Kommercielt DHA-tillæg

Efterforskerne rekrutterede 73 gravide kvinder i slutningen af ​​tredje trimester fra en lavrisiko-jordemoderklinik i overensstemmelse med den protokol, der er godkendt af efterforskernes institutionelle revisionsnævns regulativer (HRPO #10-417). Alle kvinder i klinikken fik tilbudt deltagelse, og indskrivning blev foretaget ved 34-36 ugers svangerskabsalder for dem, der var enige. Eksklusionskriterier inkluderede præeklampsi, svangerskabsdiabetes eller præ-gestational diabetes, kronisk brug af medicin og andre medicinske komplikationer af graviditeten. Moderdata, herunder alder, graviditet, paritet, svangerskabsalder, etnicitet, BMI ved fødslen og fødslen blev indsamlet i overensstemmelse med retningslinjerne fra Health Insurance Portability and Accountability Act. Neonatale data, herunder køn, fødselsvægt, højde og hovedomkreds og fødslens karakteristika blev indsamlet efter gennemgang af fødselsjournalen.

Forsøgspersoner gav samtykke til randomisering til en gruppe, der modtog en fiskeoliebaseret 275 mg Promise DHA (Biotegrity; Granbury, TX) gennem munden hver dag, eller en algebaseret 200 mg Expecta DHA (Mead Johnson; Evansville, IN) gennem munden hver dag eller diæt. vaner som normalt. Randomiseringsopgaver blev skjult i uigennemsigtige kuverter og afsløret på tidspunktet for tilmeldingen. Kalendere blev ført for at dokumentere kosttilskudsbrug, og ubrugte kosttilskud blev afleveret på tidspunktet for indlæggelse til fødsel og fødsel. Pilletællinger blev udført for at verificere nøjagtigheden af ​​kalendere.

Prøvestørrelsesovervejelser: Undersøgernes primære resultatmål var DHA-niveau i moderens serum og neonatalt navlestrengsblod. For at detektere en stigning på 15 % i DHA-andele ville det kræve en prøvestørrelse på 19 i hver gruppe. Denne undersøgelse er en pilotundersøgelse, designet til at afgøre, om en større tilskudsundersøgelse ville være mulig i efterforskernes population.

Indsamling af blodprøver En venøs blodprøve blev indsamlet fra hver deltager på tidspunktet for tilmelding og randomisering. Moderblod blev udtaget fra den antecubitale fossa i rør indeholdende EDTA og opbevaret ved -4 grader C. En anden moderprøve blev udtaget på tidspunktet for indlæggelse for fødsel på en lignende måde. Neonatale prøver blev på lignende måde indsamlet på leveringstidspunktet, lige efter snorklemning. Inden for 72 timer efter indsamling blev ikke-hæmolyserede maternelle og neonatale prøver identificeret og centrifugeret i 5 minutter i en klinisk centrifuge, og plasmaportionen blev ekstraheret og opbevaret i 2 ml hætteglas ved -78 grader C, indtil fedtsyreanalyse blev udført.

Fedtsyreanalyser:

Prøver fik lov til at optø ved stuetemperatur, og lipidekstraktion blev udført under anvendelse af chloroform/methanol (2:1, v/v) ifølge metoden ifølge Folch et al (1957). Den ekstraherede lipidrest blev vejet efter tørring ved 45oC under en strøm af nitrogen. Den samlede phospholipidkomponent i serum blev isoleret ved kiselsyresøjlekromatografi (26) af den samlede lipidfraktion opnået ved at ekstrahere en 1 ml alikvot af serum med chloroform:methanol (2:1,v/v). Fedtsyrer blev transesterificeret for at danne methylestere ved anvendelse af 0,5 N NaOH i methanol og 14 % (vægt/volumen) bortrifluorid i methanol (27). Undecensyre (Nu-Check Prep, Elysian, MN) blev tilsat før methylering og tjente som en intern standard.

Fedtsyremethylestere blev kvantificeret ved hjælp af en gaskromatograf (6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA) udstyret med en autoinjektor, et split/splitless kapillært injektionssystem og en flammeioniseringsdetektor som beskrevet andetsteds(28)(). En tilpasset fedtsyreblanding beskrevet af Loor og Herbein (28) og fremstillet med rene methylesterstandarder, inklusive AA og DHA, (Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA) blev brugt at identificere toppe og bestemme responsfaktorer for integration med en Chem DataStation (Agilent Technologies, Sunnyvale, CA).