä ihmisillä, erityisesti aminohappojen sulavuuden kannalta. Sykkyräsuolen sulavuus määritetään sykkyräsuolen ruuansulatuksessa, joka on kerätty aterian jälkeen nenä-ileaaliputkella. Favapavut on leimattu luonnostaan ​​15N:llä, jotta voidaan seurata näytteiden ravinnon typpeä ja aminohappoja.

Eettiset ja sääntelylliset näkökohdat:

Pöytäkirja toimitettiin eettiselle komitealle hyväksyttäväksi ja Ranskan lääke- ja terveysvirastolle hallinnollista lupaa varten. Henkilötietoja käsitellään henkilötietosuoja-asetuksen ("asetus nro 2018-493 du 20 juin 2018") mukaisesti.

Ateria:

Ateria sisältää 250 g keitettyä ja kuorittua favapapua, jolloin saadaan 20 g proteiinia. Aistinvaraiset testit toteutetaan aterian organoleptisten ominaisuuksien optimoimiseksi. 15N-merkitty pavut keitetään vedessä, jossa on suolaa. Kokeiluaamuna favapavun annos lämmitetään.

Vapaaehtoiset:

Tutkimukseen otetaan mukaan kahdeksan kohdetta. Tutkijat aikovat värvätä noin 16 vapaaehtoista vastaamaan tavallisiin 50 %:n keskeyttäneisiin.

Viikkoa ennen koetta vapaaehtoiset noudattavat normaalia ruokavaliota, joka on mukautettu heidän ruumiinpainoinsa proteiininsaannin hallitsemiseksi (1,3 g proteiinia/kg ruumiinpainoa). Heitä pyydetään nauttimaan yhdestä kolmeen annosta favabean-papua viikossa.

Vapaaehtoiset saapuvat Avicenne sairaalan ravitsemuskeskukseen koepäivää edeltävänä aamuna. Ne varustetaan kaksoisonteloputkella, jonka annetaan kulkea suolistossa 24 tunnin ajan. Yksi onteloista on läpikuultamaton, ja se toimii imeytymättömän valmistajan perfusoimiseksi suolistossa (hidas merkkimenetelmä). Toinen ontelo on omistettu jatkuvaan jätevesien imemiseen 15 cm perfuusiokohdan alapuolella. Jätevesien imeytymättömän merkkiaineen mittaus mahdollistaa jäteveden virtausnopeuden määrittämisen.

Koepäivänä putken asento tarkistetaan radiografialla sen sijainnin varmistamiseksi sykkyräsuolen päässä. Katetri asetetaan kyynärvarren laskimoon verinäytteitä varten. Imeytymättömän markkerin PEG-4000 (20 g/l) perfuusio alkaa virtausnopeudella 1 ml/min. Suolen virtaus ja sykkyräsuolen tyvinäyte kerätään 30 minuutin ajan. Perusplasmanäyte otetaan näyte.

Sitten, t = 0, vapaaehtoiset juovat testiaterian. Kunnes t = 8 tuntia, suoliston sisältöä kerätään jatkuvasti imemällä ja yhdistetään 30 minuutin välein. Verinäytteet otetaan 30 minuutin välein 4 tunnin ajan ja sen jälkeen tunnin välein. Virtsa kerätään 2 tunnin välein 8 tunnin ajan.

Koehenkilöt keräävät ulostenäytteet kotona 48 tunnin aikana aterian jälkeen. Jakkarat lähetetään Suomeen.

Mitat:

Ruoansulatuksessa:

PEG-4000 turbidimetrisellä menetelmällä, kokonais-N- ja 15N-rikastus EA-IRMS:llä, aminohappopitoisuudet UPLC:llä (happohydrolyysin jälkeen HCl 6N 110 °C:ssa 24 tuntia), 15 N aminohapporikastus GC-c-IRMS:llä (puhdistuksen jälkeen kationinvaihtohartsi ja derivatisointi).

Plasmassa:

Glukoosi, urea (kolorimetriset menetelmät), insuliini (ELISA), aminohappopitoisuudet (UPLC), 15N rikastus plasman proteiineihin, ureaan ja vapaisiin aminohappoihin (EA-IRMS, kationinvaihtohartsilla puhdistuksen ja derivatisoinnin jälkeen).

Virtsassa:

Urea (kolorimetrinen menetelmä) ja 15 N urea (EA-IRMS, kationinvaihtohartsilla puhdistuksen ja derivatisoinnin jälkeen).

Ulosteissa:

Mikrobi-DNA.

Tulokset:

Proteiinin ja aminohappojen todellinen ileaalinen sulavuus (ruoansulatushäviöt), aterian jälkeinen deaminaatio (aineenvaihduntahäviöt), aterian jälkeinen proteiinin nettokäyttö, mikrobiston koostumus.