Aminosyre biotilgængelighed af Fava bønner (Leg4Life)

Målet er at bestemme den ernæringsmæssige kvalitet af protein fra favabean hos raske mennesker, især hvad angår aminosyrefordøjelighed. Ileal fordøjelighed bestemmes i ileal digesta opsamlet postprandialt med et naso-ileal rør. Favabeans er iboende mærket i 15N for at spore diætisk nitrogen og aminosyrer i prøverne.

Etiske og regulatoriske aspekter:

Protokollen blev forelagt for den etiske komité til godkendelse og til det franske agentur for narkotika og sundhed for administrativ godkendelse. Håndteringen af ​​personoplysninger vil være i overensstemmelse med forordningen om beskyttelse af personoplysninger ("forordning nr. 2018-493 du 20. juni 2018").

Måltid:

Måltidet vil bestå af 250 g kogte og skrællede favabønner, for at give 20 g protein. Sensoriske tests vil blive realiseret for at optimere måltidets organoleptiske egenskaber. 15N mærket bønne vil blive kogt i vand med salt. Om morgenen for eksperimentet vil portionen af ​​favabønne blive varmet op.

Frivillige:

Otte emner vil blive inkluderet i undersøgelsen. Efterforskerne planlægger at rekruttere omkring 16 frivillige til at imødekomme de sædvanlige 50 % frafald.

En uge før forsøget vil de frivillige følge en standarddiæt tilpasset deres kropsvægt for at kontrollere deres proteinindtag (1,3 g protein/kg kropsvægt). De vil blive bedt om at indtage en til 3 portioner favabean om ugen.

De frivillige vil ankomme til Human Nutrition Research Center på Avicenne Hospital om morgenen før dagen for eksperimentet. De vil blive udstyret med et dobbelt lumen tarmrør, der får lov til at bevæge sig gennem tarmkanalen i 24 timer. Et af lumenerne er radiougennemsigtigt og tjener til at perfundere en ikke-absorberbar maker i tarmen (langsom markørmetode). Det andet lumen er dedikeret til den kontinuerlige aspiration af spildevandet, 15 cm under perfusionsstedet. Målingen af ​​den ikke-absorberbare markør i spildevandet tillader bestemmelse af spildevandsstrømningshastigheden.

På dagen for forsøget vil rørets position blive kontrolleret ved radiografi for at verificere dets placering ved den terminale ileum. Et kateter vil blive indsat i underarmsvenen til blodprøvetagning. Perfusionen af ​​den ikke-absorberbare markør, PEG-4000 (20g/l), starter ved en flowhastighed på 1ml/min. Tarmstrømmen og den basale ileale prøve vil blive opsamlet i løbet af 30 min. Basal plasmaprøve vil blive udtaget.

Derefter, ved t=0, vil de frivillige drikke testmåltidet. Indtil t=8h vil tarmindholdet løbende blive opsamlet ved aspiration og samlet hvert 30. minut. Der tages blodprøver hvert 30. minut i løbet af 4 timer og derefter hver time. Urinen vil blive opsamlet hver anden time i 8 timer.

Forsøgspersoner vil indsamle afføringsprøver hjemme i løbet af 48 timer efter måltidet. Taburet sendes til Finland.

Mål:

I fordøjelsen:

PEG-4000 ved turbidimetrisk metode, total N og 15N berigelse med EA-IRMS, aminosyrekoncentrationer ved UPLC (efter syrehydrolyse HCl 6N ved 110°C i 24 timer), 15N aminosyreberigelse med GC-c-IRMS (efter oprensning på kationbytterharpiks og derivatisering).

I plasma:

Glucose, urinstof (kolorimetriske metoder), insulin (ELISA), aminosyrekoncentrationer (UPLC), 15N berigelse i plasmaprotein, urinstof og frie aminosyrer (EA-IRMS, efter oprensning på kationbytterharpiks og derivatisering).

I urinen:

Urinstof (kolorimetrisk metode) og 15N urinstof (EA-IRMS, efter oprensning på kationbytterharpiks og derivatisering).

I afføringen:

Mikrobielt DNA.

Resultater:

Reel ileal fordøjelighed af protein og aminosyrer (fordøjelsestab), postprandial deaminering (metaboliske tab), netto postprandial proteinudnyttelse, mikrobiotasammensætning.