상업적 DHA 보충제

조사관은 조사관 기관 검토 위원회 규정(HRPO #10-417)에서 승인한 프로토콜에 따라 저위험 산파 클리닉에서 3분기 후반에 73명의 임산부를 모집했습니다. 클리닉의 모든 여성에게 참여 제안을 했으며, 동의한 여성에 대해 임신 34-36주에 등록을 수행했습니다. 제외 기준에는 자간전증, 임신성 당뇨병 또는 임신 전 당뇨병, 약물의 만성 사용 및 기타 임신의 의학적 합병증이 포함됩니다. 건강 보험 이동성 및 책임법(Health Insurance Portability and Accountability Act) 지침에 따라 연령, 중력, 산모, 재태 연령, 민족, 분만 시 BMI 및 분만 방식을 포함한 산모 데이터를 수집했습니다. 성별, 출생체중, 키, 머리둘레, 산모의 분만특성 등 신생아자료는 분만기록을 검토한 후 수집하였다.

피험자는 매일 입으로 어유 기반 275mg Promise DHA(Biotegrity; Granbury, TX) 또는 조류 기반 200mg Expecta DHA(Mead Johnson; Evansville, IN)를 매일 입으로 받거나 식이요법을 받는 그룹으로 무작위 배정하는 데 동의했습니다. 평소와 같은 습관. 무작위 할당은 불투명한 봉투에 숨겨져 등록 시 공개되었습니다. 보충제 사용을 문서화하기 위해 달력을 보관하고 사용하지 않은 보충제는 진통 및 출산 시 제출했습니다. 달력의 정확성을 확인하기 위해 알약 수를 세었습니다.

샘플 크기 고려 사항: 조사관의 주요 결과 측정은 산모 혈청 및 신생아 제대혈의 DHA 수준이었습니다. DHA 비율의 15% 증가를 감지하려면 각 그룹에서 19명의 샘플 크기가 필요합니다. 이 연구는 조사자 모집단에서 더 큰 보완 연구가 가능한지 여부를 결정하기 위해 고안된 파일럿 조사입니다.

혈액 샘플 수집 등록 및 무작위화 시점에 각 참가자로부터 정맥혈 샘플을 수집했습니다. 산모의 혈액은 EDTA가 들어 있는 튜브의 전주와에서 채취하여 -4°C에 보관했습니다. 두 번째 산모 샘플은 비슷한 방식으로 진통을 위해 입원할 때 검색했습니다. 신생아 샘플은 코드 클램핑 직후 분만 시 유사하게 수집되었습니다. 수집 72시간 이내에 용혈되지 않은 산모 및 신생아 샘플을 확인하고 임상 원심분리기에서 5분 동안 원심분리하고 혈장 부분을 추출하여 지방산 분석이 수행될 때까지 -78°C에서 2mL 바이알에 보관했습니다.

지방산 분석:

샘플을 실온에서 해동시키고 Folch 등(1957)의 방법에 따라 클로로포름/메탄올(2:1, v/v)을 사용하여 지질 추출을 수행하였다. 추출된 지질 잔류물은 질소 기류 하에 45oC에서 건조시킨 후 무게를 잰다. 혈청의 총 인지질 성분은 클로로포름:메탄올(2:1,v/v)로 혈청의 1mL 분취량을 추출하여 얻은 총 지질 분획의 규산 컬럼 크로마토그래피(26)에 의해 분리되었습니다. 지방산은 메탄올에서 0.5N NaOH와 메탄올에서 14%(w/v) 삼불화붕소를 사용하여 메틸 에스테르를 생성하기 위해 에스테르 교환 반응을 했습니다(27). 운데센산(Nu-Check Prep, Elysian, MN)은 메틸화 전에 첨가되었고 내부 표준으로 사용되었습니다.

지방산 메틸 에스테르는 자동 주입기, split/splitless 모세관 주입 시스템, 불꽃 이온화 검출기가 장착된 가스 크로마토그래프(6890N, Agilent Technologies, Sunnyvale, CA)를 사용하여 정량화되었습니다(28)(). Loor와 Herbein(28)이 기술하고 AA와 DHA를 포함한 순수한 메틸 에스테르 표준으로 만든 맞춤형 지방산 혼합물(Nu-Check Prep, Elysian, MN, USA; Sigma, St. Louis, MO, USA)을 사용했습니다. 피크를 식별하고 Chem DataStation(Agilent Technologies, Sunnyvale, CA)과의 통합을 위한 응답 계수를 결정합니다.