Aminozuur biologische beschikbaarheid van tuinbonen (Leg4Life)

Het doel is om de voedingskwaliteit van eiwitten uit tuinbonen bij gezonde mensen te bepalen, vooral wat betreft de verteerbaarheid van aminozuren. Ileale verteerbaarheid wordt bepaald in ileale digesta die postprandiaal is verzameld met een neus-ileale sonde. De tuinbonen zijn intrinsiek gelabeld in 15N om stikstof en aminozuren in de monsters in de voeding te volgen.

Ethische en regelgevende aspecten:

Het protocol werd ter goedkeuring voorgelegd aan de Ethische Commissie en voor administratieve goedkeuring aan het Franse Agentschap voor Geneesmiddelen en Gezondheid. Het beheer van persoonsgegevens zal in overeenstemming zijn met de verordening betreffende de bescherming van persoonsgegevens ("verordening nr. 2018-493 van 20 juni 2018").

Maaltijd:

De maaltijd zal bestaan ​​uit 250 g gekookte en gepelde tuinbonen, om 20 g eiwit te leveren. Er zullen sensorische testen worden uitgevoerd om de organoleptische eigenschappen van de maaltijd te optimaliseren. 15N gelabelde boon wordt gekookt in water met zout. Op de ochtend van het experiment wordt de portie tuinboon opgewarmd.

Vrijwilligers:

Acht proefpersonen zullen in het onderzoek worden opgenomen. De onderzoekers zijn van plan ongeveer 16 vrijwilligers te rekruteren om de gebruikelijke 50% uitvallers op te vangen.

Een week voor het experiment volgen de vrijwilligers een standaarddieet aangepast aan hun lichaamsgewicht om hun eiwitinname onder controle te houden (1,3 g eiwit/kg lichaamsgewicht). Ze zullen worden gevraagd om één tot drie porties tuinbonen per week te consumeren.

De vrijwilligers arriveren op de ochtend voor de dag van het experiment bij het Human Nutrition Research Centre van het Avicenne Hospital. Ze zullen worden uitgerust met een darmslang met dubbel lumen die gedurende 24 uur door het darmkanaal kan gaan. Een van de lumen is radio-opaak en dient om een ​​niet-absorbeerbare maker in de darm te perfuseren (slow marker-methode). Het andere lumen is bestemd voor de continue aspiratie van de effluenten, 15 cm onder de perfusieplaats. De meting van de niet-absorbeerbare marker in de effluenten maakt de bepaling van het effluentdebiet mogelijk.

Op de dag van het experiment wordt de positie van de buis gecontroleerd door middel van radiografie om de locatie in het terminale ileum te verifiëren. Er wordt een katheter in de ader van de onderarm ingebracht voor bloedafname. De perfusie van de niet-absorbeerbare marker, PEG-4000 (20 g/l), begint met een stroomsnelheid van 1 ml/min. De darmstroom en het basale ileummonster worden gedurende 30 minuten verzameld. Basaal plasmamonster zal worden bemonsterd.

Vervolgens drinken de vrijwilligers op t=0 de testmaaltijd. Tot t=8h wordt de darminhoud continu verzameld door aspiratie en om de 30 minuten samengevoegd. Er wordt elke 30 minuten bloed afgenomen gedurende 4 uur en daarna elk uur. De urine wordt gedurende 8 uur om de 2 uur verzameld.

De proefpersonen nemen gedurende 48 uur na de maaltijd thuis ontlastingsmonsters. Krukken worden naar Finland verzonden.

Maten:

In de samenvatting:

PEG-4000 door turbidimetrische methode, totale N- en 15N-verrijking door EA-IRMS, aminozuurconcentraties door UPLC (na zure hydrolyse HCl 6N bij 110°C gedurende 24 uur), 15N aminozuurverrijking door GC-c-IRMS (na zuivering op kationenuitwisselingshars en derivatisering).

In het plasma:

Glucose, ureum (colorimetrische methoden), insuline (ELISA), aminozuurconcentraties (UPLC), 15N-verrijking in plasma-eiwitten, ureum en vrije aminozuren (EA-IRMS, na zuivering op kationenuitwisselingshars en derivatisering).

In de urine:

Ureum (colorimetrische methode) en 15N ureum (EA-IRMS, na zuivering op kationenuitwisselingshars en derivatisering).

In de ontlasting:

Microbiële DNA.

Uitkomsten:

Echte ileale verteerbaarheid van eiwitten en aminozuren (verteringsverliezen), postprandiale deaminatie (metabole verliezen), netto postprandiaal eiwitgebruik, microbiota-samenstelling.