商业 DHA 补充剂

研究人员根据研究人员机构审查委员会规定 (HRPO #10-417) 批准的方案，从低风险助产诊所招募了 73 名妊娠晚期的孕妇。 诊所的所有妇女都被提供参与，并为那些同意的人在 34-36 周孕龄进行登记。 排除标准包括先兆子痫、妊娠糖尿病或妊娠前糖尿病、长期服用药物和其他妊娠并发症。 母亲数据包括年龄、妊娠、胎次、胎龄、种族、分娩时 BMI 和分娩方式均按照健康保险携带和责任法案指南收集。 在审查分娩记录后收集新生儿数据，包括性别、出生体重、身高、头围和产妇分娩特征。

受试者同意随机分组，每天口服 275 毫克鱼油基 Promise DHA（Biotegrity；格兰伯里，德克萨斯州），或每天口服 200 毫克海藻基 Expecta DHA（美赞臣；埃文斯维尔，印第安纳州），或饮食习惯如常。 随机分配隐藏在不透明的信封中，并在登记时公开。 保留日历以记录补充剂的使用，未使用的补充剂在入院和分娩时上交。 进行药丸计数以验证日历的准确性。

样本量考虑因素：研究人员的主要结果指标是母体血清和新生儿脐带血中的 DHA 水平。 要检测 DHA 比例增加 15%，每组需要 19 个样本。 这项研究是一项试点调查，旨在确定在研究人员群体中是否可以进行更大规模的补充研究。

血样采集 在入组和随机化时从每位参与者采集静脉血样。 母体血液从肘前窝抽取到含有 EDTA 的试管中并储存在 -4 摄氏度。第二个母体样本在分娩时以类似的方式取回。 新生儿样本在分娩时，脐带夹紧后同样采集。 在收集后的 72 小时内，确定未溶血的母体和新生儿样本并在临床离心机中离心 5 分钟，然后提取血浆部分并在 -78 摄氏度下储存在 2 毫升小瓶中，直到进行脂肪酸分析。

脂肪酸分析：

允许样品在室温下解冻，并根据 Folch 等人 (1957) 的方法使用氯仿/甲醇（2:1，v/v）进行脂质提取。 提取的脂质残留物在 45oC 氮气流下干燥后称重。 通过用氯仿：甲醇（2:1，v/v）提取 1 mL 血清等分试样获得的总脂质部分，通过硅酸柱层析法 (26) 分离血清的总磷脂成分。 使用甲醇中的 0.5 N NaOH 和甲醇中的 14% (w/v) 三氟化硼 (27)，将脂肪酸进行酯交换以生成甲酯。 在甲基化之前添加十一碳烯酸（Nu-Check Prep，Elysian，MN），并用作内标。

使用配备自动进样器、分流/不分流毛细管进样系统和火焰离子化检测器的气相色谱仪（6890N，安捷伦科技公司，Sunnyvale，CA）对脂肪酸甲酯进行定量，如别处所述 (28)()。 使用 Loor 和 Herbein (28) 描述的定制脂肪酸混合物，并使用纯甲酯标准品制成，包括 AA 和 DHA（Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA）识别峰并确定与 Chem DataStation（Agilent Technologies，Sunnyvale，CA）集成的响应因子。