Aminosyre biotilgjengelighet av Fava bønner (Leg4Life)

Målet er å bestemme den ernæringsmessige kvaliteten til protein fra favabean hos friske mennesker, spesielt når det gjelder aminosyrefordøyelighet. Ileal fordøyelighet bestemmes i ileal digesta oppsamlet postprandialt med en naso-ileal tube. Favabønnene er iboende merket i 15N for å spore diettnitrogen og aminosyrer i prøvene.

Etiske og regulatoriske aspekter:

Protokollen ble sendt til den etiske komité for godkjenning og til det franske byrået for narkotika og helse for administrativ godkjenning. Håndteringen av personopplysninger vil være i samsvar med forskriften om beskyttelse av personopplysninger ("forordning nr. 2018-493 du 20. juni 2018").

Måltid:

Måltidet vil bestå av 250 g kokt og skrellet favabønner, for å gi 20 g protein. Sensoriske tester vil bli realisert for å optimalisere de organoleptiske egenskapene til måltidet. 15N merket bønne vil bli kokt i vann med salt. På morgenen for eksperimentet vil porsjonen av favabønne bli varmet opp.

Frivillige:

Åtte emner vil bli inkludert i studien. Etterforskerne planlegger å rekruttere rundt 16 frivillige for å imøtekomme de vanlige 50 % frafallene.

En uke før forsøket vil de frivillige følge en standard diett tilpasset kroppsvekten for å kontrollere proteininntaket (1,3 g protein/kg kroppsvekt). De vil bli bedt om å konsumere en til 3 porsjoner favabean i uken.

De frivillige vil ankomme Human Nutrition Research Center ved Avicenne Hospital om morgenen før dagen for eksperimentet. De vil være utstyrt med et tarmrør med dobbel lumen som får bevege seg gjennom tarmkanalen i 24 timer. En av lumen er radiougjennomsiktig og tjener til å perfuse en ikke-absorberbar maker i tarmen (langsom markørmetode). Det andre lumenet er dedikert til kontinuerlig aspirasjon av avløpene, 15 cm under perfusjonsstedet. Målingen av den ikke-absorberbare markøren i avløpet gjør det mulig å bestemme strømningshastigheten for avløpet.

På eksperimentdagen vil posisjonen til røret bli kontrollert ved hjelp av radiografi for å bekrefte plasseringen ved terminal ileum. Et kateter vil bli satt inn i underarmsvenen for blodprøvetaking. Perfusjonen av den ikke-absorberbare markøren, PEG-4000 (20g/l), starter med en strømningshastighet på 1ml/min. Tarmstrømmen og den basale ileale prøven vil bli samlet i løpet av 30 min. Basal plasmaprøve vil bli tatt.

Deretter, ved t=0, vil de frivillige drikke testmåltidet. Inntil t=8t vil tarminnholdet kontinuerlig samles opp ved aspirasjon og samles hvert 30. minutt. Blodprøver vil bli tatt hvert 30. minutt i løpet av 4 timer og deretter hver time. Urinen vil bli samlet hver 2. time i 8 timer.

Forsøkspersonene vil samle avføringsprøver hjemme i løpet av 48 timer etter måltidet. Krakker vil bli sendt til Finland.

Målinger:

I fordøyelsen:

PEG-4000 ved turbidimetrisk metode, total N og 15N anrikning ved EA-IRMS, aminosyrekonsentrasjoner ved UPLC (etter syrehydrolyse HCl 6N ved 110°C i 24 timer), 15N aminosyreanriking med GC-c-IRMS (etter rensing på kationbytterharpiks og derivatisering).

I plasma:

Glukose, urea (kolorimetriske metoder), insulin (ELISA), aminosyrekonsentrasjoner (UPLC), 15N anrikning i plasmaprotein, urea og frie aminosyrer (EA-IRMS, etter rensing på kationbytterharpiks og derivatisering).

I urinen:

Urea (kolorimetrisk metode) og 15N urea (EA-IRMS, etter rensing på kationbytterharpiks og derivatisering).

I avføringen:

Mikrobielt DNA.

Utfall:

Virkelig ileal fordøyelighet av protein og aminosyrer (tap fordøyelse), postprandial deaminering (metabolske tap), netto postprandial proteinutnyttelse, mikrobiotasammensetning.